Tümör progresyonunun önlenmesi için prostat kanseri hücrelerinde, PKC? ve PKC?'nun CDME tarafından kontrolü
The regulation of PKC? and PKC? By CDME in prostate cancer cells for prevention of tumor progression
- Tez No: 266753
- Danışmanlar: PROF. DR. ASLI BAYKAL, PROF. DR. SURESH C. SIKKA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Prostat kanseri, PKC, sistin, CDME, apoptozis, Prostate cancer, PKC, cystine, CDME, apoptosis
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 111
Özet
Prostat kanserinin moleküler temeli, tümör baskılayıcı pro-apopototik bir protein olan PKC?'nın inaktivasyonu ile ve büyümeyi indükleyen onkojenik bir protein olan PKC?'nın aktivasyonu ile kuvvetle ilişkilidir. Çünkü kanserde bozulan oksidatif şartlar, sisteince zengin olan her iki PKC izozimini öncelikli olarak hedef alarak yapılarında değişikliğe neden olur. Tiyol antioksidanların disülfid formları, S-sisteinilasyon mekanizması aracılığıyla (PKC-S-S-Cys) PKC izozimleri ile ilişkiye girerek aktivitelerinde belirgin değişikliklere yol açar. Çalışmamızda, sistinin metabolik bir prekürsörü olan sistin dimetil estere (CDME) cevaben gelişen PKC? ve PKC? oksidatif regülasyonunun farklı prostat kanseri hücrelerinde incelenmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla, kontrol hücresi olan RWPE-1'de (nontümörijenik prostat epitelyum hücre dizisi) ve prostat kanser hücreleri olan LNCaP'de (androjen-bağımlı prostat kanseri hücre dizisi) ve PC3'de (androjen-bağımsız prostat kanseri hücre dizisi); ileri analizler için uygulanacak CDME dozunu seçmek amacıyla WST-8'in formaza indirgenmesi temeline dayanan hücre sitotoksisite deneyi, CDME muamelesini takiben hücre içi sistin düzeylerini ölçmek için radyoaktif sistin bağlayıcı protein (CBP) analizi, CDME-indüklü apoptozisi değerlendirmek için DNA fragmantasyonu ve Kalsein-AM deneyleri, PKC? ve PKC? enzim aktivitelerini tayin etmek için nonradyoaktif analiz ve protein ekspresyonlarını göstermek için ise western blot deneyleri yapıldı. Bulgularımız, doz artışına paralel olarak 0.5mM ve 5mM CDME'nin, önce hücre içi sistin düzeylerini takibinde de özellikle prostat kanseri hücrelerinin apoptozisini arttırdığını göstermiştir. CDME'nin bu etkisini ise PKC? aktivasyonu ve PKC? inaktivasyonu üzerinden gerçekleştirdiğini saptadık. Ayrıca, PKC? genine spesifik küçük interferans RNA (siRNA) ile yapılan analizler PC3 hücrelerinin ölümünün PKC?'ya bağımlı olduğunu ifade etmiştir. Kontrol hücreye kıyasla özellikle prostat kanseri hücrelerinde gözlemlediğimiz bu sonuçlar, CDME'nin prostat kanseri tedavisinde kullanılacak olası terapötik ajanlardan biri olabileceğini göstermektedir.
Özet (Çeviri)
The molecular basis of prostate cancer is strongly related with inactivation of pro-apoptotic, tumor-suppressive isozyme protein kinase C-? (PKC?) and activation of growth-stimulatory, oncogenic isozyme PKC?. Oxidative conditions altered in cancer lead to change the structure both of PKC isozymes containing cysteine rich residues. Disulfide forms of thiol antioxidants induce marked changes in PKC isozyme activity via S-cysteinylation (PKC-S-S-Cys), e.g. PKC? stimulation and PKC? inactivation. We aimed to investigate the oxidative regulatory responses of PKC? and PKC? to cystine dimethylester (CDME), a metabolic precursor of cystine, in various prostate cancer cells. For this purpose, cell cytotoxicity to select CDME doses for further assays by WST-8 assay based on the reduction of WST-8 to formazan, CDME-induced intracellular cystine levels by radioactive cystine binding protein (CBP) assay, apoptosis by DNA fragmentation and Calcein AM assays, the protein expressions of PKC? and PKC? by western blot, and both PKC enzyme activities by nonradioactive assay were performed in prostate cancer cells, LNCaP (androgen-dependent prostate cancer cell line) and PC3 (androgen-independent prostate cancer cell line), and RWPE-1 (nontumorigenic prostate epithelial cell line) used as control. Our findings showed that 0.5 mM and 5 mM CDME induced intracellular cystine levels and then apoptosis depending on enhanced concentration of CDME especially in prostate cancer cells. Additionally, we obtained that this effect of CDME arised from activation of PKC? and inactivation of PKC?. The inhibition of PKC? gene expression by specific small interfering RNA (siRNA) proved the cell death of PC3 depending on PKC?. These findings obtained in prostate cancer cells compared with control cell provide that CDME may be one of the potential therapeutic agents to use in prostate cancer therapy.
Benzer Tezler
- Arcti̇i̇n maddesi̇ni̇n deneysel peri̇odonti̇ti̇s modeli̇ üzeri̇ndeki̇ anti̇enflamatuvar etki̇nli̇ği̇ni̇n i̇ncelenmesi̇
Evaluation of anti inflammatory effect of arctiin on experimental periodontitis model
AHMET AYDOĞDU
Doktora
Türkçe
2014
Diş HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiPeriodontoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ELİF ESER SAKALLIOĞLU
- Testisin germ hücreli tümörlerinde LDH, LDH izoenzimleri, AFP ve HCG düzeyleri
Testisin germ hücreli tümörlerinde LDH, LDH izoenzimleri, AFP ve HCG düzeyleri
SERAP ÇUHADAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1999
BiyokimyaSağlık BakanlığıBiyokimya ve Klinik Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET HİCRİ KÖSEOĞLU
- İntratimpanik alfa lipoik asid uygulamasının cisplatin ototoksisitesine karşı koruyucu etkisinin otoakustik emisyon ölçüm yöntemiyle fonksiyonel olarak araştırılması (deneysel çalışma)
Assessment of protective effects of alpha-lipoic acid on cisplatin induced ototoxicity by using dpoae in guinea pigs.
YILMAZ ÖZKUL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2008
Kulak Burun ve BoğazSağlık BakanlığıKulak Burun Boğaz ve Baş-Boyun Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN KATILMIŞ
- Preterm, term ve üç aydan küçük bebeklerde serum nöron spesifik enolaz düzeylerinin belirlenmesi
Serum neuron-specific enolase levels in preterm and term newborns and infants 1-3 months of age
ASLIHAN ABBASOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıBaşkent ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FAİK SARIALİOĞLU