Geri Dön

Dynamic analysis of sumo conjugation cascade by molecular modeling and simulations

Sumo konjugasyon basamaklarının moleküler modelleme ve siımulasyon ile incelenmesi

  1. Tez No: 232624
  2. Yazar: EZGİ KARACA
  3. Danışmanlar: PROF. TÜRKAN HALİLOĞLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya Mühendisliği, Chemical Engineering
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2008
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 113

Özet

Ubikuitin (Ub) ve Ubikuitin benzeri değiştiriciler (Ubds) proteinlerin translasyon sonrası değişimini (TSD) düzenlerler. TSD Ub/Ubd proteinlerinin belirli bir hedefe konjugasyonu sonucunda gerçekleşir. Hedef proteinlerin değiştirilmesi için, Ub/Ubds C-uçlarını hedef protein üzerinde bulunan katalitik lizine yönlendirirler. Konjugasyon mekanizması üç aşamada gerçekleşir. Bu aşamalarda sırasıyla Ubikuitin benzeri proteinleri aktifleştiren enzim (E1), Ubikuitin benzeri proteinlerin konjugasyonunu sağlayan enzim (E2) ve Ubikuitin benzeri proteinlerin ligazı (E3) görev yapar. SUMO-1, Ub/Ubd ailesine mensup bir proteindir ve hücrenin sinyal iletiminde, metabolik aktivitelerinde ve DNA kodunun transkripsiyonunda aktif görev alır. Dolayısıyla, SUMO-1'in çalışma mekanizmasında meydana gelebilecek bozukluklar Parkinson, Alzheimer veya kanser gibi hastalıkların oluşmasına yol açabilir. Bir proteinin sumolanması Ub/Ubd konjugasyonuyla benzer bir mekanizma sonucunda gerçekleşir. Ancak bazı özel durumlarda hedef proteinler E3 olmadan da sumolanabilir. Böyle durumlar için E3'n gerekliliği tartışmalıdır. Bu tezde, E3'ün ve de E2'nin hedef protein seçimindeki rolünü anlamak için Molekler Dinamik (MD) simülasyonları iki sistem için yapılmıştır: Ubc9(E2)-RanBP2(E3)-SUMO-1- RanGAP1(Target) ve Ubc9-SUMO-1-RanGAP1. Yapılan dinamik analizler, RanBP2'nin RanGAP1'in konformasyon uzayını sınırlandırdığını ortaya koymuştur. Bu sınırlandırmanın, RanGAP1'in üzerinde bulunan katalitik LKSE motifinin ve Ubc9'a bağlanma bölgesinin kataliz için daha uygun konformasyonları seçmesini kolaylaştırdığı düşünlmektedir. Aynı zamanda, RanBP2'nin SUMO-1 ve Ubc9'u daha küçük bir alana sıkıştırdığı gözlemlenmiştir. Bu sıkışmanın kataliz için gerekli mikrobölgenin oluşmasında etkili olduğu sanılmaktadır. Sıkıştırma sonucunda, Ubc9'un evrim sırasında korunmuş olan Asp33 amino asiti çevresindeki halkanın daha önce benzeri görlmemiş bir konformasyon aldığı görülmüştr. Bu konformasyonda, Asp33 kendini RanGAP1'e doğru yönlendirerek çevresindeki halkanın katlanmasını sağlamaktadır. Buna ek olarak Asp33'ün çevresindeki halkanın Ubc9'un ve de Ran-GAP'in katalitik bölgeleriyle korelasyonu vardır. RanBP2'nin olmadığı durumlarda bu bölge benzeri oynamalar göstermemiş, bunun yerine SUMO-1'in Gly68'inin kendini Ubc9'a doğru yönlendirdiği tespit edilmiştir. Gly68 de Asp33 gibi evrim sırasında korunmuş bir amino asittir. SUMO-1'in Gly68'inin Ubc9'a en çok yaklaştığı zamanlarda, Gly68 RanGAP'in katalitik bölgeleriyle ve de Ubc9'a bağlanma bölgeleriyle korelasyon göstermektredir. SUMO-1'in yaptığı bu hareketle, RanBP2 tarafından uygulanan sıkıştırma hareketini taklit ettiği sanılmaktadır. Bu bulgular, Ubc9'un Asp33'ünün ve de SUMO-1'in Gly68'inin fonksiyonel öneme sahip olabiliceğine işaret etmektedir. Tez çalışması süresince elde edilen bu sonuçlar RanBP2'nin Ubc9-SUMO-1-RanGAP1 sistemindeki katalitik bölgelerin konformasyon uzayını sınırlandırdığını ve de bu sistem üzerinde alosterik bir etkisi olduğunu göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Ubiquitin (Ub) and ubiquitin like modifiers (Ubls) are proteins, which facilitate post-translational modification (PTM) of proteins. A PTM involves Ub/Ubl conjugation on to a specific target. In order to modify targets, Ub/Ubls are conjugating generally- their C-termini to the catalytic lysine residue of target. The mechanism of conjugation is a three step cascade, which is mediated by Ubiquitin-like protein activating enzyme (E1), Ubiquitin-like protein conjugating enzyme (E2) and Ubiquitin-like protein ligase (E3). SUMO-1 is an Ub/Ubl family member and it takes role in the signaling, metabolic and transcriptional regulation of the cell. Thus its malfunctioningresults in various diseases like Parkinson disease, Alzheimer disease or cancer. Sumoylation has the general mechanistic structure of Ub/Ubl conjugation. Nevertheless in sumoylation, E2 has also the ability to recognize the target. For some specific cases it can even conjugate SUMO-1 on to the target without the presence of an E3. Thus, for such cases, whether E3 is required for conjugation is controversial. In order to understand the role of the E3 and E2?s target specificity in sumoylation, Molecular Dynamics (MD) simulations are carried out for the systems of Ubc9(E2)-RanBP2(E3)-SUMO-1-RanGAP1(Target) and Ubc9-SUMO-1-RanGAP1. The dynamic analyses revealed that RanBP2 restricts the conformational space of the SUMO-1 and RanGAP1, which could ease the accessibility of the probable conformations of Ubc9 binding region and the catalytic LKSE motif of RanGAP1 for the catalysis. It is also observed that RanBP2 packs SUMO-1 and Ubc9 in a close geometry to constrain the microenvironment of the catalytic sites. With this packing, the loop around Asp33, which is a strictly conserved residue of Ubc9, access a unique conformational state, whereAsp33 bends itself towards RanGAP1. Interestingly, the loop around Asp33 displays correlations with the catalytic sites of both Ubc9 and RanGAP1, when it is in this conformational state. Without RanBP2, however, the loop looses this conformational state and SUMO-1 directs it?s Gly68, which is highly conserved too, towards Ubc9. As Gly68 of SUMO-1 anchors on to Ubc9, it also reflects correlations with the catalytic site and Ubc9 binding surface of RanGAP1. With this motion, the system adjusts itself to mimic the packing action imposed by RanBP2. This observation suggests a functional significance of Asp33 of Ubc9 and Gly68 of SUMO-1, which should be studied by further experiments. The present results in general suggest that RanBP2 may both restrict the conformational space of the catalytic sites and impose an allosteric effect on the system of Ubc9-SUMO-1-RanGAP1.

