Geri Dön

Investigation of conformational dynamics of single fluorescent protein-based biosensors by molecular dynamics simulations

Tek floresan proteı̇n tabanlı bı̇yosensörlerı̇n konformasyonel dı̇namı̇klerı̇nı̇n moleküler dı̇namı̇k sı̇mülasyonlarıyla ı̇ncelenmesı̇

  1. Tez No: 897066
  2. Yazar: MELİKE BERKSÖZ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. CANAN ATILGAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyofizik, Biophysics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Sabancı Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji, Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Genetik olarak kodlanmış floresan biyosensörler (GEFB'ler) birçok metabolit ve hücresel süreç için güvenilir hücre içi izleyicilerdir. GEFP'ler floresan bir proteinin (FP), ligand bağlandığında konformasyonel bir değişikliğe uğrayan bir algılama proteinine genetik olarak kaynaştığı modüler bir yapıya sahiptirler. Bu konformasyonel kayma, kromofor ortamında bir değişikliği tetikleyerek FP'nin spektral özelliklerini etkiler. Etkin biyosensörler için önem taşıyan yapısal unsurlar, hem ligand bağlı hem de ligandsız formların kristal yapıları erişilebilir hale geldiğinde ancak geriye dönük olarak fark edilir. Bu durum, istenen analite göre uyarlanmış yeni biyosensörler geliştirme sürecini zorlaştırmaktadır. Bu tezde, tüm atom klasik moleküler dinamik (MD) simülasyonlarını kullanarak, sırasıyla parlak (ON) ve sönük (OFF) seviyeleri temsil eden, hem ligand bağlı hem de bağlı olmayan konformasyonlarda yüksek performanslı biyosensörlerin yapısal belirleyicilerini araştırdık. Kromofor ortamının allosterik modülasyonuna ışık tutmak için sensör yapısı genelindeki hidrojen bağı doluluk oranlarındaki değişiklikleri karakterize ettik. Ligand bağlanma bölgesinden kromofor çevresine kadar süreklilik arzeden bir hidrojen bağı ağının ve kromofor etrafındaki düşük su yoğunluğunun yüksek performanslı sensörleri ayırt eden için iki güçlü gösterge olduğunu gösterdik. Çalışmamızın sonuçları yeni biyosensörlerin etkili tasarımı için önemli bir altyapı oluşturmaktadır.

Özet (Çeviri)

Genetically encoded fluorescent biosensors (GEFBs) proved to be reliable tracers for many metabolites and cellular processes. They have a modular structure where a fluorescent protein (FP) is genetically fused to a sensing protein which undergoes a conformational change upon ligand binding. This change triggers a shift in the chromophore environment, altering the FP's spectral characteristics. The structural elements crucial for effective biosensors are only discerned retrospectively, when crystal structures of both ligand-bound and ligand-free forms become accessible. Consequently, developing new biosensors tailored to specific analytes often involves extensive trial and error processes. In this thesis, we investigate the structural determinants of high performance biosensors in both ligand bound and unbound conformations, representing the bright (ON) and dark (OFF) states respectively, by using all-atom classical molecular dynamics (MD) simulations. We characterize the shifts in hydrogen bond occupancies over the total sensor structure to shed light on the allosteric modulation of chromophore environment. Furthermore, we deduce two strong indicators for distinguishing the ON state of high performance sensors; a continous network of hydrogen bonds from the ligand binding site up to the chromophore environment and reduced water density around the chromophore. Our results form the groundwork for the efficient design of new biosensors by reducing experimental screening time.

Benzer Tezler

  1. Kuyruk modelleri ve analizi üzerine bir uygulama

    Başlık çevirisi yok

    DİDEM ÖZPULAT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    İstatistikEge Üniversitesi

    Bilgisayar Bilimleri ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FİKRET İKİZ

  2. Samsun ve çevresinde tarla sarmaşığı (conuolvulus arvensis L.)'na karşı biyolojik savaşa esas olacak fauna tespiti

    Investigations on the insect fauna of the field binweed (Conuolvulus arvensis L.) related to its biological control in Samsun Province

    YASEMİN UFUK GERMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    BotanikEge Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NİYAZİ LODOS

  3. Gebelik ve doğum olgularında prolaktin düzeylerinin değerlendirilmesi

    The Evaluation of prolactin values during pregnancy labour and in deliveries

    TÜLİN AKAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1987

    Kadın Hastalıkları ve DoğumGazi Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. MÜLAZIM YILDIRIM