Geri Dön

Erişkin insan normal hemoglobinine karşı faj gösterim yöntemi ile rekombinant antikor geliştirilmesi

Başlık çevirisi mevcut değil.

  1. Tez No: 91467
  2. Yazar: BERRİN ERDAĞ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. BEYAZIT ÇIRAKOĞLU
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 1999
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 154

Özet

IX ÖZET Son zamanlarda geliştirilen“Faj Gösterim Teknikleri”ile farklı sınıflara ait birçok molekül için algılayıcı yapıların oluşturulması sağladığı gibi bağışıklama yapılmaksızın antikor geliştirilmesi de mümkün olmaktadır. Faj gösterim teknolojisinin bu özellikleri bilim adamlarına, tanı amaçlı hayvan antikorları geliştirilmesinde zaman kazanımı, tedaviye yönelik insan antikorları geliştirme olanağı ve aynı zamanda immünojen olmayan moleküller ve haptenler için antikor üretim şansı sağlar. Bu çalışmada, kolon kanserinin bir işareti olabilecek dışkıdaki gizli kanın ve hemoglobinopatilerde populasyon taraması çalışmalarında diğer hemoglobin tiplerinin tespit edilmesinde kullanılmak üzere nihai hedef olan immünokitlerin geliştirilmesi amacıyla faj gösterim teknolojisi kullanarak scFv ( tek zincir değişken parça) formunda rekombinant anti-hemoglobin A elde edildi. Hemoglobin A'ya karşı scFv üretimi için, ticari olarak satılan liyofilize hemoglobin A ile Balb/CJ soyuna ait fare bağışıklandı ve antikor molekülünün fonksiyonel değişken ağır ve hafif zincir genleri antijenle uyarılmış B lenfosit mRNA'larından elde edildi. Immunglobulin değişken ağır ve hafif zincirleri PCR yardımıyla scFv formunda bir arayagetirilerek pCANTAB5E vektörüne klonlandı. Beş tur yapılan“biopanning”işlemi sorasında rastlantısal olarak seçilen 93 adet klon hemoglobine karşı faj ELİSA yöntemi ile tarandı ve beş adet klon pozitif olarak kabul edildi. Faj ELİSA sonuçlarına göre pozitif olan klonlar klonlama bölgeleri ve insert büyüklükleri polimeraz zincir reaksiyonu ve enzim kesimleriyle ile test edildi. BerHb77 olarak isimlendirilen klonun nükleotid dizisinin tespit çalışmaları yapıldı. BerHb77' ye ait olan nükleotid dizisinin nükleotid dizi bankasında ( GENBANK) yapılan karşılaştırmaları sonucunda aynı diziye rastlanmadı. Sonuçlar diğer hemoglobin tiplerinin saha tespit çalışmasında kullanılacak olan immüntanı kitlerinin geliştirilmesinde faj gösterim teknolojisinin kullanılabilirliğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

vıı SUMMARY Recently developed“phage display techniques”are used to find ligands for many molecules of different classes which can be applied in purification schemes, diagnostics or therapeutics.presenting great potential in the field of the development of antibodies. These characteristics of the“Phage DisplayTechnology”can givethe opportunity to the scientists time- saving in the case of animal antibodies, the chance for the development of human antibodies and also providing antibody production for non- immunogenic molecules and haptens or self antigens in all cases. In this study we obtained recombinant anti-human hemoglobin A in the form of scFv ( single chain variable fragment ) by using phage display technology with the ultimate aim of developing immunodiagnostic kits for the detection of occult blood in the feces which could be a sign of the column cancer and other hemoglobin types for population screening studies in hemoglobinopathies. In the production of anti-hemoglobin A scFv, Balb/CJ mice were immunized with lyophilized commercial human hemoglobin A and the functional variable heavy and light chain genes of antibody were obtained from antigen stimulated B-lymphocyte mRNAs. Variable Ig heavy and light chain genes were assembled together in the form of scFv by polymerase chain reaction and cloned into the vector pCANTAB5E ( purchase from Pharmacia). After the five round of“biopanning”.randomly selected 93 clones were tested against human hemoglobin by phage ELISA and five clones were accepted as positive. According to the phage ELISA results ; positive clones were tested with respect to its multiple cloning site and its insert size with polymerase chain reaction and restriction enzyme digestion. The clone coded as BerHb77 was sequenced to identify its nucleotide composition. The nucleotide sequence of BerHb77scfv was compared with nucleotide data bank ( GENBANK) by using BLAST and couldn't be found same nucleotide sequence in data bank.vııı The results show that application of phage display technology is possible for developing immunodiagnostic kits for detection other hemoglobin types for population screening studies in hemoglobinopaties.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    192217

    Manisa yöresinde demir eksikliği anemi prevalansı ve demir eksikliği anemisinde tarama testi olarak rutin hemogram, RDW ve ferritinin kullanımı

    The prevalance of iron deficieny anemia in Manisa and using of hemogram, RDW and ferritin for searcing of iron deficiency anemia

    VİLDAN ÜRK TAŞYENEN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıCelal Bayar Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. ALİ ONAĞ

  2. Tez No

    163953

    Gebelik ve cinsel doyum

    Pregnancy and sexual satisfaction

    SUPHİ TUNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Kadın Hastalıkları ve DoğumAnkara Üniversitesi

    Disiplinlerarası Sosyal Psikiyatri Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. OĞUZ BERKSUN

  3. Tez No

    365867

    Deneysel özofagus ve mide alkali koroziv yanıklarında Hypericum perforatum'un (Sarı kantaron) iyileştirici etkisinin araştırılması

    Investigation hypericum perforatum (St. john's wort) therapeutic effects on the experimental models of esophageal and gastric alkali corrosive burns

    ERKAN GÜVENÇ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    İlk ve Acil YardımEge Üniversitesi

    Dahili Tıp Bilimleri Bölümü

    DOÇ. DR. GÜÇLÜ SELAHATTİN KIYAN

  4. Tez No

    420516

    Paklitaksel'in in vitro ve in vivo nörotoksik etkileri

    In vitro and in vivo neurotoxic effects of paclitaxel

    MELİH DAĞDEVİREN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyolojiEge Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEFİSE ÜLKÜ KARABAY YAVAŞOĞLU

  5. Tez No

    193726

    III. ventrikülün taban anatomisinin endoskopik ventrikülostomi komplikasyonları ile ilişkisi

    The relation between the third ventricle floor anatomy and endoscopic ventriculostomy complications

    SELÇUK AYDIN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    NöroşirürjiUludağ Üniversitesi

    Nöroşirürji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. ENDER KORFALI

Geri Dön