Geri Dön

Mikrobiyota kaynaklı biyoaktif postbiyotiklerin aşı adjuvanı olarak kullanım potansiyellerinin belirlenmesi

Determination of the potential use of microbiota-derived bioactive postbiotics as vaccine adjuvants

PDF İndir

  1. Tez No: 931439
  2. Yazar: HAZAL KİBAR DEMİRHAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. FADİME KIRAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 185

Özet

Bu tez çalışmasının amacı, mikrobiyota kaynaklı biyoaktif postbiyotiklerin (MKBP'lerin) aşı adjuvanı olarak kullanım potansiyelini belirlemektir. Bu kapsamda, Lactiplantibacillus plantarum EIR/IF-1, Limosilactobacillus reuteri EIR/Spx-2, Pediococcus pentosaceus EIR/HM-1 ve Weissella cibaria EIR/P-1 suşları MKBP üreticisi olarak kullanılmıştır. Bakterilerinden bakteriyel hücresiz süpernatantlar (BHS), hücre dışına salınan veya hücre duvarında bulunan ekzopolisakkaritler (EPS-r ve EPS-b) ve bakteriyel ekstraselüler veziküller (BEV) elde edilmiş ve RAW264.7 makrofaj hücrelerinde sitotoksik etki sergilemeyen dozları MTT analizi neticesinde belirlenmiştir. MKBP'lerin immunostimülant etkileri ELİZA, qRT-PZR, akış sitometrisi ve nitrik oksit analizi neticesinde Escherichia coli kaynaklı lipopolisakkarit (LPS) ile karşılaştırılarak değerlendirilmiştir. Elde edilen veriler neticesinde L. plantarum EIR/IF-1 kaynaklı EPS-r (100 µg/mL) ile L. reuteri EIR/Spx-2 kaynaklı BEV'lerin (25 µg/mL) LPS ile karşılaştırıldığında adjuvan adayı olarak kullanılabilecekleri belirlenmiştir. Karakterizasyon analizleri neticesinde farklı iki fraksiyon sergileyen (51 ve 841 kDa) EPS-r'nin heteropolisakkarit olduğu tespit edilmiştir. BEV'in boyut aralığı 55-228 nm, konsantrasyonu ise 5.24×10⁷ partikül/mL olarak belirlenmiştir. Tez çalışmasının ikinci bölümünde, MKBP üreticisi bakterilerin bağışıklık düzenleyici etkileri in vivo koşullarda belirlenmiştir. Bakterilerle 21 gün süresince her gün beslenen farelerin kolon ve ileum dokularında pro-inflamatuvar gen ifadelerinde azalma, TLR4, NOD1, musin gen ifadeleri ile bağırsak bariyer bütünlüğünün korunmasında kritik rol oynayan ZO1 gen ifadesinde artış belirlenmiştir. Fekal mikrobiyota analizleri neticesinde ise Akkermansia muciniphila'da artış gözlemlenmiştir. Sonuç olarak, L. plantarum EIR/IF-1 bakterisinden elde edilen EPS-r ve L. reuteri EIR/Spx-2 bakterisinden elde edilen BEV'in immünostimülant özellikleri nedeniyle terapötik aşı uygulamaları için uygun, güvenli ve etkili birer potansiyel adjuvan adayı olabilecekleri, bu MKBP'leri üreten bakterilerin ise bağışıklık sistemini düzenleyici etkileri ile önemli probiyotik adaylar olarak değerlendirilebileceği öngörülmüştür.

Özet (Çeviri)

The aim of this thesis is to evaluate the potential of microbiota-derived bioactive postbiotics (MDBPs) as vaccine adjuvants. In this context, Lactiplantibacillus plantarum EIR/IF-1, Limosilactobacillus reuteri EIR/Spx-2, Pediococcus pentosaceus EIR/HM-1, and Weissella cibaria EIR/P-1 strains were used as producers of MDBPs. Bacterial cell-free supernatants (BCFS), exopolysaccharides released from the cells (EPS-r) or found in the cell wall (EPS-b), and bacterial extracellular vesicles (BEVs) were harvested from the bacteria. The doses that did not exhibit cytotoxic effects on RAW264.7 macrophage cells were determined via MTT analysis. The immunostimulatory effects of MDBPs were assessed by comparison with lipopolysaccharide (LPS) from Escherichia coli, using ELISA, qRT-PCR, flow cytometry, and nitric oxide analysis. The results indicated that EPS-r (100 µg/mL) from L. plantarum EIR/IF-1 and BEV (25 µg/mL) from L. reuteri EIR/Spx-2 could serve as potential adjuvant candidates when compared to LPS. Characterization analysis revealed that EPS-r, which exhibited two different fractions (51 and 841 kDa), was a heteropolysaccharide. The size range of BEVs was found to be 55-228 nm, with a concentration of 5.24×10⁷ particles/mL. In the second part of the thesis, the immunoregulatory effects of the MDBPs-producing bacteria were evaluated under in vivo conditions. In the colon and ileum tissues of mice that were fed the bacteria daily for 21 days, a decrease in pro-inflammatory gene expression, as well as an increase in the expression of TLR4, NOD1, mucin genes, and ZO1, which plays a critical role in maintaining intestinal barrier integrity, were observed. Fecal microbiota analyses revealed an increase in Akkermansia muciniphila. In conclusion, EPS-r derived from L. plantarum EIR/IF-1 and BEVs derived from L. reuteri EIR/Spx-2 were predicted to be safe and effective potential adjuvant candidates for therapeutic vaccine applications, owing to their immunostimulatory properties. Moreover, these MDBPs-producing bacteria may also be considered as important probiotic candidates due to their immunoregulatory effects.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    411860

    Metabolism of Turkish black tea phenolics by human gut microbiota

    Siyah çay fenoliklerinin insan kalın bağırsak mikroflorası ile etkileşimi

    EZGİ ÖZCAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATMA YEŞİM KADIPAŞAOĞLU

    YRD. DOÇ. DR. ÖZLEM GÜÇLÜ ÜSTÜNDAĞ

  2. Tez No

    420119

    Candida türlerinde biyofilm oluşumu ve antifungal duyarlılığa etkisi

    Biofilm formation in candida species and its effect on antifungal susceptibility

    HACER ASLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    MikrobiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. DOLUNAY GÜLMEZ KIVANÇ

  3. Tez No

    420952

    Helicobacter pylori tedavisinin mikrobiyota üzerine etkisi

    The effects of Helicobacter pylori treatment on microbiota

    SERAP SÜZÜK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    GastroenterolojiGazi Üniversitesi

    Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE MELTEM ÇIRAK

  4. Tez No

    879760

    Determination of enterotype specific microbial biomarkers from metagenome data for early diagnosis and screening system in colon cancer

    Kolon kanserinde erken tanı ve tarama sistemi için metagenom verilerinden enterotip spesifik mikrobiyal biyobelirteç tayini

    ÜNZİLE GÜVEN GÜLHAN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyoistatistikGebze Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DR. SALİHA DURMUŞ

  5. Tez No

    879825

    Kadınlara yönelik bir mikrobiyota eğitim programının geliştirilmesi ve değerlendirilmesi

    The development and evaluati̇on of a microbiota education programme intended for women

    HAVVA REYHAN ŞİMŞEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    EbelikKırklareli Üniversitesi

    Ebelik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZGENUR HACIOĞLU

Geri Dön