Isolation and immobilization of NADH-cytochrome b5 reductase from rabbit liver
Tavşan karaciğerlerinden NADH-sitokrom b5 redüktaz enziminin izolasyonu ve immobilizasyonu
- Tez No: 23477
- Danışmanlar: PROF. DR. URAL AKBULUT
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1992
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 86
Özet
NADH-sitokrom b5 redüktaz (EC 1.6.2.2) enzimi tavşan karaciğer mikrozomlarından izole edilmiştir. Daha sonra bu enzim krom (III) asetat, krom (Di) sülfat ve potasyum krom (IH) sülfat kullanılarak kimyasal çapraz bağlama yöntemi ile fotoğrafik jelatin içine immobilize edilmiştir. Hazırlanan film striplerinin enzim sızıntısı kontrolleri fosfat tamponu (0.1 M, pH 7.5) ile yıkanarak yapılmıştır. Bağlanmamış enzim miktarı yıkama çözeltisindeki enzim aktivitesinin spektrofotometrik yöntemle tayin edilmesiyle bulunmuştur. Çapraz bağlayıcı, jelatin ve enzim konsantrasyonunun enzimatik aktivite üzerindeki etkileri çalışılmıştır. Serbest ve immobilize edilmiş NADH-sitokrom b5 redüktaz enzimi için substrat konsantrasyonu, kofaktör konsantrasyonu, pH, sıcaklık ve saklama şartları optimize edilmiştir. Sürekli kullanımın ve dinlendirmenin immobilize edilmiş enzim aktivitesi üzerine etkileri saptanmıştır. Mekanikkararlılık ve sızıntının jelatin ve çapraz bağlayıcı konsantrasyonlarına bağımlı olduğu bulunmuştur. Ayrıca immobilize edilmiş NADH-sitokrom b5 redüktaz enziminin ısıya karşı serbest redüktaz enzimine göre daha kararlı ve dirençli olduğu gözlenmiştir. Anahtar Kelimeler : Immobilize edilmiş NADH - sitokrom b5 redüktaz, fotografîk jelatin, krom (IH) asetat ile çapraz bağlama. Bilim Dalı Kodlan : 401.01.05, 405.05.01, 101.04.01 vı
Özet (Çeviri)
NADH - cytochrome b5 reductase (EC 1.6.2.2) was isolated from rabbit liver microsomes. This enzyme was immobilized into photographic gelatin by chemical cross linking with chromium (III) acetate, chromium (1H) sulfate and potassium chromium (III) sulfate. Leakage from immobilized film strips were controlled by washing with phosphate buffer (0.1 M, pH 7.5) and the activities of the enzyme were measured spectrophotometrically to determine the amount of unbounded enzyme. The effect of cross linker, gelatin and enzyme concentrations on immobilized enzyme activity were studied with washed film strips. The optimum conditions for substrate concentration, cofactor concentration, pH, temperature and storage conditions of free and immobilized NADH - cytochrome b5 reductase were determined. The effect of resting and the meffect of continuous use on the activity of immobilized film strips were also investigated. Mechanical stability and leakage were found to be functions of gelatin and cross linker concentrations. The immobilized NADH - cytochrome b5 reductase was also found to be more stable and resistant to heat treatment than free reductase. Keywords : Immobilized NADH - cytochrome b5 reductase, photographic gelatin, chromium (HI) acetate cross linking. Science Codes : 401.01.05, 405.05.01, 101.04.01 IV
Benzer Tezler
- Çeşitli dokulardan aldoz redüktaz enziminin izolasyon ve immobilizasyonu
Isolation and immobilization of aldose reductase from different tissues
MARYA VAKIL NASLIYAN
- p-klorometilstiren bazlı polimerik partiküllerin sentezi ve glikoprotein izolasyonu ve immobilizasyonunda kullanılması
Synthesis of polymeric beads based on p-chloromethylstyrene and the use of them for separation and isolation of glycoprotein
TAHSİN BAHAR
Doktora
Türkçe
2001
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN ALİ TUNCEL
- Eşboyutlu ve poli (akrilat) bazlı biyosorbentlerin üretimi ve karakterizasyonu
Başlık çevirisi yok
ESMA VOLGA BULMUŞ
- Karpuz (citrullus vulgaris) alfa-galaktozidazının doğal ve sentetik polimerlerde immobilizasyonu
Immobilization of watermelon (citrullus vulgaris) alfa-galactosidase on natural and synthetic polymers
SEÇİL TATAR ÖNAL
- Recognition mediated fabrication and tailoring of polymeric and colloidal microstructures
Polimerik ve kolloidimsi mikroyapıların tanıma yoluyla fabrikasyonu ve işlevselleştirilmesi
GÜLEN YEŞİLBAĞ
