İnsan tümör hücre dizilerinde MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi
Evaluation of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in human tumor cell lines
- Tez No: 99005
- Danışmanlar: DOÇ.DR. DİCLE GÜÇ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Onkoloji, Biochemistry, Oncology
- Anahtar Kelimeler: MDR1/P-170, MRP1/P-190, Rhl23, CFDA, kalsein-AM, MDR1/P-170, MRPl/P-190, Rhl23, CFDA, calcein-AM A *$ j&*
- Yıl: 2000
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Doğan, A.L., İnsan tümör hücre dizilerinde MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi, Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Kanser Biyokimyası Programı BUim Uzmanlığı Tezi. Ankara, 2000. MDR1/P-170 ve/veya MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi için Rodamin 123 (Rhl23), kalsein asetoksimetil ester (kalsein-AM) ve karboksifloresan diasetat (CFDA) floresan boyaları kullanılabilir. Bu çalışmada, MRP1/P-190 için en iyi aktivite yöntemini belirlemek ve aynı hücrede MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerini birbirinden ayırmak amaçlandı. MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 ekspresyon düzeyleri farklı olan 11 hücre dizisi ile çalışıldı. MDR1/P-170 ve MRP/P- 190 ekspresyonlan akım sitometri ile ölçüldü ve MDR1/P-170 için UIC2 MoAb'u ve MRP1/P-190 için MRPm.6 MoAb'u kullanıldı. MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktiviteleri, MDRl/P-170'in özgül modülatörü olan siklosporin A (CsA) (2uM) ve MRP/P-190'm özgül modülatörleri olan probenesid (2mM) ve MK571 (lOuM) varlığmda ve yokluğunda kalsein-AM, CFDA ve Rhl23 alımı/atılımı kullanılarak akım sitometri ile incelendi. MDR1/P-170 ekspresyonu ile CsA'mn Rhl23 alımına etkisi (p<.0001), Rhl23 atılımına etkisi (p=.002) ve kalsein-AM alımına etkisi (p=.01) arasmda korelasyon saptandı. Bunun yamsıra, MRP1/P-190 ekspresyonu ile MK571'in kalsein-AM alımma etkisi (p=.01) ve probenesidin CFDA alımma etkisi (p=.02) arasmdaki korelasyonlar anlamlı bulundu. Probenesidin kalsein-AM alımma etkisi ile MRP1/P-190 düzeyi arasmdaki ilişki sınırda anlamlı idi (p=.09). Bu sonuçlar, MRP1/P-190 aktivitesini belirlemek için MK571 ile kalsein-AM alımı testi ve probenesid ile CFDA alımı testi kullanılabileceğini ve MDR1/P-170 için de CsA ile hem Rhl23 alımı ve/veya atılımı testi hem de kalsein-AM alımı testinin kullanılabileceğini göstermektedir. CFDA MDR1/P-170 substratı olmayabilir. Kalsein-AM ± CsA ± MK571, MDR1/P-170 ve MRP1/P190 aktivitelerini birlikte incelemek için en uygun testtir.
Özet (Çeviri)
VI ABSTRACT Doğan, A.L., Evaluation of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in human tumor cell lines. Hacettepe University Health Sciences Institute MSc Thesis in Cancer Biochemistry, Ankara, 2000. The fluorescent dyes Rhodamine 123 (Rhl23), calcein acetoxymethyl ester (calcein-AM) and carboxyfluorescein diacetate (CFDA) can be used to assess MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities. This study aimed to determine the best functional test for MRP1/P-190 measurement and discriminate between MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in the same cell. We used 11 cell lines with different levels of MDR1/P-170 and MRPl/P-190 expression. MDR1/P-170 and MRP1/P-190 proteins expression were measured by flow cytometry using UIC2 and MRPm6 MoAbs, respectively. We analysed the activities of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 by flow cytometry using calcein-AM, CFDA and Rh 123 uptake/efflux in the presence and absence of specific modulators of MDR1/P-170 [2uM of cyclosporin A, (CsA)] and MRP1/P-190 (2 mM of probenecid and lOuM of MK571). There was a correlation between MDR1/P-170 expression and CsA effect on Rhl23 uptake (p<.0001), on Rhl23 efflux (p=.002) and calcein-AM uptake (p=.01). Besides, the correlations between MRP1/P-190 expression and MK571 effect on calcein-AM uptake (p=.01) and between MRP1/P-190 expression and probenecid effect on CFDA uptake (p=.02) were significant. The correlation between MRP1/P-190 expression and probenecid effect on calcein-AM uptake (p=.09) was marginally significant. These results demonstrate that, calcein-AM uptake with MK571 and CFDA uptake with probenecid may be used to measure MRPl/P-190 activity, and that both Rhl23 uptake and/or efflux test and calcein-AM uptake test with CsA may be used for MDR1/P-170 activity measurement. CFDA may not be a substrate for MDR1/P-170. Calcein-AM ± CsA + MK571 is the sole test to assess the activities of both MDR1/P-170 and MRPl/P-190.
Benzer Tezler
- İnsan ve sıçan glial tümör hücre dizilerinde telomeraz aktivitesi ve hücre yüzey sialilasyonu arasındaki ilişkinin araştırılması
Investigation of correlation between the telomerase activity and cell surface sialylation in human and rat glioma cell lines
DİDEM COŞAN
Doktora
Türkçe
2006
Tıbbi BiyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. AYŞE BAŞARAN
- Meme kanseri hücre dizilerinde HIF-1 alfa inhibisyonunun incelenmesi
Evaluation of inhibition of HIF-1 alpha in mammary cancer cell lines
SAMET ÖKSÜZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. A. LALE DOĞAN
- Hepatoselüler karsinoma ve nöroblastoma hücre hatlarında insan telomerazı htert alt birimi olası glikozilasyon profilinin biyoinformatik ve deneysel yöntemlerle belirlenmesi
Determination of potential glycosylation profile for human telomerase's htert subunit in hepatocellular carcinoma and neuroblastoma cell line with bioinformatic and experimental methods
SİNEMYİZ ATALAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Tıbbi BiyolojiEge ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
PROF. DR. REMZİYE DEVECİ
- Tolfenamik asitin karaciğer kanser hücreleri üzerine etkisi
Başlık çevirisi yok
SÜHA AKIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
FizyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SELDA KABADERE
- Yağ dokusu kaynaklı Mezenkimal kök hücre Eksozomları ve Alfa Lipoik Asitin in-vitro koşullarda meme kanseri kök hücreleri üzerine etkilerinin incelenmesi
Analysing in-vitro effects of adipose-derived Mesenchymal stem cells Exosomes and alpha Lipoic Acid on breast cancer stem cells
GİZEM USLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiKocaeli ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ZEHRA SEDA HALBUTOĞULLARI