Geri Dön

Purification and characterization of hexokinase isoenzymes from Rhizopus oryzae

Rhizopus oryzae'den heksokinaz izoenzimlerinin saflaştırılması ve karakterizasyonu

PDF İndir

  1. Tez No: 199232
  2. Yazar: DİDEM DEDEOĞLU
  3. Danışmanlar: PROF. HALUK HAMAMCI, DR. ŞEYDA AÇAR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Rhizopus oryzae, heksokinaz, glikokinaz glikoliz, saflaştırma, Rhizopus oryzae, hexokinase, glucokinase glycolysis, purification
  7. Yıl: 2007
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 116

Özet

Tüm canlılar için glikoliz merkezi bir izyoludur. Glikolizin kontrolüendüstriyel ürünlerin verimi açısından önemlidir. Bu ürünlerden bir tanesi olanlaktik asit endüstride önemli bir organizma olan Rhizopus oryzae tarafındanüretilirFilamentli bir küf olan Rhizopus oryzae laktik asit ve etanol üretir.Bakterilerle karşılaştırıldığında R. oryzae'nin laktik asit verimi düşüktür. Fakatsadece L(+) laktik asit formunu ürettiği için önemlidir. Laktik asitin L formuinsanlarda metabolize edilebilir. Endüstride, belirli bir ürünün üretimininuygulanabilir olması için verim yüksek olmalıdır. Eğer glikoliz boyunca akımınarttırılması için bir yol bulunabilirse aynı zamanda laktik asit verimi de artabilir.Bu çalışmada buna dayanarak glikolizin ilk basamağı olan heksokinazaodaklanmak istedik. Heksokinaz glikozu glikoz-6-fosfat a çeviren reaksiyonukatalizler. Bu çalışmada ilk kez Rhizopus oryzae'nin heksokinazının iki izoenzimformunu saflaştırıldı ve kinetik karakterizasyonunu yapıldı.Heksokinaz iki tane izoenzime sahiptir. Saflaştırılan izoenzimler Michealis-Menten Kinetiğine uyumlu bulunmuştur. pH 7.70 de izoenzyme 1 için glikoza Kmdeğeri 0.16 mM ve izoenzim 2 için glikoza Km değeri 0.21 mM olarak tespitedildi. İzoenzim1 için fruktoza Km değeri 28.8 mM iken izoenzyme 2 nin Kmdeğeri belirlenememiştir. Her iki izoenzim de trehaloz-6-fosfatla inhibeolmamaktadır. İzoenzimlerin moleküler ağırlıkları SDS PAGE yöntemi ilebelirlendi. İzoenzim 1'in moleküler ağırlığı 62.9 ve 45.2 kDa iken izoenzim 2' ninmoleküler ağırlığı 56.2 kDa ve 41.6 kDa dır.

Özet (Çeviri)

Glycolysis is the central metabolic pathway for living organisms. Itsregulation is important for the yield of the end products which are industriallyimportant. These end products, like lactic acid produced by Rhizopus oryzae, areindustrially important.Rhizopus oryzae is a filamentous fungus producing lactic acid and ethanol.The lactic acid yield of R. oryzae is low (∼70 %) compared to that of lactic acidbacteria (>95 %) still it is noteworthy because R. oryzae produces only the L (+)form of lactic acid which can be metabolized in the human body. The yield of anindustrial process should be high for the feasibility of the production of aparticular product. If a way can be found increase the flux through the glycolysisthe yield of lactic acid may increase as well.Keeping this in mind we wanted to focus on the first step of glycolysis,hexokinase of R. oryzae. Hexokinase catalyzes the reaction that converts glucose toglucose-6-phosphate. In this study for the first time the two isoenzymes ofhexokinase of R. oryzae were purified and characterized by biochemically andkineticallyHexokinase has two isoenzymes. The purified enzymes (isoenzymes1 &isoenzymes2) obeyed Michealis-Menten Kinetics. The Km value of purifiedisoenzyme 1 is 0.16 mM and isoenzyme 2, 0.21 mM at pH 7.70 for glucose. TheKm value of isoenzyme1 for fructose was 28.8 mM. Essentially isoenzyme 2 cannot utilize fructose. None of the isoenzymes were inhibited by trehalose-6-phophate.The monomer moleculer weight of isoenzymes were estimated SDSPAGE analysis. There were two different values for molecular weight ofisoenzmye 1; 62.9 and 42.5 kDa and two values for isoenzyme 2; 56.2 and 41.6kDa

Benzer Tezler

  1. Tez No

    82463

    Isolation and preliminary characterization of hexokinase from rhizopus oryzae

    Başlık çevirisi yok

    ŞEYDA AÇAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1999

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL YÜCEL

  2. Tez No

    153514

    Biochemical and genetic studies on the pyruvate branch point enzymes of Rhizopus oryzae

    Rhizopus oryzae' nın piruvat ayrım noktası enzimleri üzerinde biyokimyasal ve genetik çalışmalar

    ŞEYDA AÇAR

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2004

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HALUK HAMAMCI

    PROF. DR. MERAL YÜCEL

  3. Tez No

    82431

    Purification and characterization of bacterioins produced by pediococcus acidilactici and pediococcus pentosaceus

    Pediococcus acidilactici ve pediococcus pentosaceus tarafından üretilen bakteriyosinlerin saflaştırılması ve karakterizasyonu

    ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1999

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. UFUK GÜNDÜZ

  4. Tez No

    83638

    Beyin ve beyin zarından sitozolik ve nonsitozolik karbonik anhidraz enzimlerinin izolasyonu ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of cytoplasmic and noncytoplasmic carbonic anhydrases from brain and brain membrane

    FATMA COŞKUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAZAN DEMİR

  5. Tez No

    75735

    Purification and characterization of cytochrome b5 from sheep liver microsomes

    Sitokrom b5'in koyun karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    DENİZ YALÇIN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1998

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMEL ARINÇ

Geri Dön