Geri Dön

Antimikrobiyal peptit olan GFP-myxinidin ile zenginleştirilmiş bakteriyel selüloz temelli hidrojel yara örtüsü geliştirilmesi

Development of a bacterial cellulose-based hydrogel wound dressing enriched with the antimicrobial peptite GFP-myxinidin

PDF İndir

  1. Tez No: 1013984
  2. Yazar: DERYA İLKE GÜNGÖR
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ŞENAY VURAL KORKUT, DOÇ. DR. AHMET KATI
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2026
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
  12. Bilim Dalı: Biyoteknoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Antimikrobiyal peptitler (AMP'ler), kısa aminoasit zincirlerinden oluşan pozitif yüklü biyomoleküllerdir. Aynı zamanda bakteri, maya gibi patojenlere karşı hücre savunma hattı oluşturarak bu mekanizma ile geleneksel antibiyotik patojenlerine karşı direnç oluşturulmasını engellemektedir. Bu nedenle antibiyotik direnci sorununa karşı potansiyel bir çözüm olarak umut vaat etmektedir. Bu tez çalışmasında, Myxinidin peptiti, yeşil floresan protein (GFP) etiketi ile rekombinant olarak üretilmiş ve bakteriyel selüloz temelli hidrojel içerisine eklenerek yara örtüsü geliştirilmesi sağlanmıştır. Hidrojellerin karakterizasyonları; antimikrobiyal etkileri, sitotoksisite ve yara iyileşme çalışmaları değerlendirilmiştir. GFP-Myx dizi, pET28(a) vektörüne klonlanarak E.coli Rosetta (DE3) suşuna eksprese edilmiştir. Afinite kromatografisi ile saflaştırılan protein, SDS-PAGE analiziyle doğrulanmıştır. Bakteriyel selülozdan karboksimetil selüloz sentezi gerçekleştirilmiş ardından polivinil alkol (PVA) ile fiziksel çapraz bağlı hidrojel sentezlenmiştir. GFP-Myxinidin ise direkt olarak fiziksel çapraz bağlama ile jele yüklenmiştir. Bakteriyel selülozdan elde edilen karboksimetil selüloz; FTIR, SEM, TGA, DS değeri hesaplamaları ile karakterize edilmiştir. L929 ve HaCat hücreleriyle yapılan MTT ve yara iyileşme testleriyle biyouyumluluk ve yara iyileşme potansiyeli değerlendirilmiştir. Karboksimetil selüloz sentezi başarıyla sentezlenmiştir. PVA/BS-KMS/GFP-Myx kombinasyonuna ait jelde E.coli ve S.aureus suşları antimikrobiyal aktivite gözlemlenmiştir. Jelde sitotoksisite gözlemlenmemiş, hücre canlılığı artmıştır. GFP etiketi sayesinde peptitin üretimi sırasında izlenebilirlik sağlanmıştır. Bakteriyel selüloz temel alınarak sentezlenen jelde biyouyumluluğun yanısıra GFP-Myx peptite ile hedefe yönelik taşıma sağlanarak biyolojik etki artmıştır. Bu sonuçlar; AMP'lerin yara iyileşmesinde aktivitesini göstererek tamamen saf selülozdan sentezlenen karboksimetil selüloz ile biyomedikal alanlarda yenilikçi bir yara örtüsü kullanımına olanak sağlayabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Antimicrobial peptites (AMPs) are positively charged biomolecules composed of short amino acid chains. They form a primary cell defense line against pathogens such as bacteria and yeast, and through this mechanism, they help prevent the development of resistance against traditional antibiotic pathogens. Therefore, they hold promise as a potential solution to the problem of antibiotic resistance. In this thesis study, the Myxinidin peptite was produced recombinantly with a green fluorescent protein (GFP) tag and incorporated into a bacterial cellulose (BC)-based hydrogel to develop a wound dressing. The hydrogels were characterized, and their antimicrobial effects, cytotoxicity, and wound healing properties were evaluated. The GFP-Myx sequence was cloned into the pET28(a) vector and expressed in the E. coli Rosetta (DE3) strain. The protein, purified by affinity chromatography, was confirmed via SDS-PAGE analysis. Carboxymethyl cellulose (CMC) was synthesized from bacterial cellulose, and then a physically cross-linked hydrogel was synthesized with polyvinyl alcohol (PVA). GFP-Myxinidin was directly loaded into the gel via physical cross-linking. The carboxymethyl cellulose obtained from bacterial cellulose was characterized by FTIR, SEM, TGA, and degree of substitution (DS) value calculations. Biocompatibility and wound healing potential were evaluated using MTT assay and scratch assay tests with L929 and HaCat cells. The synthesis of carboxymethyl cellulose was successful. Antimicrobial activity against E. coli and S. aureus strains was observed in the PVA/CMC/GFP-Myx hydrogel combination. No cytotoxicity was observed in the gel, and cell viability increased. The GFP tag provided traceability during the production of the peptite. The gel synthesized from bacterial cellulose demonstrated biocompatibility, and when combined with the GFP-Myx peptite, it enabled targeted delivery, enhancing the biological effect. These results demonstrate the activity of AMPs in wound healing and suggest that the use of carboxymethyl cellulose synthesized from pure cellulose could enable the development of an innovative wound dressing for biomedical applications.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    568393

    Identification of bacilysin producer cells during biofilm formation in Bacillus subtilis

    Bacillus subtilis'de olgunlaşmış biyofilm yapısında basilisin üreten hücrelerin belirlenmesi

    EZGİ KOMAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    Mikrobiyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    PROF. DR. AYTEN YAZGAN KARATAŞ

  2. Tez No

    747176

    Bazı laktik asit bakterilerinin antimikrobiyal peptit üretimlerinin araştırılması

    Investigation of antimicrobial peptide production of some lactic acid bacteria

    HAFSA NESİBE AKSOY ÖZBEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU

    DR. ÖĞR. ÜYESİ HARUN ÖNLÜ

  3. Tez No

    755186

    Antimikrobiyal peptit ve silikat katkılı fleksible biyomalzemenin antibakteriyel etkinliğinin incelenmesi

    Investigating the antibacterial activity of antimicrobial peptide and silicate integrated flexible biomaterial

    İHSAN ÇOŞKUN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Biyomühendislikİzmir Katip Çelebi Üniversitesi

    Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ DİDEM ŞEN KARAMAN

    DOÇ. DR. OZAN KARAMAN

  4. Tez No

    911970

    Hidroksiapatit bağlayıcı antimikrobiyal peptit içerikli bir self adeziv rezin simanın fiziksel ve mekanik özelliklerinin değerlendirilmesi

    Evaluation of physical and mechanical properties of a self adhesive resin cement containing hydroxyapatite binding antimicrobial peptide

    AYŞENUR TURAN

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    Diş HekimliğiErciyes Üniversitesi

    Restoratif Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HACER BALKAYA

  5. Tez No

    942081

    LL-37 antimikrobiyal peptit ile işlevselleştirilmiş PHB/kolajen elektroeğrilmiş yara örtüsünün geliştirilmesi

    Development of PHB/collagen electrospun wound dressing functionalized with LL-37 antimicrobial peptide

    BEYZA NUR SAYANER TAŞÇI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    MikrobiyolojiNecmettin Erbakan Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÖKHAN KARS

Geri Dön