Rasyonel ve evolusyoner enzim dizaynı yolu ile iki (ß?)8 ?barrel enziminin katalitik aktivitelerinin değiştirilmesi
Interconverting the catalytic activities of two (ß?)8 ?barrel enzymes by rational and evolutionary design
- Tez No: 256912
- Danışmanlar: PROF. DR. AZMİ TELEFONCU, PROF. DR. REİNHARD STERNER
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2009
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
TIM fıçı olarak da bilinen (ß?)8-fıçı, enzimlerin fonksiyon, stabilite ve evrimsel özelliklerinin anlaşılmasında mükemmel bir modeldir. Triptofan biyosentez yolundaki üç TIM fıçı, yapısal benzerlikleri ve korunmuş fosfat bağlanma bölgeleri nedeniyle ıraksak evrimle oluşmuş enzimlere en iyi örneklerdir. Yapısal benzerliklere dayanarak fosforibozil antranilat izomeraz (TrpF) ve bifonksiyonel triptofan sentaz ?-altbiriminin (TrpA) gen duplikasyonu ve farklılaşma sonucu ortak bir öncüden evrimleştikleri öne sürülmüştür.Bu çalışmada TrpA'ya TrpF aktivitesi kazandırılması için yönlendirilmiş evrim yaklaşımı kullanıldı. trpA geninde error-prone PCR veya DNA shuffling yöntemleri kullanılarak hazırlanan gen kütüphanelerinden in vivo komplementasyon yoluyla TrpF aktivitesine sahip varyantlar seçildi ve in vitro TrpF aktiviteleri belirlendi. TrpF'ye TrpA aktivitesi kazandırılması için rasyonel dizayn yoluyla belirlenen amino asit değişiklikleri gerçekleştirildi ve TrpF varyantının TrpA aktivitesi kazanıp kazanmadığı araştırıldı.
Özet (Çeviri)
The (ß?)8-barrel, which is also known as TIM barrel, is an excellent model to investigate the functional, stability, and the evolutionary properties of enzymes. Three TIM barrels in the tryptophan biosynthetic pathway are the clearest examples of divergently related enzymes because of the structural similarities and conserved phosphate binding sites. Based on the structural similarities, it has been postulated that phosphoribosylanthranilate isomerase and the ?-subunit of the bifunctional tryptophan synthase are descendants of a common ancestor from which they diverged by gene duplication and diversification.In this study, we used the directed evolution approach in order to establish TrpF activity on the protein scaffold of TrpA. In vivo complementation was used to select the variants with TrpF activity from the gene libraries, which were generated using error-prone PCR or DNA shuffling. In vitro TrpF activities of the variants were measured. For the establishment of TrpA activity on TrpF, the amino acid exchanges which were obtained from the rational design, were introduced. It was investigated whether TrpF variant gained TrpA activity.
Benzer Tezler
- Bazı rasyonel fark denklemlerinin periyodikliği, çözümleri ve kararlılığı üzerine bir çalışma
A study on periodicty and stability solutions of some rational difference equations
TANER KUMCU
- Rasyonel sayıların öğretimindeki hatalar ve alınması gereken tedbirler
Diagnosing the errors in teaching rational numbers and taking the required measures
RAMAZAN ÖZÇİFÇİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2007
Eğitim ve ÖğretimSelçuk Üniversitesiİlköğretim Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HACI SULAK
- İlköğretim 7. sınıf öğrencilerinin matematik dersi rasyonel sayılar konusu ile ilgili hata ve kavram yanılgılarının analizi
Analysis of mistakes and concept regarding the topic of rational numbers in mathematics lesson of the seventh class in the primary education
RAMAZAN ALKAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Eğitim ve ÖğretimGazi Üniversitesiİlköğretim Bölümü
YRD. DOÇ. DR. SEBAHAT YETİM
- Rasyonel sayılar ve rasyonel sayılarda işlemler konusunda ters-yüz sınıf uygulamasının etkileri
The effect of the flipped classroom practice on the rational numbers and operations with rational numbers
FİKRETCAN GÜÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Eğitim ve ÖğretimAmasya Üniversitesiİlköğretim Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEZİBAN ORBAY
- Ortaokul 7. sınıf rasyonel sayılar konusunun öğretiminde kavram haritası kullanımının öğrencilerin akademik başarısına ve tutumuna etkisi
The effect of concept map usage on the academic achievement and attitude of student's in teaching secondary school 7th grade rational numbers
SEVGİ KAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Eğitim ve ÖğretimFırat ÜniversitesiMatematik ve Fen Bilimleri Eğitimi Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ MUSTAFA AYDOĞDU