Düşük dansiteli lipoprotein (LDL) ve okside düşük dansiteli lipoprotein'in (o-LDL) nitrik oksit (NO) aracılı trombosit aktivasyonuna etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of low density lipoprotein (LDL) and oxidized low density lipoprotein on nitric oxide (NO) mediated platelet activation
- Tez No: 196060
- Danışmanlar: DOÇ.DR. AZİZE ŞENER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: LDL, o-LDL, HDL, Trombositler, Nitrik oksit, Trombosit aktivasyonu, LDL, o-LDL, HDL, Platelets, Nitric oxide, Platelet activation
- Yıl: 2007
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Trombositler ve lipoproteinler ateroskleroz ve koroner kalp hastalıklarının patogenezinde önemli rol oynarlar. Bu çalışmada insan plazmasından izole edilen LDL ve LDL'nin oksidasyonu ile elde edilen okside LDL'nin (o-LDL) trombosit aktivasyonu üzerine olan etkilerinin trombosit L-arjinin ve NO yoluyla ilişkisinin aydınlatılması amaçlanmıştır. Kesikli dansite gradient ultrasantrifügasyon yöntemi kullanılarak LDL ve HDL fraksiyonları insan plazmasından saflaştırılarak elde edildi. LDL ve HDL'nin saflıkları trigliserit , total kolesterol , apoprotein düzeyleri ve lipoprotein jel elektroforezi ile belirlendi. Elde edilen LDL'nin bir kısmı Cu++ ile okside edilerek o-LDL elde edildi. o-LDL'nin lipid peroksidasyon düzeyi malondialdehid tayini ile belirlendi. Bu çalışmada sağlıklı 7 kişiden alınan kan örneklerinden izole edilen yıkanmış trombositler öncelikle L-arjinin (1mM) ve L-nitroarjinin metil ester (L-NAME, 1 mM) ile inkübe edilerek Nitrik oksid metabolitlerinin (NOx) düzeyi saptandı. Daha sonra Adenozin difosfat (ADP) indüklü trombositler ortamda L-arjinin varken veya yokken LDL (100 ?g/ml) , HDL (100 ?g/ml) ve o-LDL (100 ?g/ml) ile ayrı ayrı inkübe edildi. İnkübasyon sonrası trombosit P-selektin ekspresyonları flov sitometrik olarak ölçüldü. Sonuçlar her bir trombosit başına spesifik antikor bağlama kapasitelerine çevrildi. L-arjinin ilavesi trombosit NO düzeylerini kontrol grubuna göre anlamlı olarak artırmıştır (p<0.001). L-NAME ile inkübe edilen trombositlerin NO düzeyleri L-arjinin ile inkübe edilenlerden anlamlı olarak düşüktür (p<0.001). LDL ve o-LDL trombosit başına düşen P-selektin düzeylerini anlamlı olarak artırdı (p<0.001). Buna karşılık trombositlere LDL ve o-LDL ile inkübasyon öncesi L-arjinin ilavesi P selektin reseptörü sayılarının sadece LDL ve o-LDL ilavesine göre anlamlı olarak azalmasına neden oldu (p<0.01, p<0.001). Trombositlere o- LDL, L-arjinin ile birlikte HDL ilavesi ise trombosit P selektin reseptör sayısının azalmasına neden oldu ( p<0.001 ). HDL ile birlikte L-arjinin ilavesi P-selektin sayıları daha da düşük bulundu. Sonuç olarak in vitro olarak önceden eksojen L-arjinin ilavesi trombosit NO düzeylerini artışına neden olur, bu artış LDL'nin ve o-LDL'nin trombosit aktivasyonunu artırıcı etkisini azaltır. HDL'de L-arjininin bu etkisini kuvvetlendirir.
