Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enziminin maydanoz (petroselinum hortense mill.) ve lahana (brassica oleracea L.) bitkilerinden saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı pestisitler ile antibiyotiklerin enzim üzerindeki etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of glucose 6-phosphate dehydrogenase from parsley (petroselinum hortense mill) and cabbage (brasicca oleracea L.) and investigation of the effects of some pesticides and antibiotics on these enzymes
- Tez No: 105326
- Danışmanlar: PROF. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2001
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 101
Özet
ÖZET Pentoz fosfat metabolik yolunun anahtar enzimi olan glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enzimi (D-glukoz 6-fosfat: NADP+ oksidoredüktaz, EC 1.1.1.49), maydanoz (Petroselinum hortense Mili) ve lahanadan (Brasicca olerace L) saflaştırıldı. Maydanoz (Petroselinum hortense Mili) enzimi, amonyum sülfat çöktürmesini takiben iyon değişim kromotografisi ile % 8,7 verimle, 2,146 EU/mg protein spesifik aktiviteye sahip olarak 58 kat saflaştırıldı. Enzimin molekül ağırlığı jel fıltrasyon kromatografısi ile 77,6 kdal, SDS- poliakrilamid jel elektroforezi ile 79,3 kdal olarak bulundu. Lahana (Brasicca olerace L) glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enzimi, amonyum sülfat çöktürmesi yöntemiyle % 35,1 verimle, 0,903 EU/mg protein'lik bir spesifik aktiviteye sahip olarak 1,3 kat saflaştırıldı. Enzimin molekül ağırlığı jel fıltrasyon kromotografisi yöntemi ile 49,3 kdal bulundu. Her iki kaynaktan saflaştırüan enzimin optimum pH'sı 8,0 olarak gözlendi. Beutler'in spektrofotometrik metoduna göre yapılan kinetik analizler sonucu, maydanoz ve lahana G6PD enzimlerinin KM değerleri sırasıyla, NADP + için 0,000162 M, 0,00028 M, glukoz 6-fosfat için 0,251 M, 1,196 M, Vmax değerleri sırasıyla NADP + için 0,541 EÜ/ml, 0,191 EÜ/ml; glukoz 6-fosfat için 0,082 EÜ/ml ve 0,133 EÜ/ml olarak bulundu. Ayrıca, bazı zirai pestisitler ve iki antibiyotiğin her iki maydanoz ve lahana enzimleri üzerindeki in vitro etkileri araştırıldı. % Aktivite-[Pestisit] ve % Aktivite- [Antibiyotik] grafikleri çizildi.
Özet (Çeviri)
11 SUMMARY Glucose 6-phosphate dehydrogenase (D-glucose 6-phophate: NADP+ oxidoreductase, EC 1.1.1.49), the key enzyme enzyme of pentose phosphate pathway, was purified from parsley {Petroselinum hortense Mill) and cabbage(i?r asicca oleracea L). 58 fold purification of the parsley enzyme was achieved by ion-exchange chromatography following ammonium sulphate precipitation with 8.7 % yield a specific activity of 2.146 EU/mg protein. The molecular weight of the enzyme was found to be 77.6 kdal by gel filtration chromatography, 79.3 kdal by SDS polyacrylamide gel electrophoresis. Cabbage glucose 6-phosphate dehydrogenase^ 6-PD) was partially, 1.3 fold, purified by ammonium sulphate precipitation method with 35.1 % yield and a specific activity of 0,903 EU/ mg protein. The molecular weight of the enzyme was found as 49.3 kdal by gel filtration chromatography. Optimum pH of the enzyme from both sources was observed as 8.0. Kinetic analyses, which were performed according to Beutler's spectrophotometric method, showed Km values of parsley and cabbage G 6-PDs for NADP+, 1.62xl0“4 M and 2.8xl0”4 M; and for glucose 6-P, 2.51x1ü"1 M and 1,196 M; and Vmax for NADP+, 0.541 EU/ml and 0.191 EU/ml, and for glucose 6-P, 0.082 and 0.133 EU/ml, respectively. Besides these, in vitro effects of some agricultural pesticides and two antibiotics on this parsley and cabbage enzyme were also investigated and % activity graphs were plotted.
Benzer Tezler
- Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enziminin çipura karaciğer ve solungaç dokularından saflaştırılması ve enzim aktivitesi üzerine bazı metallerin etkilerinin incelenmesi
Purification of Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase from gilt head bream (Sparus aurata) liver and gill tissues and investigate of some metal effects on enzyme activity
MAHİNUR ÇAM
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyokimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. METİN BÜLBÜL
DOÇ. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR
- Purification and characterizatin of glucose 6-phosphate dehydrogenase from japanese quail erythrocytes
Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enziminin japon bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) eritrositlerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
IBRAHIM HAMDI SHAFEEQ SHAFEEQ
- Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz enziminin immobilizasyonu için manyetik nanopartiküllerin hazırlanması, karakterizasyonu ve optimizasyonu
Preparation, characterization and optimization of magnetic nanoparticles for immobilization of glucose-6-phosphate dehydrogenase enzyme
SELMİHAN ŞAHİN
- Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz enziminin insan plasentasından saflaştırılması ve bazı özelliklerinin tanımlanması
Başlık çevirisi yok
YASEMİN AKSOY
- Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz enziminin köpek karaciğerinden saflaştırılması ve bazı özelliklerinin tanımlanması
Başlık çevirisi yok
CUMHUR BİLGİ