Geri Dön

Kreatin ve kreatinin tayinlerine yönelik enzim temelli hibrit biyosensörlerin geliştirilmesi

Enzyme based on hybrid biosensor for the development for determination of creatine and creatinine

PDF İndir

  1. Tez No: 224147
  2. Yazar: ÇAĞRI ALTUĞ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. ERHAH DİNÇKAYA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Kreatinin biyosensörü, kreatin biyosensörü, kreatinin, kreatin, sarkozin, Creatinine biosensor, creatine biosensor, creatinine, creatin, sarcosine
  7. Yıl: 2007
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu tezde kreatinin amidohidrolaz, kreatin amidinohidrolaz ve sarkozin oksidaz enzimlerinden yararlanıldı. Bu enzimler , oksijen tayini amacıyla kullanılan çözünmüş oksijen probu yüzeyinde, glutaraldehid yardımıyla jelatin ile çapraz bağlanarak kreatin ve kreatinin biyosensörü hazırlandı. Ölçümler kreatin ve kreatinin derişimi ile doğru orantılı olarak tüketilen oksijen düzeyinin belirlenmesi yoluyla çizilen standart grafikler yardımıyla gerçekleştirildi. Hazırlanan kreatin biyosensörü için optimum koşullar belirlendi. Kreatin biyosensörünün optimizasyon çalışmaları sonunda kreatin amidinohidrolaz miktarı , sarkozin oksidaz miktarı, jelatin miktarı ve glutaraldehid yüzdesi sırayla 0,56mg/cm2 kreatin amidinohidrolaz(16U), 0,38mg/cm2 sarkozin oksidaz(25U) , 5,90mg/cm2 jelatin ve %2,5 olarak bulundu. Yapılan optimizasyon çalışmaları sonucunda çalışma tamponu pH=8,0 , 50 mM lık fosfat Tamponu olmasına ve ölçümlerin 37 0C gerçekleşmesine karar verildi. Geliştirilen kreatin biyosensörünün karakterizasyon çalışmaları sonucunda, substrat olarak kreatin VI kullanılması durumunda 25?M-750?M doğrusal sonuçlar alınabildiği belirlendi. Tekrarlanabilirlik denemelerinde (n=10) 500?M kreatin derişimi ortalama değer =500,7 ?M standart sapma (S.S)= ± 2,21 ?M ve varyasyon katsayısı VK= %0,44 bulundu. Hazırlanan kreatinin biyosensörü için optimum koşullar belirlendi. Kreatinin biyosensörünün optimizasyon çalışmaları sonunda kreatinin amidohidrolaz, kreatin amidinohidrolaz miktarı , sarkozin oksidaz miktarı, jelatin miktarı ve glutaraldehid yüzdesi sırayla 0,016mg/cm2 kreatinin amidohidrolaz(37U), 0,56mg/cm2 kreatin amidinohidrolaz(16U), 0,38mg/cm2 sarkozin oksidaz(25U), 5,90mg/cm2 jelatin ve %2,5 olarak bulundu. Yapılan optimizasyon çalışmaları sonucunda çalışma tamponu pH=8,0 , 50 mM lık fosfat Tamponu olmasına ve ölçümlerin 37 0C gerçekleşmesine karar verildi. Geliştirilen kreatinin biyosensörünün karakterizasyon çalışmaları sonucunda, substrat olarak kreatinin kullanılması durumunda 10?M-750?M doğrusal sonuçlar alınabildiği belirlendi. Tekrarlanabilirlik denemelerinde (n=10) 500?M kreatin derişimi ortalama değer =499,8 ?M standart sapma (S.S)= ±6,957 ?M ve varyasyon katsayısı VK= %1.4 bulundu.

Özet (Çeviri)

In this thesis, enzymes were used creatinine amidohydrolase, creatine amidinohydrolase and sarcosine oxidase. These enzymes was crosslinked with gelatine by using glutaraldehyde and fixed on pretreated Teflon membrane, served as creatine biosensor and creatinine biosensor. Measurements were carried out by standart curves which were obtained by the determination of consumed oxygen level, related to creatine and creatinine concentration in the enzymatic reaction. Firstly, the optimum conditions for the creatine biosensor and the creatine biosensor were established. In the optimization studies of the creatine biosensor, creatine amidinohydrolase amount, sarcosine oxidase amount , gelatine amount and glutaraldehide ratios were determined as 0,56mg/cm2 (16U), 0,38mg/cm2 (25U), 5,90mg/cm2 gelatine and 2,5% respectively. Phosphate buffer (50mM. pH= 8 ) and 37 0C were established as providing the potimum working conditions. The characterization studies of developed the creatine biosensor proved a VIII lineratiriy in the creatine concentration range 25?M-750?M. The reproducibility experiments (n=10) revealed that for 500 ?M creatine , the average value =500,7?M , standart deviation (SD) was ± 2,21 ?M and, variation coefficient (C.V) was 0,44% . The optimum conditions for the creatinine biosensor and the creatinine biosensor were established. In the optimization studies of the creatine biosensor, creatinine amidohydrolase amount, creatine amidinohydrolase amount, sarcosine oxidase amount , gelatine amount and glutaraldehide ratios were determined as 0,016mg/cm2 (37U), 0,56mg/cm2 (16U), 0,38mg/cm2 (25U), 5,90mg/cm2 gelatine and 2,5% respectively. Phosphate buffer (50mM. pH= 8 ) and 37 0C were established as providing the potimum working conditions. The characterization studies of developed the creatinine biosensor proved a lineratiriy in the creatinine concentration range 10?M-750?M. The reproducibility experiments (n=10) revealed that for 500 ?M creatinine , the average value =499,8 ?M, standart deviation (SD) was ±6,957 ?M and, variation coefficient (C.V) was 1,4 %.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    134341

    Göğüs ağrısı şikayeti ile gelen hastaları takip ederek CK-MB ve troponin-T enzim seviyelerinin karşılaştırılması

    Comparison of troponin -T and CK-MB serum levels of patient with chest pain

    HULUSİ KURUM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ABDULKADİR AKÇİN

  2. Tez No

    88305

    Akut myokard infarktüsünün erken tanısında kreatin kinaz-MB troponin-T ve myoglobinin diagnostik değeri

    The Role of creatine kinase-MB, troponin-T and myoglobin in early diagnoses of acute myocard infarction

    FAİZA HAJ İBRAHİM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Biyokimyaİstanbul Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NİHAL SALMAYENLİ

  3. Tez No

    7181

    İskemik miyokardiyal korunmada oksijenlendirilmiş ve oksijenlendirilmemiş kardiyoplojilerin kreatin kinaz MB seviyeleri ile karşılaştırılması

    Başlık çevirisi yok

    FATİH MEHMET YORULMAZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1989

    Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiGazi Üniversitesi

    Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALİ ERSÖZ

  4. Tez No

    31446

    Ritodrin uygulanan 24-34 haftalık gebelerin preterm bebeklerinde perinatal asfiksi indikatörü olarak kord kanı PH, kan gazları, kreatin fosfokinaz ve MB izoenzimi analizi

    Başlık çevirisi yok

    ALİ DİNÇAY KAVAKLI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1993

    Kadın Hastalıkları ve DoğumAtatürk Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

  5. Tez No

    88909

    Ektopik gebelikte Kreatin Kinaz'ın tanısal değeri

    Başlık çevirisi yok

    CENK AŞKALLİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Kadın Hastalıkları ve DoğumYüzüncü Yıl Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMER DAREGENLİ

Geri Dön