Benzer Tezler

  1. The dynamics underlying enhancement of E2 ligase activity by E3 ligases in sumoylation

    Sumolanmada E2 ligaz aktivitesinin E3 ligazlar ile arttırılmasının belirleyici dinamikleri

    MELDA TOZLUOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2008

    Kimya MühendisliğiBoğaziçi Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. TÜRKAN HALİLOĞLU

  2. In vitro and in silico investigation of NFIB-SUMO interactions

    NFIB-SUMO etkileşimlerinin in vitro ve in silico olarak incelenmesi

    AYBERK ÖZKAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ASLI KUMBASAR

  3. p60-katanin (katna1) gene promoter regulatıon by ELK1

    p60-katanin (KATNA1) gen promotörünün ELK1 ile regülasyonu

    DOLUNAY KELLE

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ

  4. Plant-wide process analysis targeting reliable estimation of biogas production from anaerobic sludge digestion

    Anaerobik çamur çürütme prosesinden biyogaz üretiminin güvenilir tahminine yönelik tesis geneli proses analizi

    GÖKŞİN ÖZYILDIZ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAYRETTİN GÜÇLÜ İNSEL

  5. Comparison of long term and cycle data calibration for modelling of sequencing batch reactor

    Ardışık kesikli reaktörün modellenmesi için uzun dönemli ve döngüsel veri kalibrasyonlarının karşılaştırılması

    YASEMİN ÖZLİMAN FARIMMAZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NEVİN YAĞCI