Geri Dön

Fare embriyonik kök hücre koloni parçalarının açık çekilmiş payet yöntemi ile dondurulması

Freezing of mouse embryonic stem cell colony fragments by open pulled straw method

  1. Tez No: 247497
  2. Yazar: KAMBER DEMİR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SEMA BİRLER
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2009
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 114

Özet

Fare embriyonik kök hücre hatları; terapötik amaçlı, insan hastalık modeli fare oluşturulması, kimyasal maddelerin toksik etkilerinin ve hücre içi sinyal mekanizmalarının araştırılması çalışmalarında kullanılmaktadır. Fare embriyonik kök hücreleri yavaş dondurma veya vitrifikasyon yöntemleri ile dondurulduğunda sırasıyla kristal oluşumu veya yüksek kriyoprotektan maddelerin toksik etkileri nedeniyle hasara uğramaktadır. Bu nedenle hücrelerin pluripotent yapısını ve canlılık oranını koruyan dondurma yöntemlerinin geliştirilmesine ihtiyaç vardır. Çalışmamızda, fare embriyonik kök hücre hatlarının saklanabilmesi için güvenilir ve kolay uygulanabilir bir dondurma yönteminin geliştirilmesi amaçlanmıştır. ?Açık Çekilmiş Payet? tekniği kullanılarak; 50 mM Taurin içeren veya Taurin içermeyen vitrifikasyon medyumu (%20 DMSO, %20 EG ve 0,5 M Trehaloz) ile embriyonik kök hücreler dondurulmuş, eritme sonrası sırasıyla %53,9 ve %55,6 canlılık oranı elde edilmiştir. Eritilen koloniler toplam altı pasaj ilerletildikten sonra embriyonik kök hücre belirteci olan Oct-4 ve Nanog transkripisyon faktörlerini eksprese ettiği ve 40-XY kromozomal yapıya sahip olduğu gösterilmiştir. Antioksidan etkili Taurin maddesinin hücrelerin eritme sonrası canlılık oranları ve transkripsiyon faktörlerinin salgısı üzerine etkili olmadığı bulunmuştur. Sadece DMSO ve EG oranları yarıya düşürülerek (%10 DMSO, %10 EG ve 0,5 M Trehaloz) vitrifikasyon yapılan gruplarda ise, eritme sonrası sırasıyla %28,45 ve %34,55 canlılık oranına ulaşılmasına karşın hücreler ilk pasaj sonrası canlılığını kaybetmiştir.Sunulan çalışmada fare embriyonik kök hücreleri yüksek oranda kriyoprotektan (%20 DMSO, %20 EG) içeren medyum içerisinde, açık çekilmiş payet yöntemiyle dondurularak başarıyla saklanabilmiştir.

Özet (Çeviri)

Mouse embryonic stem cell lines; can be used in studies for therapeutic purposes, to form human disease model mice, to investigate the toxic effects of chemicals and intra cellular signal mechanisms. Mouse embryonic stem cells can be deteriorated during freezing or vitrification as a result of crystal formation and high toxicity of cryoprotectans. It is necessary to develop new freezing methods keeping the pluripotent structure and survival rate of cells. In our study it was aimed to develop a reliable and appliable freezing method to store mouse embryonic stem cell lines.Embryonic stem cells were frozen by using ?Open Pulled Straw? method in vitrification medium (20% DMSO, 20% EG and 0,5 M trehalose) with or without 50 mM taurin. Post-thaw vitality rate was 53,9% and 55,6%, respectively. Thawed colonies were passaged 6 times and Oct-4 and Nanog transcription factors were shown to express and have 40-XY chromosomal structure. Taurin had no effect on post-thaw survival rate and secretion of transcription factors of cells. Only by halving DMSO and EG amounts (10% DMSO, 10% EG and 0,5 M trehalose), 28,45% and 34,55% post-thaw survival rates were reached in vitrification groups respectively. However, cells lost their vitality after the first passage.In conclusion, mouse stem cells could be frozen and stored successfully in high cryoprotectant (20% DMSO, 20% EG) bearing medium by open pulled straw method.

Benzer Tezler

  1. Fare embriyonik kök hücrelerinin NWPF disklerde üretilmesi ve kültürasyonu

    Cultivation of mause embryonic stemn cells on NWPF discs

    GAYE ÇETİNKAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. MEHMET ALİ ONUR

  2. Investigation of NFİB function and regulation of its putative target genes in human neural stem cell and SH-SY5Y neuroblastoma cell lines

    İnsan sinir kök hücre ve SH-SY5Y nöroblastom hücre hatlarında NFIB işlevinin ve potansiyel hedef genlerinin regülasyonunun incelenmesi

    BETÜL ULUCA

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ASLI KUMBASAR

  3. Fare embriyonik kök hücrelerin kültürü, farklılaşması ve karakterizasyonu

    Cultivation, differentiation and characterization of mouse embryonic stem cells

    ARZU TAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Bilim ve TeknolojiKocaeli Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. SEZEN ARAT

    PROF.DR. HAKKI DALÇIK

  4. Fare embriyonik kök hücrelerinden kondrosit farklılaştırılması ve mezenkimal kök hücrelerden farklılaştırılan kondrositlerle karşılaştırılması

    Embriyonic stem cell differantation to chondrocytes and compare the chondrocytes were differantated from bone marrow stem cell

    GÜLŞAH KÜRKÇÜ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyomühendislikEge Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. H. SEDA VATANSEVER

    PROF. DR. S. İSMET DELİLOĞLU GÜRHAN

  5. Fare embriyonik kök hücrelerinin hücreler arası madde yoğunluğunun değiştirilerek farklılaştırılma süreçlerinin araştırılması

    Investigation of the differentiation course of mouse embryonic stem cell depending on the extracellular matrix concentration

    BERRİN ÖZDİL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Histoloji ve EmbriyolojiEge Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSEYİN AKTUĞ