Geri Dön

Glutatyon redüktaz enziminin biberiye bitkisinden ekstraksiyonu ve karakterizasyonu

Extraction and characterization of glutathione reductase enzyme from rosemary plant

PDF İndir

  1. Tez No: 611953
  2. Yazar: BÜŞRA TOSUN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. GÜLNUR ARABACI
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sakarya Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 84

Özet

Bu çalışmada, glutatyon redüktaz enzimi (Glutatyon: NADP+, oksidoredüktaz, E.C. 1.8.1.7: GR) biberiye (Rosmarinus officinalis L.) bitkisinden ekstra edilerek üçlü faz saflaştırma yönteminin optimize edilmesi ile %54,80 verimle 18 kat saflaştırılmıştır. Saflaştırılan biberiye GR enzimi molekül ağırlığı SDS-PAGE ile yaklaşık olarak 75 kDa tek band olarak görüntülenmiştir. Enzim karakterizasyon çalışmalarında optimum iyonik şiddet, sıcaklık, pH ve kinetik özelliği araştırılmıştır. Sonuçlar sırasıyla; 400 mM fosfat tamponu, 60°C, 7,5 ve NADPH substratı Km değeri 0,047 mM; Vmaks ise 0,0033 EÜ/mL bulunurken, GSSG subsratı Km değeri 0,029 mM; Vmaks ise 0,0019 EÜ/mL şeklinde bulunmuştur. Magnezyum, cıva, kobalt, demir, nikel, kurşun, baryum, mangan, alüminyum ve kalsiyum metallerinin enzim aktivitesi üzerine etkileri araştırılmıştır. Bu metallerden Mg2+, Mn2+ ve Al3+ metalleri enzim aktivitesinde artışa yol açarken, diğer çoğu metal ise inhibitör etki sergilemiştir. Depolanma kararlılığı sonucunda ise enzimin uzun vadede dayanıklı olmadığı gözlenmiştir. Buna ilaveten biberiye bitkisi GR enzimi üzerine GSH'ın inhibisyon etkisi incelenmiş ve GSH için Lineweaver-Burk grafiği yardımıyla Ki sabiti 38,03 mM olarak bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

In this study, glutathione reductase enzyme (Glutathione: NADP+, oxidoreductase, E.C 1.8.1.7: GR) was extracted from the rosemary (Rosmarinus officinalis L.) plant and purified 18 times in 54.80% yield by optimized triple phase purification method. The purified rosemary GR enzyme molecular weight was monitored by SDS-PAGE as a single band of approximately 75 kDa. In the enzyme characterization studies, optimum ionic strength, temperature, pH, and kinetic properties were investigated by using raw extracts. Results are as follows; 400 mM phosphate buffer, 60°C, 7.5, and Km value of NADPH was 0.047 mM; Vmax was found to be 0.0033 EU/mL while Km value of GSSG substrate was 0.029 mM; Vmax was found to be 0.0019 EU/mL. The effects of magnesium, mercury, cobalt, iron, nickel, lead, barium, manganese, aluminum and calcium metals on the enzyme activity were investigated. Among these metals, Mg+2, Mn+2 and Al+3 metals increased the enzyme activity, while the most other metals exhibited inhibitory effect. As a result of storage stability, it was observed that the enzyme was unstable in the long term. In addition, the inhibitory effect of GSH on the GR enzyme from rosemary plant was investigated and the Ki value of GSH was found to be 38.03 mM with the Lineweaver-Bruk graph.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    790943

    Glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi glutatyon redüktaz enziminin iskorpit balığı (Scorpaena porcus) karaciğer dokusundan saflaştırılması ve bazı ağır metal inhibisyon kinetiklerinin incelenmesi

    Purification of glutathione reductase enzyme from scorpion fish (Scorpaena porcus) liver tissue and investigation of some heavy metal inhibition kinetics

    KÜBRA IŞIK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyoteknolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ERCAN SOYDAN

  2. Tez No

    453652

    Purification and characterization of glutathione reductase from japanese quail (Coturnix coturnix Japonica) liver

    Glutatyon redüktaz enziminin bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    SARKAT SALIM MOHAMMED TAHER MOHAMMED TAHER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    BiyokimyaBingöl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  3. Tez No

    181487

    Glutatyon redüktaz enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması

    Purification of human erythrocytes glutathione reductase, investigation effect of some drugs on this enzyme

    MURAT ŞENTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU

  4. Tez No

    714235

    Glutatyon redüktaz enziminin koyun dalak dokusundan saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması

    Purification, characterization of glutathion reductase enzyme from sheep splen tissue and investigation of the effects of some chemical substances on enzyme activity

    ÇİĞDEM ÇOBAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyokimyaBingöl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  5. Tez No

    248202

    Glutatyon redüktaz enziminin sıçan böbreğinden saflaştırılması, substrat ve inhibitör kinetiğinin incelenmesi

    Purification of glutathione reductase from rat kidney and investigation of substrate and inhibitor kinetics

    BETÜL CAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NAZMİ ÖZER

    ÖĞR. GÖR. GÜLNİHAL KULAKSIZ ERKMEN

Geri Dön