Üçlü negatif meme kanseri tümör dokusu ve MDA-MB-231 hücre hattında melatonin ve resveratrolün P53 yolağı üzerindeki anti-kanserojen etkilerinin araştırılması
Investigation of the anti-carcinogenic effects of melatonin and resveratrol on the P53 pathway in triple-negative breast cancer tumor tissue and MDA-MB-231 cell line
- Tez No: 1022443
- Danışmanlar: PROF. DR. HAKAN GÜRKAN, DOÇ. DR. SELMA DEMİR
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Genetik, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Trakya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Üçlü negatif meme kanseri, agresif klinik seyri ve sınırlı tedavi seçenekleri nedeniyle kötü prognoz ile ilişkilendirilen bir meme kanseri alt tipidir. Üçlü negatif meme kanserinin moleküler mekanizmalarını ve potansiyel tedavi yaklaşımlarını araştırmak amacıyla yaygın olarak kullanılan hücre modellerinden biri MDA-MB-231 hücre hattıdır. Çalışmamızda, biyolojik ve potansiyel antikanserojen özellikleri nedeniyle dikkat çeken melatonin ve resveratrolün üçlü negatif meme kanseri üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Melatonin, sirkadiyen ritmin kontrolü ve hücre döngüsünün düzenlenmesinde önemli rol oynadığı bilinmektedir. Resveratrol ise antiproliferatif ve antioksidan özelliklerinin yanı sıra kanser hücrelerini apoptoza yönlendirebilen biyolojik etkileri ile dikkat çekmektedir. Çalışmamızın amacı, Trakya Üniversitesi Hastanesi Genetik Hastalıklar Tanı ve Değerlendirme Merkezi polikliniğine ve Tıbbi Onkoloji polikliniğine başvuran ve üçlü negatif meme kanseri tanısı alan bir hastadan elde edilen tümör doku örneği ile MDA-MB-231 hücre hattında, terapötik potansiyele sahip olduğu düşünülen melatoninin, resveratrolün ve kombine uygulanmasının P53 sinyal yolağı üzerindeki etkilerinin araştırılarak, iki hücre grubunun uygulanan dozlara gösterdiği yanıtları değerlendirmektir. Melatonin ve resveratrolün hücre canlılığı üzerindeki etkileri MTT yöntemi kullanılarak değerlendirilmiş, IC50 değerleri ise ATT Bioquest platformu aracılığıyla hesaplanmıştır. Apoptozun değerlendirilmesi amacıyla antiapoptotik genler olan BCL-2 ve BCL-2XL ile proapoptotik genler olan TP53, BAD, BID, Kaspaz-9 ve Kaspaz-3 genlerinin ifade düzeyleri gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) yöntemi ile analiz edilmiştir. Tümör doku hücreleri ve MDA-MB-231 hücre hattının hücre döngüsü evreleri ise akış sitometrisi yöntemi ile değerlendirilmiştir. MTT testine ait parametrelerin karşılaştırılmasında Tek Yönlü Varyans Analizi ve gruplar arası farkların belirlenmesinde ise Tukey çoklu karşılaştırma testi kullanılmıştır. Hücre döngüsü analizinde ise bağımsız gruplar t testi uygulanmıştır. Elde edilen tüm verilerde p < 0,05 değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edilmiştir. Çalışmamızın sonuçunda, MDA-MB-231 hücrelerinde doza ve zamana bağlı hücre ölümü gözlenmiş olup, 24 saatlik inkübasyon sonunda IC₅₀ değerleri melatonin için 5570 μM, resveratrol için 293,5 μM olarak belirlenmiştir. Ayrıca melatonin ve resveratrolün kombine uygulanmasının MDA-MB-231 hücrelerinde belirgin bir sitotoksik etki oluşturarak hücreleri %82,8 oranında apoptoza yönlendirdiği saptanmıştır. Gen ekspresyon analizleri sonucunda MDA-MB-231 hücre hattında BAD, BID ve Kaspaz-9 genlerinin ifade düzeyleri saptanmamıştır. Tümör doku örneğinde ise kontrol grubunun dışında tüm uygulamalarda BCL-2 geninin yüksek ifade düzeyi tespit edilmiştir. Hücre döngüsü analizinde ise MDA-MB-231 ve tümör dokusu hücreleri arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar saptanmıştır (p<0,05). Elde edilen sonuçlar, melatonin ve resveratrolün özellikle kombine kullanımının TNBC hücrelerinde potansiyel antikanserojen özellikler gösterebileceğini ortaya koymaktadır. Ancak melatoninin ve resveratrolün antikanser etkilerinin altında yatan moleküler mekanizmaların daha kapsamlı in vivo ve in vitro araştırmalarla değerlendirilmesine ihtiyaç bulunmaktadır.