Özet (Çeviri)
Platelets and lipoproteins play an important role in atherosclerosis and coronary heart diseases. The aim of this study was to investigate the relationship between Larginine/ NO pathway and isolated lipoproteins from human plasma and oxidized LDL (ox-LDL). Human LDL and HDL were separated by density gradient ultracentrifugation and LDL was oxidized with Cu++ for 24 h at 37 °C. Purity of lipoproteins were assured by triglyceride, total cholesterol, apoprotein levels and lipoprotein gel electrophoresis. Lipid peroxidation levels of ox-LDL were performed with MDA assay. L-arginine (1 mM) and L-nitroarginine methylester (L-NAME, 1 mM) were treated with washed platelets and Nitric oxide metabolites (NOx) level was measured. Adenosine diphosphate (ADP) induced washed platelets were incubated with LDL (100 ?g/ml) , HDL (100 ?g/ml) and ox-LDL (100 ?g/ml) with or without L-arginine. After incubation, platelet P-selectin levels were measured by flow cytometry. The results were converted to specific antibody binding capacities per platelet. After treatment with L-arginine, platelet NO levels significantly increased compared to the controls (p<0.001). Platelet NO levels decreased with L-NAME compared to Larginine (p<0.001). After incubation with LDL and ox-LDL, P selectin levels per platelet significantly increased (p<0.001). On the other hand, P selectin levels in platelets treated with L-arginine+LDL and L-arginine+ox-LDL decreased compared to the levels in platelets treated with only LDL and ox-LDL (p<0.01, p<0.001). Addition of HDL to L-arginine+ox-LDL caused sifnificant reduction in P selectin receptor numbers per platelet as in the control values (p<0.001). We conclude that pretreatment of platelets with exogenous L-arginine causes enhanced endogen platelet NO levels and negates the effects of LDL and ox-LDL on platelet activation and that HDL also strengthens this effect of L-arginine.
Benzer Tezler
- Akne vulgaris hastalarında oral isotretinoin tedavisi ateroskleroz riskini arttırıyor mu? Oral isotretinoinin plazma B12 vitamini, folik asit, homosistein, lektin benzeri düşük dansiteli lipoprotein reseptör 1 (LOX-1) ve okside düşük dansiteli lipoprotein (OX-LDL) düzeylerine etkisi
Does oral isotretinoin treatment increase the risk of atherosclerosis in acne vulgaris patients? The effect of oral isotretinoin on plasma vitamin B12, folic acid, homocysteine, lectin-like low-density lipoprotein receptor 1 (LOX-1) and oxidized low-density lipoprotein (OX-LDL) levels
MÜGE GÜNDÜZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
DermatolojiManisa Celal Bayar ÜniversitesiDermatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KAMER GÜNDÜZ
- Antiepileptik ilaç kullanan epileptik çocuklarda düşük dansiteli lipoprotein (LDL) oksidasyonu, paroksonaz aktivitesi ve arter genişleyebilirliğinin incelenmesi
Assessment of low-density lipoprotein (LDL) oxidation, paraoxonase activity and arterial distensibility in epileptic children who treated by antiepileptic drugs
MUSTAFA YILDIZ
- Trombositlere fibrinojen ve GpIIb/IIIa antikorlarının bağlanmasında düşük dansiteli lipoprotein (LDL), okside olmuş düşük dansiteli lipoprotein ve yüksek dansiteli lipoprotein (HDL)'lerin etkilerinin flovsitometrik yöntemle incelenmesi
Flowcytometric analysis evaluation of the effects of low density lipoprotein (LDL), oxidized low density lipoprotein and high density lipoprotein (HDL) on the binding of fibrinogen and GpIIb/IIIa antibodies to platelets
HATİCE AVCI
- Psöriasisli hastalarda düşük dansiteli lipoprotein (LDL)'in oksidasyona yatkınlığı ve bunun oksidan-antioksidan denge ile ilişkisi
The Susceptibility of low density lipoprotein (LDL) to oxidation and its relation with oxidant-antioxidant balance in psotiatic patients
BİRGÜL KURAL (VANİZOR)
- Behçet hastalığında antioksidan denge ile düşük dansiteli lipoprotein oksidasyonu arasındaki ilişki ve oluşan otoantikorların incelenmesi
The Investigation of relationship between antioxidant status and oxidation of low density lipoprotein, of produced autoantibodies in patients with Behçet's disease
YUNUS EMRE YANDI
Yüksek Lisans
Türkçe
2000
BiyokimyaKaradeniz Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. ASIM ÖREM