Geri Dön

Glucantime yüklü bakteriyel mini hücre üretimi ve ın vitro antileishmanial etkisinin değerlendirilmesi

Production of glucantime-loaded bacterial minicell and evaluation of in vitro antileishmanial effect

PDF İndir

  1. Tez No: 977751
  2. Yazar: ELİF DURASI
  3. Danışmanlar: PROF. DR. RABİA ÇAKIR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Leishmaniasis, Leishmaniasis
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyomühendislik Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Leishmaniasis, Leishmania parazitlerinin sebep olduğu ve enfekte dişi kum sineklerinin ısırmasıyla bulaşan bir hastalıktır. Mevcut ilaçların toksisitesinin yüksek olması, uzun süren tedavi sonucunda düşük başarı sağlaması ve fagositik hücre membranından geçişinin sınırlı olması nedeniyle hastalığın tedavisine yönelik daha etkin yaklaşımlara ihtiyaç duyulmaktadır. Bu nedenle, mevcut tedavilerin etkinliğinin artırılması ve yan etkilerin azaltılması amacıyla taşıyıcı sistemlerin kullanımı dikkat çekmektedir. Ek olarak, Leishmania amastigotları makrofaj hücrelerinde bölünerek çoğaldığı için leishmaniasis tedavisini zorlaştırmakta bu nedenle makrofajların hedef alınması önemli bir strateji olmaktadır. Mini hücreler, bakterilerden elde edilen ve replikatif olmayan nanopartiküllerdir. Geleneksel nanopartiküllerle karşılaştırıldığında, mini hücreler daha iyi biyouyumluluk, ilaç yükleme kapasitesi ve terapötik indeks gibi avantajlar sağlamaktadır. Ayrıca, mini hücreler membranlarında eksprese edilen patojenle ilişkili moleküler desenler (PAMP) gibi bakteriyel membran özellikleri nedeniyle makrofajların pattern tanıma reseptörleri (PRR) tarafından tanınarak doğal olarak hücre içine alınmaktadır. Tüm bu nedenlerle çalışmanın temel amacı, E. coli K-12 MG1655 bakterilerinden λ-Red homolog rekombinasyon yöntemiyle minCD genlerinin silinmesi yoluyla mini hücre üreten bakteri suşunun elde edilmesi, mini hücrelere Glucantime yüklenmesi ve in vitro antileishmanial etkinliğinin değerlendirilmesidir. Bu amaçla, MG1655 bakterilerinden minCD geni λ-Red homolog rekombinasyon yöntemiyle silinmiş ve koloni PCR yöntemiyle doğrulanmıştır. Elde edilen mini hücreler, Gram boyama, DLS ve SEM analizleri ile karakterize edilmiş ve boyutlarının 100-400 nm aralığında olduğu gösterilmiştir. Glucantime yüklü mini hücrelerin L. major enfekte J774A.1 hücrelerinde antileishmanial etkisi Giemsa boyama ve amastigot sayım yöntemiyle değerlendirilmiş ve Glucantime yüklü mini hücre uygulanan makrofajlarda amastigotlara rastlanmamıştır. Glucantime yüklü mini hücrelerin makrofajlarda ROS üretimini 3 kat, NO üretimini 1.5 kat artırdığı sırasıyla DCFH-DA ve Griess yöntemleriyle gösterilmiştir. Ayrıca, DilC18(3) işaretlenen mini hücrelerin hücre içine alımının fibroblast hücreleri ile karşılaştırıldığında makrofajlarda 4 kat daha fazla olduğu gösterilmiştir. Sonuç olarak, Glucantime yüklü mini hücrelerin makrofajlar tarafından etkili bir şekilde hücre içine alındığı ve Leishmania parazitlerine karşı etkili bir ilaç taşıyıcı sistem olabileceği gösterilmiştir.

