Trombositlere fibrinojen ve GpIIb/IIIa antikorlarının bağlanmasında düşük dansiteli lipoprotein (LDL), okside olmuş düşük dansiteli lipoprotein ve yüksek dansiteli lipoprotein (HDL)'lerin etkilerinin flovsitometrik yöntemle incelenmesi
Flowcytometric analysis evaluation of the effects of low density lipoprotein (LDL), oxidized low density lipoprotein and high density lipoprotein (HDL) on the binding of fibrinogen and GpIIb/IIIa antibodies to platelets
- Tez No: 171616
- Danışmanlar: Y.DOÇ.DR. DERYA ÖZSAVCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Trombosit, LDL, oxide LDL, GpIIb/IIIa, fibrinojen, Platelet, LDL, oxidized LDL, GpIIb/IIIa, Fibrinogen
- Yıl: 2006
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
l.ÖZET LDL ve okside LDL trombosit yüzeyinde diğer hücrelerdeki klasik LDL reseptöründen farklı bir reseptöre bağlanarak trombosit aktivasyonunu arttırırlar. Biz çalışmamızda trombosit agragasyonunda önemli rolleri olan trombosit fibrinojeni ve GpIIb/IIIa reseptörü ile LDL, okside LDL ve HDL lipoproteinleri arasındaki ilişkiyi araştırdık. Kesikli dansite gradient ultrasantrifügasyon yöntemi ile LDL ve HDL fraksiyonları saflaştırıldı. LDL C11SO4 ile 24 saat boyunca 37°C'de okside edildi ve oksidasyon malondialdehit seviyeleri ile ölçüldü. Lipoproteinlerin elektroforetik etkisi ve lipid içeriği tayin edildi. ADP indüklü izole trombositler artan 9 farklı konsantrasyonda (7,5- 400p.g/ml) LDL veya ox-LDL ile inkübe edildi. Bu lipoproteinlerin son 3 konsantrasyonuna HDL ilave edildi. GpIIb/IIIa (CD4la) ve antifibrinojen expresyonları flovsitometrik olarak ölçüldü. Sonuçlar her bir trombosit başına spesifik antikor bağlanma kapasitelerine çevrildi. ADP ile aktivasyondan sonra antifibrinojen/trombosit ve CD41a/trombosit sayılan anlamlı derecede arttı ( pO.001). LDL veya ox-LDL ile inkübasyondan sonra artan konsantrasyona bağlı olarak CD41a/trombosit sayısı anlamlı derecede azalırken (pO.001) antifibrinojen/trombosit sayısı anlamlı derecede arttı (pO.001). LDL veya ox-LDL ile muamele edilmiş trombositlere HDL ilave edildiğinde, HDL'nin hem LDL hem de ox-LDL etkisi ile artan fibrinojen sayılarıın anlamlı derecede azalttığı gözlendi (p<0.001). Bu çalışmada izole edilen LDL ile in vitro ox-LDL'nin trombositlere fibrinojen bağlanmasını doza bağımlı olarak arttırdığını belirledik. Bunun yanında her iki lipoprotein trombositlere GpIIb/IIIa antikorunun bağlanmasını %100 inhibe etti. HDL ise LDL ve ox-LDL'nin fibrinojen bağlanmasındaki etkisini tersine çevirdi. Eldeettiğimiz bulgulara göre GpIIb/IIIa trombosit yüzeyinde LDL ve ox-LDL için bağlanma bölgesidir ancak bu lipoproteinlerin GpIIb/IIIa üzerindeki bağlanma domaini fibrinojen domaininden farklı bir bölgedir.
Özet (Çeviri)
2.SUMMARY FLOWCYTOMETRIC ANALYSIS EVALUATION OF THE EFFECTS OF LOW DENSITY LIPOPROTEIN LDL), OXIDIZED LOW DENSITY LD?OPROTEIN AND HIGH DENSITY LEPOPROTEIN (HDL) ON THE BINDING OF FD3RINOGEN AND GPHa/IIIb ANTTBODIES TO PLATELETS LDL, actually oxidized LDL (ox-LDL) enhance platelet function via binding to its receptors on the platelet which are different from the“classical”receptors of the nucleated cells. In our study, we have investigated the relationship between platelet fibrinogen and GpIIb/IIIa, which have crucial roles in platelet aggregation, and LDL, oxidized LDL and HDL lipoproteins. Human LDL and HDL were seperated by density gradient ultracentrifugation. LDL was oxidized with CuS04 for 24h at 37°C and oxidation measured by malondialdehyte levels. Electrophoretic actions and lipid content of lipoproteins were detected. ADP (lOuM) induced washed platelets were treated with increasing 9 different concentrations of LDL or ox-LDL (7,5 to 400fig/ml) where HDL has been added to final 3 concentrations of these lipoproteins. Expressions of GpIIb/IIIa (CD41a) and platelet bound fibrinogen (antifibrinogen) were measured by flow cytometry. Results were converted spesific antibody binding capasities per platelet. Following ADP activation, levels of antifibrinogen/platelet and CD4 la/platelet increased significantly (p<0.001). After treatment with LDL or ox-LDL (7,5 to 400ug/ml), levels of CD4 la/platelet decreased significantly whereas levels of antifibrinogen/platelet increased significantly in dose dependent manner (p<0.001 respectively). However, addition of HDL inhibited the increase in bound fibrinogen molecules (p<0.001). These data showed that while LDL and ox-LDL enhanced fibrinogen binding to platelets, increasing concentrations of LDL and ox-LDL abolished the binding of antiGpIIb/IIIa to platelets dose dependently. HDL reversed this effect of LDL or ox-LDL on only fibrinogen binding. We concluded that GpIIb/HIa might be receptor for LDL and ox-LDL, and it seems that binding site of these lipoproteins on GpIIb/IIIa differ from fibrinogen domain.
Benzer Tezler
- Trombositlerin glukoz utilizasyonu üzerine aspirin, persantin ve indobufenin etkisinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
EMİNE YAZGAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
BiyokimyaUludağ ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. KASIM ÖZLÜK
- Trombosit protein ve glikoproteinlerinin poliakrilamid jel elektroforezi yöntemleri ile incelenmesi
The Analysis of platelet protein and glycoproteins by polyarcrylamide gel electrophoresis methods
PARİCHEHR HANACHİ
- Kanserli hastalarda nötrofil adesivitesi, nötrofil fagositozu ve trombositlerin lökositlere adheransı fenomeni
Başlık çevirisi yok
ERHAN ÇOLAK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1988
OnkolojiCumhuriyet Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. LEVENT ÜNDAR
- Kalsiyum antagonistlerinin trombosit agregasyonu üzerine etkileri
Başlık çevirisi yok
GÜLHAN BAYRI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1989
Kardiyolojiİstanbul ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CEM'İ DEMİROĞLU
- Benzen ve hidrokinonun megakaryositopez ve trombositopoeze etkileri
Başlık çevirisi yok
YASEMİN AYDIN ERGÜN