Fabry hastalığı oluşturulmuş insan podosit hücrelerinde PLAUR gen ekspresyonunun hücresel etkileri
Cellular effects of PLAUR gene expression in human podocytes with induced Fabry disease
- Tez No: 1024164
- Danışmanlar: PROF. DR. KÜLTİGİN TÜRKMEN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: İç Hastalıkları, Nefroloji, Internal diseases, Nephrology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Necmettin Erbakan Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: İç Hastalıkları Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Son yıllarda yeni keşfedilen PLAUR geninin ürünü olan upar reseptörün podositlerde podosit ıntegrını olan αvβ3 ile etkileşerek aktin bağlanmasını aktive etmesıyle podosit kasılması ve podositüri gelişmesinde patofizyolojik olarak önemli rol oynadığı gösterilmiştir Fabry hastalığındaki podosit hasarında birçok etken bulunmaktadır. Ancak plaur genının rolü net olarak aydınlatılamamıştır dolayısıyla bu çalışmada birinci amacımız fabry hastalığı oluşturulmuş podosit hücrelerinde plaur geninin hücresel etkilerini araştırmaktır, ikinci amacımız ise tedavide yaygın olarak kullanılan selektif ve non-steroidal bir mineralokortikoid reseptör antagonisti (MRA) olan finerenonun tedavideki rolü ve hücre içi yolaklara etkilerini araştırmaktır. Gereç ve Yöntem: Bu tez çalışması için Necmettin Erbakan Üniversiyesi İlaç ve Tıbbi Cihaz Dışı Araştırmalar Etik Kurulu'nun 25/7/2025 tarih ve 2025/ 5933 nolu onayı alınmıştır. Bu tez çalışmasında; in vitro Fabry modelinin oluşturulması ve GLA gen susturma yaklaşımı daha önce Türkmen ve ark. (2025) tarafından detaylı açıklanmıştır. Önceki çalışmada GLA ekspresyonunun baskılanmasına yönelik kullanılan susturma modeli tanımlanmış ve etkinliği gösterilmiştir. Kısaca; insan podosit hücre hattında alfa-galaktozidaz A genini susturmak amacıyla shRNA yaklaşımı ile iki farklı viral klonu (V2LHS_82973 ve V2LHS_82975) transdüksiyonu ve puromisin seleksiyonu gerçekleştirilmiştir. Bulgular: Turkmen ve arkadaşları (2025) tarafından daha önce tanımlanmış GLA gen susturma yaklaşımı temel alınarak oluşturulan Fabry hücre modeli kullanılarak, bu tez kapsamında PLAUR/uPA sistemi ve ilişkili genlerin ekspresyon düzeyleri değerlendirilmiştir. Finerenon uygulamasında, önceki çalışmada belirlenen 10 nM konsantrasyon esas alınmış ve finerenonun Fabry hücre modelinde PLAUR/uPA ekseni üzerindeki etkisi incelenmiştir. Bu kapsamda PLAUR, uPA, NOTCH1 ve ITGB3 gen ifadeleri mRNA düzeyinde qRT-PZR yöntemiyle; PLAUR ve uPA protein düzeyleri ise ELISA yöntemiyle analiz edilmiştir. Elde edilen sonuçlar kontrol, Fabry modeli ve finerenon uygulanmış Fabry modeli grupları arasında karşılaştırmalı olarak değerlendirilmiştir. Sonuç: Fabry hastalığında PLAUR/uPA sisteminin aktive olduğunu ve podosit hasarında önemli rol oynayabileceğini göstermektedir. Ayrıca finerenonun bu yolaklar üzerinde baskılayıcı etki göstermesi, Fabry nefropatisinde gelecekte kullanılabilecek yeni tedavi stratejileri açısından umut verici görünmektedir. Elde edilen bulgular, PLAUR/uPA-NOTCH1 ekseninin Fabry nefropatisinde hem biyobelirteç hem de potansiyel terapötik hedef olarak değerlendirilmesi gerektiğini ortaya koymaktadır.