Özet (Çeviri)

Leishmaniasis is a disease caused by Leishmania parasites and transmitted through the bites of infected female sand flies. Due to the high toxicity of existing drugs, low success rates after prolonged treatment, and limited permeation through phagocytic cell membranes, more effective approaches to treating the disease are needed. Therefore, the use of delivery systems is gaining attention to increase the efficacy of current treatments and reduce side effects. Additionally, Leishmania amastigotes divide and multiply within macrophage cells, making treatment of leishmaniasis challenging. Therefore, targeting macrophages is an important strategy. Minicells are non-replicating nanoparticles derived from bacteria. Compared to traditional nanoparticles, minicells offer advantages such as improved biocompatibility, drug-loading capacity, and therapeutic index. Furthermore, due to bacterial membrane properties such as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) expressed on their membranes, minicells are naturally internalized by macrophage pattern recognition receptors (PRRs). For all these reasons, the main objective of this study was to obtain a minicell-producing bacterial strain by deleting the minCD gene from E. coli K-12 MG1655 bacteria using the λ-Red homologous recombination method, to load the minicells with Glucantime, and to evaluate its in vitro antileishmanial activity. For this purpose, the minCD gene was deleted from MG1655 bacteria using the λ-Red homologous recombination method and confirmed by colony PCR. The resulting minicells were characterized by Gram staining, DLS, and SEM analyses, and their sizes were shown to be in the range of 100-400 nm. The antileishmanial activity of Glucantime-loaded minicells on L. major infected J774A.1 cells was evaluated by Giemsa staining and amastigote counting, and amastigotes were not observed in macrophages treated with Glucantime-loaded minicells. Glucantime-loaded minicells were shown to increase ROS production by 3-fold and NO production by 1.5-fold in macrophages using the DCFH-DA and Griess methods, respectively. Additionally, it was shown that the intracellular uptake of DilC18(3)-labeled minicells was fourfold higher in macrophages compared to fibroblast cells. In conclusion, Glucantime-loaded minicells were effectively taken up by macrophages and could be an effective drug delivery system against Leishmania parasites.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    859754

    Beta glukan'ın yara iyileştirme üzerine etkisi

    Effect of beta glucan on wound healing

    KIVANÇ TÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KEVSER ÖZGEN ÖZER

  2. Tez No

    457747

    Nanopartikül-glukantim ve nanopartikül-Nigella sativa yağ kombinasyonlarının Leishmania tropica'ya karşı antileishmanial etkilerinin in vitro ve in vivo incelenmesi ve Kütanöz leishmaniasis'in tedavisinde yeni yaklaşımlarının geliştirilmesi

    Investigation of antileishmanial effects of nanoparticle-glucantime and nanoparticle-Nigella sativa herbal oil combinations against Leishmania topica and development of new approaches in treatment of Cutaneous leishmaniasis

    EMRAH ŞEFİK ABAMOR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ADİL ALLAHVERDİYEV

  3. Tez No

    160472

    Leishmaniasis Cutis'te tedavi yöntemleri

    Başlık çevirisi yok

    GÜLER GÜNERHAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1984

    DermatolojiSağlık Bakanlığı

    Deri ve Zührevi Hastalıklar Ana Bilim Dalı

    DR. OKTAY TÜRKÖZÜ

  4. Tez No

    927347

    Mukokutanöz leishmaniasis etkeni leishmania majora karşı antimonial ilaç ve curcuma longa kaynaklı ekstraselüler veziküllerin antileishmanial etkinliğinin hücre kültürü sistemlerinde incelenmesi

    Investigation of antileishmanial efficiency of antimonialdrug and curcuma longa derived extracellular vesiclesagainst mucocutaneous leishmaniasis agent leishmaniamajor in cell culture systems

    KÜBRA KARADAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    ParazitolojiYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EMRAH ŞEFİK ABAMOR

  5. Tez No

    476208

    Preparation of cross-linked β-glucan as drug carrier

    İlaç taşıyıcı çapraz bağlanmış β-glucan hazırlanması

    AYŞEN EYİGÖR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Kimya MühendisliğiMarmara Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET SAYIP EROĞLU

Geri Dön