Geri Dön

Pankreas kanseri tedavisinde potansiyel bir doğal yan ürün olarak gökkuşağı alabalığı (Oncorhynchus mykiss, Walbaum 1792) deri mukusunun in vitro araştırılması

In vitro investigation of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum 1792) skin mucus as a potential natural byproduct in pancreatic cancer therapy

PDF İndir

  1. Tez No: 922130
  2. Yazar: BÜŞRA ÖZÇAY EKŞİ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. EMİNE ARSLAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Su Ürünleri, Biology, Biotechnology, Aquatic Products
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Selçuk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 128

Özet

Pankreas kanseri, pek çok kanser türüne kıyasla geç tanı koyulan, 5 yıllık sağ kalım oranı oldukça düşük, sınırlı tedavi seçeneği bulunan ve kötü prognozu ile bilinen ölümcül bir gastrointestinal kanser türüdür. Balıklar gibi doğuştan güçlü bir bağışıklık sistemine sahip alt omurgalılardaki deri mukusu, benzersiz pek çok biyoaktif bileşene sahiptir ve bu bileşenlerin antikanser özellikleri daha önce bildirilmiştir. Pankreas kanserinin oldukça kötümser tablosundan ve gökkuşağı alabalığının ülkemizdeki kültür balıkçılığındaki öneminden yola çıkarak, bu tez çalışması kapsamında, pankreas kanserine karşı gökkuşağı alabalığı (Oncorhynchus mykiss) deri mukusunun anti kanser potansiyeli in vitro olarak değerlendirilmiştir. Tez kapsamında gerçekleştirilen in-vitro analizlerin ilk basamağı olarak, deri mukusu non-invaziv bir teknikle canlıya zarar vermeden toplandı ve PBS içerisinde homojenize edildi. Ardından homojenat liyofilize edilerek toz halde stoklandı. Antikanser aktivitenin ilk basamağı olarak ise pankreas kanseri hücre hattı olan PANC-1 ve sağlıklı kolon hücre hattı olan CCD18-co hücrelerine yönelik balık mukusunun sitotoksisitesi MTT metodu ile belirlenerek balık mukusunun selektif aktivitesi değerlendirildi. Deri mukusunun, PANC-1 hücrelerinde migrasyon kabiliyeti üzerine etkisi ise wound healing assay (yara iyileşme deneyi) ile analiz edildi. Ayrıca, pankreas kanseri gelişiminde sürücü genler olarak kabul edilen onkogenik KRAS ve tümör baskılayıcı p53 genlerinin ekspresyon seviyelerine balık mukusu maruziyetinin etkisi de qPCR metodu ile değerlendirildi. Son olarak balık mukusu maruziyetinin PANC-1 hücrelerinde meydana getirdiği DNA hasarı ve genotoksik etkisi ise fosforillenmiş histon H2A.X (Ser139)'e bağlanan, Alexa Fluor 488 konjuge monoklonal antikor kullanılarak gerçekleştirilen immün boyama metodu ile analiz edildi. Elde edilen bulgular, deri mukusunun PANC-1 ve CCD18-co hücrelerine karşı 24, 48 ve 72 saatlik tüm inkübasyon periyotları için selektif sitotoksisitesi göstermektedir. Bununla birlikte PANC-1 hücreleri için 3,10 mg/mL olarak elde edilen IC50 konsantrasyonu sonucu en verimli maruziyet süresi 48 saat olarak tespit edilmiştir. Gerçekleştirilen migrasyon analizi sonrasında ise balık mukusunun PANC-1 hücrelerinde doza bağımlı anti metastatik potansiyeli tespit edilmiştir. Ayrıca, gerçekleştirilen qPCR çalışmaları sonuçlarına göre balık mukusu maruziyeti PANC-1 hücrelerinde, p53 tümör süpressör geninin ekspresyonunu yukarı yönde düzenlemektedir. Genotoksisite analizleri ise balık mukusu muamelesinin PANC-1 hücrelerinde doza bağımlı bir şekilde DNA hasarı meydana getirdiğini göstermektedir. Sonuç olarak, tüm bu bulgular birlikte ele alındığında, gökkuşağı alabalığının ticari değeri olmayan yan ürünü niteliğindeki deri mukusunun, PANC-1 kanser hücrelerine karşı keşfedilmemiş bir anti kanser terapötik ajan potansiyeli olduğunu göstermektedir. Elde edilen bu verilerin daha ileri çalışmalara katkı sağlayarak yeni tedavi yaklaşımlarının keşfedilmesine ışık tutacağı kanaatindeyiz.