Özet (Çeviri)
Triple-negative breast cancer is a subtype of breast cancer associated with a poor prognosis due to its aggressive clinical course and limited treatment options. One of the commonly used cell models to investigate therapeutic mechanisms and alternative treatment approaches for triple-negative breast cancer is the MDA-MB-231 cell line. Our study focuses on the effects of melatonin and resveratrol, which are noteworthy for their biological and potential anticancer properties, on triple-negative breast cancer. Melatonin is known to play a significant role in regulating circadian rhythms and supporting cellular maintenance. Resveratrol is notable for its antiproliferative and antioxidant properties, as well as for its biological effects that can induce apoptosis in cancer cells. The main objective of our study was to investigate the therapeutic potential of melatonin, resveratrol, and their combination on the MDA-MB-231 cell line in tumor samples obtained from a patient with triple-negative breast cancer who was admitted to the Medical Genetics and Medical Oncology departments of Trakya University Hospital. The study also investigated the interaction of these two cell lines via the P53 pathways and the emergence of two cell pathways. The effects of melatonin and resveratrol on cell viability were evaluated using the MTT method, and IC50 values were calculated using the ATT Bioquest platform. To investigate apoptosis, the anti-apoptotic genes BCL-2 and BCL-2XL, and the pro-apoptotic genes TP53, BAD, BID, Caspase-9, and Caspase-3 were analyzed using real-time polymerase chain methods (RT-PCR). Tumor tissue parameters and the stages of cell cycle of the MDA-MB-231 cell line were evaluated using flow cytometry. For the MTT test, one-way analysis of variance was used to compare genders, and Tukey's multiple comparison test was used to determine differences between groups. For cell cycle analysis, the Independent Groups t-Test was conducted. For all data obtained, a p-value < 0.05 was considered statistically significant. The study results showed dose/time-dependent cell death in the MDA-MB-231 cell line, with IC₅₀ values of 5570 μM for melatonin and 293.5 μM for resveratrol after 24 hours of incubation. Furthermore, the combination of melatonin and resveratrol with MDA-MB-231 demonstrated a significant cytotoxic effect, leading to apoptosis in 82.8% of cells. Gene expression analysis revealed significant expression of BAD, BID, and Caspase-9 genes in the MDA-MB-231 cell line. In the tumor tissue sample, high expression levels of the BCL-2 gene were detected in all treatments except the control group. Cell cycle analysis results showed varying and significant differences between MDA-MB-231 and tumor tissue (p<0.05). These findings suggest that melatonin and resveratrol may exhibit potential anticancer properties, particularly in combined triple-negative breast cancers. However, more comprehensive in vivo and in vitro studies are needed to investigate the molecular mechanisms underlying the anticancer effects of melatonin and resveratrol.
Benzer Tezler
- Targeting circulating breast cancer stem cells via mTOR and WNT inhibitors after bone metastasis
Sirküle meme kanseri kök hücrelerinin kemik metastazı sonrası mTOR ve WNT inhibitörleri ile hedeflenmesi̇
ÖZLEM ALTUNDAĞ ERDOĞAN
Doktora
İngilizce
2025
BiyokimyaHacettepe ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BETÜL ÇELEBİ SALTIK
- Studying the role of an anti-apoptotic Bag-1 protein in healthy & tumor tissues in patients with breast carcinoma
Meme kanserli hastalardan alınan sağlıklı ve tümörlü dokularda anti-apoptotik Bag-1 proteinin rolünün çalışılması
EMİNE ARZU BAŞKALE
Yüksek Lisans
İngilizce
2016
Moleküler Tıpİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
- Targeting and activation of antigen specific CD8+ T cells with peptide-major histocompatibility complex I tetramers
Peptit-majör histokompatibilite kompleks I tetramerleri ile antijen spesifik CD8+ T hücrelerin hedeflenmesi ve aktivasyonu
ŞAFAK CEREN USLU ŞIVGIN
Doktora
İngilizce
2025
BiyoteknolojiHacettepe ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HANDE CANPINAR
- Kesitsel çalışma: Üçlü negatif meme kanserinde androjen reseptörünün prevelansı ve prognostik önemi
Başlık çevirisi yok
ELİF SILA YELİM
- Üçlü negatif sporadik meme kanserinde eksozomal uzun kodlanmayan rna'ların biyobelirteç olarak araştırılması
Investigation of exosomal long non-coding rnas as biomarkers in triple negative sporadic breast cancer
HAZAL SEZGİNER GÜLER
Doktora
Türkçe
2025
GenetikTrakya ÜniversitesiBiyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAKAN GÜRKAN
DOÇ. DR. SİNEM YALÇINTEPE