Özet (Çeviri)
Objective: In recent years, the urokinase plasminogen activator receptor (uPAR), encoded by the PLAUR gene, has been shown to play a crucial role in the pathophysiology of podocyte injury by interacting with the αvβ3 integrin on podocytes, thereby promoting actin cytoskeleton rearrangement, podocyte contraction, and podocyturia. Although multiple mechanisms contribute to podocyte damage in Fabry disease, the specific role of the PLAUR gene has not yet been fully elucidated. Therefore, the primary aim of this study was to investigate the cellular effects of the PLAUR gene in podocyte cells with experimentally induced Fabry disease. The secondary aim was to evaluate the therapeutic effects of finerenone, a selective non-steroidal mineralocorticoid receptor antagonist (MRA) widely used in clinical practice, and its impact on intracellular signaling pathways. Materials and Methods: This study was approved by the Ethics Committee for Non-Pharmaceutical and Non-Medical Device Research of Necmettin Erbakan University (approval number: 2025 / 5933; date: 25/7/2025). The establishment of the in vitro Fabry disease model and the GLA gene silencing approach were previously described in detail by Türkmen et al. (2025). Briefly, alpha-galactosidase A (GLA) gene expression was suppressed in a human podocyte cell line using an shRNA-mediated gene silencing strategy. Two different viral clones (V2LHS_82973 and V2LHS_82975) were transduced into the cells, followed by puromycin selection. Results: Using the Fabry cell model established based on the GLA gene silencing approach previously described by Türkmen et al. (2025), the expression levels of the PLAUR/uPA system and related genes were evaluated. Finerenone was applied at a concentration of 10 nM, as determined in the previous study, and its effects on the PLAUR/uPA axis were investigated. The mRNA expression levels of PLAUR, uPA, NOTCH1 and ITGB3 were analyzed by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), while PLAUR and uPA protein levels were measured using ELISA. The results were comparatively evaluated among the control group, the Fabry model group, and the finerenone-treated Fabry model group. The findings demonstrated activation of the PLAUR/uPA system and associated signaling pathways in the Fabry model, whereas finerenone treatment significantly attenuated this activation. Conclusion: The findings of this study suggest that the PLAUR/uPA system is activated in Fabry disease and may play an important role in podocyte injury. Furthermore, the inhibitory effects of finerenone on these pathways indicate its potential as a novel therapeutic strategy for Fabry nephropathy. These results highlight the PLAUR/uPA–NOTCH1 axis as a promising biomarker and potential therapeutic target in the pathogenesis of Fabry nephropathy.
Benzer Tezler
- İn vitro fabry hastalığı modelinde ferulik asitinolası etkilerinin araştırılması
İnvestigation of possible effects of ferulic acid an in vitro fabry disease model
LEYLA ASADOVA
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyolojiNecmettin Erbakan ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERCAN KURAR
- Fabry hastalığı'nda semptom taraması ile tanı algoritması oluşturulması
Making a diagnostic algorithm of fabry disease with symptoms
OSMAN DURSUN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıKırıkkale ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SELDA FATMA BÜLBÜL
- İdiopatik sensörinöral işitme kaybı olan kişilerde fabry hastalığı taranması ve hastalık saptanan kişilerde diğer klinik bulguların değerlendirilmesi
Screening of fabry disease in patients with idiopathic sensorineural hearing loss and screening of other clinical findings in individuals which fabry disease detected
EKİN YİĞİT KÖROĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıAnkara Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÖZGÜR DEMİR
- Tekrarlayan ateşsiz karın ağrısı şikâyeti ile çocuk acile başvuran hastalarda fabry hastalığı sıklığı
The frequency of fabry's disease in patients applying to the children's emergency polyclinic with complaint of recurren stomach-ACHE pain without fever
ABDULLAH MESUD İNCE
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıOndokuz Mayıs ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. IŞIL ÖZER
- Açıklanamayan sol ventrikül hipertrofisinin (SVH) fabry hastalığı taramasında kullanılabilirliği
Başlık çevirisi yok
MURAT ESİN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
GenetikSağlık Bilimleri ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERKAN KÖKLÜ