Doğal ortamlardan izole edilen Bacillus thuringiensis'lerin karakterizasyonu ve insektisidal özelliklerinin belirlenmesi
Caharacterization and determination of insecticidal features of Bacillus thuringiensis isolated from natural environment
- Tez No: 139216
- Danışmanlar: PROF. DR. ZİHNİ DEMİRBAĞ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Bacillus thuringiensis, Kristal Proteinleri, cry Genleri, Biyolojik Kontrol, Bacillus thuringiensis, Crystal Proteins, cry Genes, Biological Control
- Yıl: 2003
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 86
Özet
Bu araştırmada, 3 tanesi böceklerden [(BnBt (Balaninus nucum, ergin), Mm2 (Meloloniha melolontha, ergin) ve MnÖ (Malacosoma neustria, larva)] 6 tanesi ise topraktan [(6 numaralı izolat Çağlayan' dan, 1 1 numaralı izolat Yeşilova'dan, 27 numaralı izolat Akçaabat' dan, 29 ve 40 numaralı izolatlar Tonya' dan ve 46 numaralı izolat Çaykara'dan)] izole edilen 9 B. thuringiensis izolatının fenotipik, moleküler ve kemotaksonomik olarak karakterizasyonu yapıldı. Işık ve tarama elektron mikroskobu sonuçlarına göre altı izolatta (BnBt, MnÖ, 27, 29, 40, 46) bipiramidal, bir izolatta (6 numaralı) küresel, bir izolatta (Mm2) düz kare ve bir izolatta (1 1) da şekilsiz kristaller olduğu tespit edildi. ISR-PCR sonuçlarına göre izolatlarm kontrol B. thuringiensis izolatlan ile benzer bantlar oluşturduğu görüldü. PCR analizleri sonucunda BnBt, MnÖ, 1 1 ve 29 numaralı izolatlarda cryl ve cry2 genleri, Mm2 izolatmda cry3 ve 6 numaralı izolatta ise cry4 genleri bulundu. SDS-PAGE analizlerinde, izolatlarda yaklaşık 65-130 kDa'lık proteinler belirlendi. Çözünmüş kristallerin tripsin ile parçalanmalarından sonra, SDS-PAGE analizlerinde 50-65 kDa arasında tripsine dirençli peptidler oluşturduğu görüldü. İzolatlarm plazmit içerikleri, kontrol Bacillus thuringiensis suşlan ile karşılaştınldığında 1 1 numaralı izolat hariç diğerlerinde 4-8 arası plazmit olduğu tespit edildi. BnBt ve MnÖ izolatlannm Malacosoma neustria ve Lymantria dispar larvalarına ve Mm2 izolatının Leptinotarsa decemlineata ve Agelastica alni larvalarına karşı insektisidal aktivite gösterdikleri diğer izolatlarm ise insektisidal aktivite göstermediği tespit edildi. Sonuç olarak, BnBt ve MnÖ izolatlannm Bacillus thuringiensis subsp. kurstakVye, Mm2 izolatının Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis'e ve 6 numaralı izolatın Bacillus thuringiensis subsp. israelensis'e benzedikleri tespit edildi. Diğer izolatlarm ise yeni B. thuringiensis izolatlan olduğu düşünülmektedir.
Özet (Çeviri)
Characterization and Determination of Insecticidal Features of Bacillus thuringiensis Isolated from Natural Environment In the present study, 3 isolates [(BnBt (Balaninus nucum, adult), Mm2 (Melolonta melolanta, adult) and MnO {Malacosoma neustria, larvae)] obtained from insects and 6 isolates [(isolate 6 from Çağlayan, isolate 11 from Yeşilova, isolate 27 from Akçaabat, isolates 29 and 40 from Tonya and isolate 46 from Çaykara)] obtained from soil samples were characterized based on their phenotypic, molecular and chemotaxonomical features. According to light and scaning electron microscopy results, six isolates (BnBt, MnÖ, 27, 29, 40 and 46) have bipyramidal, one isolate (6) has spherical, one isolate (Mm2) has flat square, and one isolate (11) has irregular shape crystal. Based on the ISR- PCR results, B. thuringiensis isolates formed identical bands with the control B. thuringiensis isolates. PCR analyses have shown that BnBt, MnO, 1 1 and 29 have cryl and cry2 genes. On the other hand, Mm2 and 6 contain cry3 and cry4 genes, respectively. SDS- PAGE analyses have shown that isolates contain protein components with molecular masses ranging from 65-130 kDa. After trypsin digestion of solubilized crystals, SDS- PAGE resolved trypsin-resistant peptides ranged between 50 and 65 kDa. The plasmid DNA contents of the isolates were compared with control B. thuringiensis strains. Based on these results 4-8 plasmids were detected at all isolates pxpect 11. Toxicity tests have shown that BnBt and MnO have insecticidal effect against Malacosoma neustria and Lymantria dispar, isolate Mm2 has been found to be toxic to Leptinotarsa decemlineata mdAgelastica alni. However, no insecticidal activity has been found in the other isolates. In conclusion, isolates BnBt and MnO are similar to Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki, isolates Mm2 and 6 are identical to Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis and Bacillus thuringiensis subsp. israelensis, respectively. The other isolates are thought to be new B. thuringiensis isolates.
Benzer Tezler
- Isolation and characterization of Bacillus thuringiensis strains from different grain habitats
Farklı tahıl ortamlarından Bacillus thuringiensis izolasyonu ve karakterizasyonu
ÖZGÜR APAYDIN
Yüksek Lisans
İngilizce
2004
Biyomühendislikİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. HATİCE GÜNEŞ
- Doğal ortamlardan izole edilen alkalifilik toprak bakterilerinde plazmid kodlu Na-tellurit dirençliliği ve transformasyon olanaklarının araştırılması
Research of possibility the transformation and resistance Na-tellurite originated plasmide at the soil bacteria isolated from natural environment
HURREM TURAN AKKOYUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2007
BiyolojiYüzüncü Yıl ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. NURSEL DOSTBİL
- Yöresel peynirlerden laktik asit bakterilerinin izolasyonu, tanısı ve bazı gıda patojenleri üzerindeki antimikrobiyal etkilerinin araştırılması
The isolation and diagnosis of lactic acid bacteria from regional cheese and the investigation of antimicrobial effects on some food pathogens
CENGİZ TABAKOĞLU
- Doğal maya suşlarının mevcut fermantasyon yeteneklerinin mutasyonla geliştirilmesi ve bacillus sp. amilaz geninin maya hücrelerine transferi
Improvement of fermantation abilities presents in wild type yeast strains by mutation and transfer of amylase gene from bacillus sp. to yeast cells
MUTLU NİSA ÜNALDI
- Toprak örneklerinden izole edilen bacillus SP. metabolitlerinin antibakteriyel, antibiyofilm ve anti-quorum sensing aktivitelerinin araştırılması
Investigation on the antibacterial, antibiofilm, and anti-quorum sensing activities of the metabolites of bacillus SP. isolated from soil samples
GAMZE BENLİ YARDIMCI
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
MikrobiyolojiAnkara ÜniversitesiFarmasötik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MÜJDE ERYILMAZ