Glutatyon redüktaz enziminin biberiye bitkisinden ekstraksiyonu ve karakterizasyonu
Extraction and characterization of glutathione reductase enzyme from rosemary plant
- Tez No: 611953
- Danışmanlar: DOÇ. DR. GÜLNUR ARABACI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sakarya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 84
Özet
Bu çalışmada, glutatyon redüktaz enzimi (Glutatyon: NADP+, oksidoredüktaz, E.C. 1.8.1.7: GR) biberiye (Rosmarinus officinalis L.) bitkisinden ekstra edilerek üçlü faz saflaştırma yönteminin optimize edilmesi ile %54,80 verimle 18 kat saflaştırılmıştır. Saflaştırılan biberiye GR enzimi molekül ağırlığı SDS-PAGE ile yaklaşık olarak 75 kDa tek band olarak görüntülenmiştir. Enzim karakterizasyon çalışmalarında optimum iyonik şiddet, sıcaklık, pH ve kinetik özelliği araştırılmıştır. Sonuçlar sırasıyla; 400 mM fosfat tamponu, 60°C, 7,5 ve NADPH substratı Km değeri 0,047 mM; Vmaks ise 0,0033 EÜ/mL bulunurken, GSSG subsratı Km değeri 0,029 mM; Vmaks ise 0,0019 EÜ/mL şeklinde bulunmuştur. Magnezyum, cıva, kobalt, demir, nikel, kurşun, baryum, mangan, alüminyum ve kalsiyum metallerinin enzim aktivitesi üzerine etkileri araştırılmıştır. Bu metallerden Mg2+, Mn2+ ve Al3+ metalleri enzim aktivitesinde artışa yol açarken, diğer çoğu metal ise inhibitör etki sergilemiştir. Depolanma kararlılığı sonucunda ise enzimin uzun vadede dayanıklı olmadığı gözlenmiştir. Buna ilaveten biberiye bitkisi GR enzimi üzerine GSH'ın inhibisyon etkisi incelenmiş ve GSH için Lineweaver-Burk grafiği yardımıyla Ki sabiti 38,03 mM olarak bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
In this study, glutathione reductase enzyme (Glutathione: NADP+, oxidoreductase, E.C 1.8.1.7: GR) was extracted from the rosemary (Rosmarinus officinalis L.) plant and purified 18 times in 54.80% yield by optimized triple phase purification method. The purified rosemary GR enzyme molecular weight was monitored by SDS-PAGE as a single band of approximately 75 kDa. In the enzyme characterization studies, optimum ionic strength, temperature, pH, and kinetic properties were investigated by using raw extracts. Results are as follows; 400 mM phosphate buffer, 60°C, 7.5, and Km value of NADPH was 0.047 mM; Vmax was found to be 0.0033 EU/mL while Km value of GSSG substrate was 0.029 mM; Vmax was found to be 0.0019 EU/mL. The effects of magnesium, mercury, cobalt, iron, nickel, lead, barium, manganese, aluminum and calcium metals on the enzyme activity were investigated. Among these metals, Mg+2, Mn+2 and Al+3 metals increased the enzyme activity, while the most other metals exhibited inhibitory effect. As a result of storage stability, it was observed that the enzyme was unstable in the long term. In addition, the inhibitory effect of GSH on the GR enzyme from rosemary plant was investigated and the Ki value of GSH was found to be 38.03 mM with the Lineweaver-Bruk graph.
Benzer Tezler
- Glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (Scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi
Purification of glutathione reductase enzyme from scorpion fish (Scorpaena porcus) liver tissue and investigation of some heavy metal inhibition kinetics
KÜBRA IŞIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyoteknolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERCAN SOYDAN
- Purification and characterization of glutathione reductase from japanese quail (Coturnix coturnix Japonica) liver
Glutatyon redüktaz enziminin bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
SARKAT SALIM MOHAMMED TAHER MOHAMMED TAHER
- Glutatyon redüktaz enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması
Purification of human erythrocytes glutathione reductase, investigation effect of some drugs on this enzyme
MURAT ŞENTÜRK
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
KimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Glutatyon redüktaz enziminin koyun dalak dokusundan saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması
Purification, characterization of glutathion reductase enzyme from sheep splen tissue and investigation of the effects of some chemical substances on enzyme activity
ÇİĞDEM ÇOBAN
- Glutatyon redüktaz enziminin sıçan böbreğinden saflaştırılması, substrat ve inhibitör kinetiğinin incelenmesi
Purification of glutathione reductase from rat kidney and investigation of substrate and inhibitor kinetics
BETÜL CAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
BiyokimyaHacettepe ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NAZMİ ÖZER
ÖĞR. GÖR. GÜLNİHAL KULAKSIZ ERKMEN