Buffy-Coat süspansiyonundan izole edilen ekstraselüler veziküllerin nötrofil fonksiyonları üzerine etkileri
The effects of the extracellular vesicles isolated from Buffy-Coat suspension on neutrophil functions
- Tez No: 1025003
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SALİH HALDUN BAL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
- Anahtar Kelimeler: Febril nötropeni, Febrile neutropenia
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Bursa Uludağ Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İmmünoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: İmmünoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Doğal immün sistemin ilk savunma hattını oluşturan nötrofillerin periferik kanda 500 hücre/mm3 altına düşmesiyle karakterize ateşle birlikte seyreden durum febril nötropeni olarak adlandırılmaktadır. Onkoloji ve hematoloji kliniğinde dirençli febril nötropeni tabloları gözlenmesi halinde hastalara son çare olarak Buffy-Coat (BFC) transfüzyonu yapılabilmektedir. Bu çalışmada BFC süspansiyonunun içeriğindeki eksozom ve mikropartiküllerin, nötrofillerin ROS üretimi, oksidatif patlama, degranülasyon ve NETosis fonksiyonları üzerindeki etkileri değerlendirilmiştir. Bu değerlendirme BFC transfüzyonu öncesi yapılan gama ışınlaması ve artan eksozom/mikropartikül dozlarının etkisi çerçevesinde gerçekleştirilmiştir. Deneysel kurguda nötrofiller sağlıklı gönüllülerin kanından izole edilmiş ve artan dozlarda ışınlanmış/ışınlanmamış eksozom ve mikropartiküllerle kültürlenmiştir. Nötrofillerin oksidatif patlama fonksiyonundaki değişimleri gözlemlemek adına NBT testinden, ROS üretimi ve degranülasyon (CD63, CD66b ve CD62L) fonksiyonlarındaki değişimleri gözlemlemek adına akan hücre ölçer analizlerinden, NETosis fonksiyonundaki değişimleri gözlemlemek adına ELISA ve floresan mikroskopisinden yararlanılmıştır. Analizler sonucunda BFC kaynaklı eksozomların, artan dozlarda nötrofiller üzerinde hafif bir uyarıma yol açsalar da genel olarak bazal sınıra yakın fonksiyon gösterdikleri saptanmıştır. Buna karşın mikropartiküllerin doza bağımlı olarak nötrofillerde agresif bir aktivasyon fenotipi (CD66b ekspresyonundaki artış ve CD62L dökülmesi) gösterdiği saptanmıştır. Artan mikropartikül dozlarında serbest Nötrofil Elastaz konsantrasyonunun 3000 ng/mL seviyesine ulaşmasıyla birlikte ROS üretiminin azalmasının bir inhibisyon değil de nötrofillerin akut aktivasyonunun ardından gelen NETosis'in sonucu olduğu düşünülmektedir. Doz etkilerinden arındırılmış gama ışınlama işleminin analizlerinde ışınlama işleminin nötrofil fonksiyonları üzerinde etkisi bulunmadığı saptanmıştır. Bu tez çalışması sonucunda BFC kaynaklı eksozomların nötrofiller üzerinde hafif bir priming etkisine sahip olduğu ancak mikropartiküllerin nötrofilleri aktifleştirerek NETosis'e sürüklediği gözlenmektedir.
Özet (Çeviri)
A condition characterized by fever and a drop in the peripheral blood neutrophil count—which forms the first line of defense of the innate immune system—to below 500 cells/mm³ is referred to as febrile neutropenia. In oncology and hematology clinics, when cases of refractory febrile neutropenia are observed, patients may receive a Buffy-Coat (BFC) transfusion as a last resort. In this study, the effects of exosomes and microparticles in the BFC suspension on neutrophil ROS production, oxidative burst, degranulation, and NETosis were evaluated. This evaluation was conducted within the context of the effects of gamma irradiation performed prior to BFC transfusion and increasing doses of exosomes and microparticles. In the experimental setup, neutrophils were isolated from the blood of healthy volunteers and cultured with exosomes and microparticles—both irradiated and non-irradiated—at increasing doses. The NBT assay was used to observe changes in the oxidative burst function of neutrophils; flow cytometry analyses were used to observe changes in ROS production and degranulation (CD63, CD66b, and CD62L); and ELISA and fluorescence microscopy were used to observe changes in NETosis function. The analyses revealed that, although BFC-derived exosomes caused a mild stimulation of neutrophils at increasing doses, they generally exhibited function close to the basal level. In contrast, it was found that microparticles induced a dose-dependent aggressive activation phenotype in neutrophils (increased CD66b expression and CD62L shedding). It is believed that the decrease in ROS production as free neutrophil elastase concentrations reach 3,000 ng/mL at increasing microparticle doses is not due to inhibition but rather is the result of NETosis following acute neutrophil activation. In analyses of the gamma irradiation process, adjusted for dose effects, it was determined that the irradiation process had no effect on neutrophil functions. The results of this thesis study indicate that BFC-derived exosomes have a mild priming effect on neutrophils, but that microparticles activate neutrophils and induce NETosis.
Benzer Tezler
- Köpeklerde konsantre eritrosit transfüzyonunun oluşturduğu immunolojik değişimlerin araştırılması
A research on the immunmodulating effects of packed red blood suspension transfusion in dogs
GÜLDAL İNAL GÜLTEKİN
- Çeşitli tam seramik sistemlerde; yüzey pürüzlülüğünün ve polisaj metotlarının bakteri adezyonuna etkisinin incelenmesi
The evaluation of effect of surface roughness and polishing methods in different all ceramic systems on bacterial adhesion
NESLİHAN ÇÖKÜK
Doktora
Türkçe
2007
Diş HekimliğiSelçuk ÜniversitesiProtetik Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı
PROF.DR. FİLİZ AYKENT
- Bakteriyemi ve fungemi tanısında novel buffy coat yönteminin kullanılması
Using novel buffy coat method in the diagnosis of bacteremia and fungemia
MELİKE ORKİDE TAŞCILAR ÖNDER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
Mikrobiyolojiİstanbul Medeniyet ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MÜCAHİDE ESRA KOÇOĞLU
- İmmunolojik reaksiyonlarda lenfositlerdeki değişiklikleri ölçen yeni bir testin viral hepatitlerde uygulanışı ve önemi
Başlık çevirisi yok
HÜSEYİN ALTINOK
- Yenidoğan sepsisinin erken tanısında önemli yeri olan laboratuvar yöntemlerinin değerlendirilmesi
Başlık çevirisi yok
CENGİZ SANDIKLI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1989
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıAnadolu ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı