Geri Dön

Hepatit B yüzey antijenini taklit eden anti-idiyotipik monoklonal antikorların üretilmesi ve bağışıklama yeteneklerinin in-vivo sistemde incelenmesi

Production of anti-idiotypic monoclonal antibodies that mimic the hepatitis B surface antigen and investigation of their immunogenic capability in vivo

  1. Tez No: 132341
  2. Yazar: MERAY AKKOR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. BEYAZIT ÇARIKOĞLU, DR. FATIMA YÜCEL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2003
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 91

Özet

1. ÖZET Hepatit B virüsü (HBV) akut ve kronik hepatit, karaciğer sirozu ve hepatoselüler karsinoma gibi hastalıkların en önemli etkenidir. HBV ile bir kez enfekte olan kişi için günümüzde etkin bir tedavi söz konusu değildir. HBV enfeksiyonuna karşı, toplum sağlığının korunmasında en etkin yöntem aşılamadır. Mevcut Hepatit B aşılan, bağışık cevabın tam oluşması için 3 doz uygulanmasına rağmen yetişkinlerin yaklaşık %5'inde bağışık cevap oluşturamamaktadır. Bu sebeplerle geliştirilmeye başlanan yeni aşı yaklaşımlarından biri etken antijenini taklit ederek onun bir kopyası gibi davranan anti- idiyotipik antikorlardır. Tez çalışmasında, Hepatit B virüsü yüzey antijenine (HBsAg) karşı geliştirilen anti-HBsAg (aHBsAg) monoklonal antikorları kullanarak hibridoma teknolojisi ile anti- idiyotipik aHBsAg (aid-aHBsAg) monoklonal antikorlarının üretilmesi ve bu aid- aHBsAg monoklonal antikorlarının HBsAg'ye karşı antikor yanıtı (aHBsAg) oluşturma yeteneklerinin in-vivo sistemde gösterilmesi amaçlandı. Bunun için TÜBİTAK- GMBAE Hibridoma Laboratuarında HBsAg'ye karşı geliştirilmiş MAM-A1, 2B7, 9D12 monoklonal antikorları (aHBsAg) kullanılarak fareler bağışıklandı. Bağışıklama sonucu en yüksek bağışık cevabı gösteren fareler sırasıyla fuzyona alındı. Füzyon sonrası, IgG2b izotipinde 1F1 1; IgG3 izotipinde 1 1E2; IgM izotipinde ise 4F1 1 ve 5B1 1 aid-aHBsAg monoklonal antikorları elde edildi. IgG tipi antikorlar Protein-G immün- afinite, IgM tipi antikorlar ise S-300 jel filtrasyon kolon kromatografisi ile saflaştırılarak farelere çeşitli dozlarda enjekte edildi. Farelere enjeksiyon sonrası, 1 1E2 ve 4F11 aid-aHBsAg monoklonal antikorlarının ticari aşıya benzer aHBsAg cevabı oluşturduğu gözlendi. Elde edilen verilere göre aid-aHBsAg monoklonal antikorlarının, aHBsAg antikor cevabı oluşturmada etkili olabileceği ve tanımlanan yöntemlerin alternatif aşı üretiminde kullanılabileceği sonucuna varıldı.

Özet (Çeviri)

2. SUMMARY Production of Anti-idiotypic Monoclonal Antibodies that Mimic the Hepatitis B Surface Antigen and Investigation of their Immunogenic Capability in-vivo Hepatitis B virus (HBV) is the major cause of acute and chronic hepatitis, liver cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. Today, there is no effective treatment for people infected by HBV. The most potent method to protecting society against HBV infection is vaccination. Although as much as 3 dose applications of the current hepatitis B vaccine are performed to obtain the whole immune response, about %5 of adults are non-responders. Therefore, one of the new approaches for developing vaccines is utilizing anti-idiotypic antibodies, which mimic the antigen and act like its copy. In this study, we aimed to develop anti-idiotypic anti-HBV surface antigen (aid- aHBsAg) monoclonal antibodies by employing anti-HBsAg (aHBsAg) monoclonal antibodies which had previously been produced against HBV surface antigen (HBsAg) by means of hybridoma technology and to demonstrate the capability of these aid- aHBsAg monoclonal antibodies for developing an immune response against HBsAg in-vivo. To that end, MAM-A1, 2B7 and 9D12 monoclonal antibodies that had been produced against HBsAg in TÜBİTAK-GMBAE Hybridoma Laboratory were used for immunizing mice. The most stimulated mice were selected for the fusion according to the strength of their response. Following the fusion, four aid-aHBsAg monoclonal antibodies which, namely 1F11 of IgG2b isotype, 11E2 of IgG3 isotype, and 4F11 and 5B11 of IgM isotype, were produced. Antibodies of IgG isotype were purified by Protein-G immuno-affinity while antibodies of IgM isotype were purified by S-300 gel filtration column chromatography. Subsequently, different doses of these antibodies were injected into mice. Postinjection, it was demonstrated that 11E2 and 4F11 aid- aHBsAg monoclonal antibodies induced an aHBsAg response in mice similar to that of commercial vaccine. These results show that aid-aHBsAg monoclonal antibodies could be effective in inducing specific antibody response against HBsAg and techniques that were explained could be used as an alternative way of vaccine production.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    158365

    Hepatit B antijenini kodlayan plazmit DNA içeren mikroküre şeklindeki aşı formülasyonunun geliştirilmesi

    Development of vaccine as a microsphere is containing plasmid DNA coding hepatitis B surface antigen

    AYDAN ERATALAY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe Üniversitesi

    Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FİLİZ ÖNER

  2. Tez No

    132349

    Faj gösterim teknolojisi yardımıyla hepatit B yüzey antijenine karşı peptit yapıların bulunması ve DNA analizi ile karakterizasyonları

    Identification of phage displayed peptides with binding ability to hepatitis B surface antigen and their characterisation by DNA sequence analysis

    BERTAN KORAY BALCIOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    Tıbbi BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BEYAZIT ÇIRAKOĞLU

    DR. BERRİN ERDAĞ

  3. Tez No

    310341

    Hepatit B aşısı geliştirme ve hepatit B aşılarının etkinliğini artırmaya yönelik yaklaşımlar

    Approaches for the development of HBV vaccine and improvement the effectiveness of HBV vaccine

    İBRAHİM HATİPOĞLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyolojiAnadolu Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYNUR BAŞALP

    PROF. DR. HÜLYA SİVAS

  4. Tez No

    60697

    Kronik Hepatit B'li hastaların karaciğerinde viral antijenlerinin immunohistokimyasal yöntemle gösterilmesinin tanısal değeri

    The Diagnostic value of immunohistochemical detection of hepatic virus antigens in liver of patients with chronic hepatitis B

    GÜNAY TUNCER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon HastalıklarıAnkara Üniversitesi

    Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İSMAİL BALIK

  5. Tez No

    255339

    High-level expression of hepatitis B surface antigen in Pichia pastoris, its purification and immunological characterization

    Hepatit B yüzey antijeninin Pichia pastoris'de yüksek miktarda expresyonu, saflaştırılması ve immunolojik karakterizasyonu

    HANDE SELAMOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ

    PROF. DR. H. AVNİ ÖKTEM

Geri Dön