Geri Dön

Doğal maya suşlarının mevcut fermantasyon yeteneklerinin mutasyonla geliştirilmesi ve bacillus sp. amilaz geninin maya hücrelerine transferi

Improvement of fermantation abilities presents in wild type yeast strains by mutation and transfer of amylase gene from bacillus sp. to yeast cells

  1. Tez No: 95575
  2. Yazar: MUTLU NİSA ÜNALDI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. BURHAN ARIKAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Maya, Fermantasyon Verimi, Mutasyon, Elektrofüzyon, Yeast, Fermentation Efficency, Mutation, Electrofusion II
  7. Yıl: 2000
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Çukurova Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 106

Özet

DOKTORA TEZİ DOĞAL MAYA SUŞLARININ MEVCUT FERMANTASYON YETENEKLERİNİN MUTASYONLA GELİŞTİRİLMESİ VE BACILLUS SP. AMİLAZ GENİNİN MAYA HÜCRELERİNE TRANSFERİ MUTLU NİSA UNALDI ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİYOLOJİ ANABİLİM DALI Danışman: Doç.Dr. Burhan ARIKAN Yıl: 2000, Sayfa: 106 Jüri :Prof.Dr. Ömer ÇOLAK, Prof. Dr. Nedim UYGUN, Doç.Dr. Haluk ERTAN, Yrd.Doç.Dr. Hatice GÜVENMEZ Bu çalışmada, doğal ortamlardan izole edilen yaban tip maya suşlarının mevcut fermantasyon yeteneklerinin mutasyonla artırılması ve termofil Bacillus sp. amilaz geninin maya suşlarına elektrofüzyon tekniği ile aktarılması amaçlanmıştır. İzole edilen yaban tip maya suşlarının fermantasyon verimlerini saptamak amacıyla alkol toleransları ve osmotik stabiliteleri araştırılmıştır. Fermantasyonun çeşitli aşamalarında izole edilen izolatların alkol toleranslarının %5-%9 (v/v) arasında olduğu, osmotik stabilitelerinin de maksimum %30 olduğu bulunmuştur. Y2 olarak isimlendirilen suş fermantasyonu hızlı gerçekleştirmesi ve alkol toleransının yüksek olması nedeniyle genetik çalışmalar için seçilmiştir. Yİ, Y2, Y7, Y9, Y12, Y14, Y15, Y18, Y19 ve Y23 suşlarında termotolerans davranışın varlığı araştırılmıştır. Termotolerans davranış bulunan suşlardan total protein izolasyonu yapılmış ve Hsp (Heat-Shock protein)'lerinin varlığı araştırılmıştır. Total proteinlerin SDS-PAGE analizinde Y2 suşunda yaklaşık 100.000 D'luk farklı bir protein bandı tespit edilmiş ve Hsp proteini olarak değerlendirilmiştir. Genetik çalışmalar için seçilen Y2 suşu 20, 30, 40 ve 50 saniyelerde UV ışını ile muamele edilmiş ve dirençli koloniler seçilerek fermantasyon verimlerindeki değişiklik araştırılmıştır. Başlangıçtaki %9'luk alkol toleransının UV muamelesinden sonra %12'ye, %30'luk osmotik stabilitenin %35'e çıktığı bulunmuştur. Gen transferi çalışmaları için termofil Bacillus sp. suşları izole edilmiş ve amilaz ve selülaz enzim aktiviteleri araştırılmıştır. Amilaz ve selülaz aktivitesi yüksek bulunan ÇTB-2 suşundan kromozomal DNA izolasyonu gerçekleştirilerek lipozomlara yüklenmiştir. DNA yüklü lipozom ile Y2M suşu arasında protoplast elektrofüzyonu gerçekleştirilmiştir. YPS agar besiyerine ekilen füzantlarda amilaz aktivitesi saptanırken, CMC'li besiyerinde selülaz aktivitesi saptanamamıştır. Füzantlar 1 'er haftalık aralıklarla YPS besiyerine ekilmiş ancak 3. denemeden sonra enzim aktivitesi gözlenememiştir.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT PhD THESIS IMPROVEMENT OF FERMENTATION ABILITIES PRESENT IN WILD TYPE YEAST STRAINS BY MUTATION AND TRANSFER OF AMYLASE GENE FROM BACILLUS SP. TO YEAST CELLS MUTLU NİSA ÜNALDl DEPARTMENT OF BIOLOGY INSTITUTE OF NATURAL AND APPLIED SCIENCES UNIVERSITY OF ÇUKUROVA Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Burhan ARIKAN Year:2000, Pages: 106 Jury : Prof. Dr. Ömer ÇOLAK, Prof. Dr. Nedim UYGUN, Assoc. Prof. Dr. Haluk ERTAN, Assist. Prof. Dr. Hatice GÜVENMEZ In this study, it was aimed to improve the fermentation ability of wild type yeast strains isolated from nature by mutation and to transfer of amylase gene from thermophile Bacillus sp. to yeast strains by electrofusion technique. Alcohol tolerance and osmotic stability of the wild type yeast strains were investigated to determine fermantation efficiency. It was found that alcohol tolerance of the yeast strains isolated at various stages of fermantation was 5-9% (v/v) and osmotic stability was 30%. The strain which was named as Y2 was chosen for genetic applications due to high alcohol tolerance and rapid fermantation ability. Thermotolerance behavior of Yl, Y2, Y7, Y9, Y12, Y14, Y15, Y18, Y19 and Y23 strains were investigated and Hsp proteins were investigated. On SDS-PAGE analysis, a protein band approximately 100.000 D of molecular weight was determined and it was estimated as a Hsp protein. Y2 strain which was chosen for genetic applications was treated with UV light with intervals of 20, 30, 40 and 50 seconds. By selecting resistant colonies, changes of fermentation efficiency were investigated. It was found that alcohol tolerance increased from 9% (v/v) to 12% (v/v), osmotic stability increased from 30% to 35%. Thermophile Bacillus sp. strains were isolated for gene transfer tests and amylase and cellulase activity were investigated. Chromosomal DNA was isolated from ÇTB-2 strain having high amylase and cellulase activity and DNA was loaded to liposomes. Protoplast electrofusion was performed between DNA loaded liposom and Y2M strain. Amylase activity was determined on fusants spreaded on YPS medium, but cellulase activity was not determined on CMC medium. Fusants were spreaded on YPS medium with 1 week interval. After third inoculation, enzyme activity couldn't been detected.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    485242