Özet (Çeviri)

Pancreatic cancer is a gastrointestinal malignancy that is diagnosed later than many other cancers, exhibits a markedly low 5-year survival rate, has restricted therapeutic alternatives, and is characterized by a dismal prognosis. The skin mucus of lower vertebrates, such as fish, which have a naturally strong immune system, contains many unique bioactive components, and the anticancer properties of these components have been reported previously. This thesis study assessed the anticancer potential of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) skin mucus against pancreatic cancer in vitro, considering the bleak outlook of pancreatic cancer and the important role of rainbow trout in our country's aquaculture. The initial phase of the in vitro investigations for the thesis involved collecting skin mucus, rich in several bioactive chemicals, using a non-invasive method that did not injure the living fish. This was followed by homogenizing the mucus in PBS. The final homogenate was lyophilized and preserved as a powder. The MTT assay was employed to evaluate the cytotoxicity of fish mucus on the pancreatic cancer cell line PANC-1 and the healthy colon cell line CCD18-co. Thus, the selective anti-cancer efficacy was assessed. A wound-healing assay was used to examine the effect of fish mucus on the migratory capacity of PANC-1 cells. The effect of fish mucus treatment on the expression levels of the oncogenic KRAS and tumor suppressor p53 genes, key drivers in pancreatic cancer development, was assessed using the qPCR method. The DNA damage and genotoxic effects caused by fish mucus treatment in PANC-1 cells were assessed using an immunostaining technique using an Alexa Fluor 488-conjugated monoclonal antibody specific to phosphorylated histone H2A.X (Ser139). The results indicate that skin mucus demonstrates selective cytotoxicity against PANC-1 cells in comparison to CCD18-co cells across the 24, 48, and 72-hour incubation periods. The most effective exposure time for PANC-1 cells was established at 48 hours, with an IC50 value of 3.10 mg/mL. The migration assay demonstrated that fish mucus exhibits a dose-dependent anti-metastatic effect on PANC-1 cells. Furthermore, the results of the qPCR investigations indicate that exposure to fish mucus enhances the expression of the p53 tumor suppressor gene in PANC-1 cells. Genotoxicity investigations indicate that treatment with fish mucus induces dose-dependent DNA damage in PANC-1 cells. In summary, based on all findings, the skin mucus of the rainbow trout, a non-commercial byproduct, exhibits unexplored potential as an anti-cancer therapeutic agent against PANC-1 cancer cells. We believe that the information collected will enhance ongoing research and highlight the identification of novel therapeutic strategies.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    531265

    Antitümörojenik fenolik bileşiklerin pankreas kanser hücre hattında etkinliğinin incelenmesi

    Assessment of the efficiency antitumorigenic phenolic compounds in pancreatic cancer cell line

    BERZAN EKMEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyokimyaEge Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLİNNAZ ERCAN

  2. Tez No

    919272

    Bağırsak hasar modellerinde kemik iliği mezenkimal kök hücre ve bağırsak mezenkimal kök hücrelerin rejeneratif ve immün modülatuvar etkilerinin karşılaştırılması

    Comparison of regenerative and immune modulatory effecets of bone marrow and intestinal mesenchymal stem cells i intestinal damage models

    BURCU PERVİN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2025

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATİMA AERTS KAYA

  3. Tez No

    837060

    5-fluorourasil için polimer/biyoseramik ve grafen oksit içerikli ilaç taşıyıcı malzeme üretimi ve kinetik çalışmaları

    Production and kinetic studies of polymer/bioceramic and graphene oxide containing drug carrier materials for 5-fluorouracil

    EBRU KAHRAMAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLHAYAT SAYGILI

  4. Tez No

    518164

    Development of recombinant oncolytic Coxsackievirus B3 for treatment of colorectal carcinoma

    Kolorektal kanser tedavisi için rekombinant onkolitik koksaki B3 virüslerinin geliştirilmesi

    AHMET HAZİNİ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM IŞILDAK

  5. Tez No

    949457

    Retusinin pankreatik duktal adenokarsinom hücre hattı (PANC-1) üzerine etkilerinin incelenmesi

    Investigation of the effects of retusin on pancreatic ductal adenocarcinoma cell line (PACC-1)

    MİRAY BAŞDA KARAÇAM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    Tıbbi BiyolojiGaziantep Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜLPER NACARKAHYA

    PROF. DR. ŞENAY GÖRÜCÜ YILMAZ

Geri Dön