Paraoksonaz Q ve R izoenzimlerinin saflaştırılması ve bazı çevre kirleticilere karşı afinitesinin araştırılması
Purification of paraoxonase Q and R izoenzymes and the investigation of the affinity to some environmental pollutants
- Tez No: 237529
- Danışmanlar: PROF. DR. OKTAY ARSLAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Çevre kirleticiler, İnhibisyon, Environmental pollutants, Inhibition
- Yıl: 2008
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Balıkesir Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, detoksifikasyon ve antioksidan aktivitesi ile metabolizmada önemli fizyolojik fonksiyona sahip paraoksonaz (PON1) Q ve R izoenzimlerini saflaştırmak için yeni bir hidrofobik etkileşim kromatografisi jeli sentezlenmiştir. Hidrofobik etkileşim kromatografisi jeli, CNBr ile aktive edilmiş Sepharose-4B'ye uzantı kolu olarak L-tirozin bağlandıktan sonra ligand olarak hidrofobik bir molekül olan 9-aminofenantrenin L-tirozine kenetlenmesi sonucu sentezlenmiştir.Sentezlenen hidrofobik etkileşim jeli ile uygulanan hidrofobik etkileşim kromatografisi ve amonyum sülfat çöktürmesi yöntemleri kullanılarak insan serumundan Q ve R izoenzimleri ayrı ayrı saflaştırılmıştır. Saflaştırılan PON1Q ve R izoenzimleri SDS poliakrilamid jel elektroforezine uygulanarak yaklaşık 43 kDa molekül ağırlığına sahip tek bant elde edilmiştir.İnsan serum PON1 enziminin paraokson substratına karşı KM ve Vmax değerleri Linewear-Burk yöntemi ile Q izoenzimi için 0,599 mM ve 55 U/mL, R izoenzimi için 0,492 mM ve 50 U/mL olarak bulunmuştur.Bu çalışmada Mn, Hg, Co, Cd, Ni ve Cu ile purtapyr, agroform, practucer ve roundup ticari isimleriyle kullanılan bazı çevre kirleticilerin saflaştırılmış PON1192Q ve PON1192R izoenzimleri üzerindeki in vitro etkisi belirlenmiştir. Söz konusu çevre kirleticilerinin bu izoenzimlerden R tipini daha fazla inhibe ettiği saptanmıştır.
Özet (Çeviri)
In this study, a new gel of hydrophobic interaction chromatography for purification of paraoxonase (PON1) Q and R izoenzyme, which are of important physiological function in metabolism with detoxification and antioxidant activity, were synthesized. The gel was synthesized with Sepharose-4B-L-tyrosine and 9-aminophenantrene as hydrophobic ligand. Sepharose-4B was activated with CNBr and than L-tyrosine was added as extension arm.Human serum paraoxonase was purified with ammonium sulfate precipitation and with synthesized hydrophobic interaction chromatography. On SDS-polyacyrilamide gel electrophoresis, purified human serum paraoxonase yielded a single band of 43kDa on SDS-PAGE.The KM and Vmax values were determined by the method of Lineweaver-Burk plots, using paraoxon as substrate. The KM and Vmax were 0.599mM and 55 U/ml for Q izoenzyme, 0.492 mM ve 50 U/mL for R izoenzyme respectively.The effect of some environmental pollutants on purified human serum PON1192Q and PON1192R in vitro was determined. The pollutants were Mn, Hg, Co, Cd, Ni, Cu, purtapyr, agroform, practucer, roundup. All of them caused an inhibition effect on purified human serum paraoxonase in vitro. In addition, the inhibition of paraoxonase activity for R izoenzyme by these pollutants was more than that of R izoenzyme.
Benzer Tezler
- Fibromiyalji hastalarında paraoksonaz 55 L/M ve 192 Q/R polimorfizminin araştırılması
Investigation of paroxonase 55L/M and 192 Q/R polimorphisms in fibromyalgia patients
MEHMET ŞAHİN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
BiyokimyaGaziosmanpaşa ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. ALİ AKBAŞ
YRD. DOÇ. ERKAN SÖĞÜT
- Tip 2 diyabetli hastalarda paraoksonaz 1 L/M 55 ve Q/R 192 polimorfizmlerinin paraoksonaz 1 ve antioksidan enzim aktiviteleri ile lipid düzeyleri üzerine etkileri
Effects of paraoxonase 1 L/M 55 and Q/R 192 polymorphisms on enzyme activities of paraoxonase 1 and antioxidant enzymes and lipid levels in patients with type 2 diabetes mellitus
MUHİTTİN ÖNDERCİ
- Koroner arter hastalarında total oksidan /antioksidan seviye, paraoksonaz, arilesteraz aktiviteleri ve PON1 192Q/R fenotiplemesi
Total oxidant/antioxidant status, paraoxonase, aryesterase activities and PON1 192Q/R phenotyping
GÜLŞEN ESGİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
BiyokimyaGaziantep ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. Ş. NUR AKSOY
- Metabolik sendromlu hastalarda paraoksonaz aktivitesi ve gen polimorfizmi
Paraoxonase activity and gene polymorphismin patients with metabolic syndrome
NURDAGÜL ŞERİFE NURANİ ÇULCU
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyokimyaDicle ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATMA BİRGÜL IŞIK
- Serum paraoksonaz (pon) aktivitesi ve bununponi polimorfizmi ve serum HDL düzeyi ile ilişkisi
Serum paraoxonase (pon) activity and it's relationship with pon 1 polymorpism and serum HDL level
KAĞAN KILINÇ