    Probiyotik laktik asit bakterileri kullanılarak bitkisel süt ikamelerinden fermente içecek tasarımı

    Production of novel vegetal based beverages fermented by probiotic lactic acid bacteria

    BÜŞRA DEMİRCAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEYNEP DİLEK HEPERKAN

  2. Tez No

    874312

    Molecular characterization of phenylethanol resistance in Saccharomyces cerevisiae

    Feniletanol direncinin Saccharomyces cerevısıae'de moleküler karakterizasyonu

    CAN HOLYAVKİN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEYNEP PETEK ÇAKAR

  3. Tez No

    703865

    Tarihi yapı bilgi modellerinde yapı bileşenlerinin anlamlıtemsili: gaziantep pişirici kasteli

    Meaningful representation of construction elements inhistorical building information models: gazianteppi̇şi̇ri̇ci̇ kastel

    FATİH UZUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Mimarlıkİstanbul Teknik Üniversitesi

    Bilişim Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MİNE ÖZKAR KABAKÇIOĞLU

  4. Tez No

    816971

    Süt ürünlerinden izole edilen maya suşlarının moleküler identifikasyonu ve endüstriyel öneme sahip maya türlerinin belirlenmesi

    Molecular identification of yeast strains isolated from dairy products and determination of yeast species with industrial important

    MELİH GÜNAY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyolojiÇanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ TÜLAY TURGUT GENÇ

  5. Tez No

    574519

    Killer özellikli maya suşlarının toksin üretimi ve optimizasyon koşullarının belirlenmesi

    Determination of toxin production and optimization conditions of killer yeast strain

    NAGİHAN ÇİLCAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Gıda MühendisliğiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ARZU KART

Geri Dön