Glutatyon redüktaz enziminin hindi karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of glutathione reductase enzyme from Turkey liver
- Tez No: 269312
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 86
Özet
Glutatyon redüktaz (Glutatyon: NADP+, oksidoredüktaz, E.C 1.8.1.7.; GR) enzimi hindi karaciğerinden saflaştırıldı. Saflaştırma işlemi homojenatın hazırlanması ve 2',5'-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi olmak üzere 2 basamakta gerçekleştirildi. 606,67 EÜ/mg protein spesifik aktivitesine sahip olan GR enzimi %10,75 verimle, 2476 kat saflaştırıldı. Enzim aktivitesi spektrofotometrik olarak 340 nm'de Beutler metoduna göre ölçüldü. Enzimin mol kütlesi jel filtrasyon kromatografisi ile 131 kDa, alt biriminin mol kütlesi ise SDS-PAGE ile 65 kDa olarak bulundu. Enzim için optimum pH, optimum iyonik şiddet, optimum sıcaklık, stabil pH, sırasıyla 7,5, 100 mM, 8,5, 40ºC olarak bulundu. Ayrıca NADPH için KM değeri 0,170 mM ve Vmax değeri 0,55 EÜ/ml olarak; GSSG için ise, KM değeri 0,03 mM ve Vmax değeri 0,228 EÜ/ml olarak tespit edildi. Buna ilaveten hindi karaciğeri GR enzimi üzerine NADP+ ve GSH `ın inhibisyon etkileri incelendi. NADP+ ve GSH için Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla Ki sabitleri sırasıyla 0,37±0,055 ve 29,08±14,9 mM olarak bulundu.
Özet (Çeviri)
Glutathione reductase (Glutathione: NADP+ oxidoreductase, E.C 1.8.1.7; GR) was purified from turkey liver. The purification consisted of two steps, preparation of homogenate, and 2',5'-ADP Sepharose 4B afinity chromatography. GR enzyme was obtained having a specific activity of 606,67 EU/ml proteins, with a yield 10,75% and 2476,2 fold. Enzymatic activity was spectrofotometrically measured according to Beutler method at 340 nm. Molecular weight of enzyme was determined by gelfiltration chromatography as 131 kDa and molecular weight of subunits were determined by SDS-PAGE as 65 kDa. Optimal pH, optimal ionic intensity, stable pH, optimal temperature were determined as 7,5,100 mM, 8,5, 40°C respectively. Also KM and Vmax values were determined for NADPH as 0,170 mM and 0,55 EÜ/ml; and for GSSG substrates 0,03 mM and 0,228 EÜ/ml respectively. In addition, Ki values were determined by means of Lineweaver-Burk graphs obtained as 0,37±0,05 and 29,08±14,93 mM, NADP+ and GSH respectively.
Benzer Tezler
- Glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (Scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi
Purification of glutathione reductase enzyme from scorpion fish (Scorpaena porcus) liver tissue and investigation of some heavy metal inhibition kinetics
KÜBRA IŞIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyoteknolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERCAN SOYDAN
- Glutatyon redüktaz enziminin biberiye bitkisinden ekstraksiyonu ve karakterizasyonu
Extraction and characterization of glutathione reductase enzyme from rosemary plant
BÜŞRA TOSUN
- Purification and characterization of glutathione reductase from japanese quail (Coturnix coturnix Japonica) liver
Glutatyon redüktaz enziminin bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
SARKAT SALIM MOHAMMED TAHER MOHAMMED TAHER
- Glutatyon redüktaz enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması
Purification of human erythrocytes glutathione reductase, investigation effect of some drugs on this enzyme
MURAT ŞENTÜRK
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
KimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Glutatyon redüktaz enziminin koyun dalak dokusundan saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması
Purification, characterization of glutathion reductase enzyme from sheep splen tissue and investigation of the effects of some chemical substances on enzyme activity
ÇİĞDEM ÇOBAN
