Geri Dön

Anoxybacillus sp. Pdf1 lipaz geninin klonlanması, ekspresyonu ve karakterizasyonu

Cloning, expression and characterisation of lipase from Anoxybacillus sp. Pdf1

PDF İndir

  1. Tez No: 270664
  2. Yazar: FULYA AY
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ALİ OSMAN BELDÜZ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 69

Özet

Lipazlar (triaçilgliserol hidrolazlar; EC.3.1.1.3) lipid-su arayüzeyinde trigliseritlerin hidrolizini katalizleyen enzimlerdir. Mikrobiyal lipazlar, deterjan, transesterifikasyon ve kiral bileşiklerin sentezlenmesi açısından endüstriyel açıdan oldukça ilgi çekmektedirler. Termofilik mikroorganizmaların lipazları sıcaklık ve kimyasal denatürasyona karşı dirençli olduklarından dolayı endüstiyel süreçlerde önemli rolleri vardır.Bu çalışma Anoxybacillus sp. PDF1 lipaz geninin klonlanmasını, gen ürününün izolasyonunu ve karakterizasyonunu konu almaktadır. PDF1 lipazını kodlayan 740 nt` lik genin baz dizilimi belirlenerek pET28a+ vektörüne klonlandı. Geni içeren vektör, E.coli BL21 hücresine aktarılarak lipaz ekspres edildi ve saflaştırıldı. Saflaştırılan lipazın maksimum aktivitesi 60ºC pH 8'de incelendi. p-nitrofenil butirat için olan 0,348 mM Km değeri ile diğer birçok lipaz enzimlerine göre daha düşük bir Km değerine sahip olduğu belirlendi. Mg+2, Li, Ca+2, K, Zn+2, ve Co+2 metal iyonlarının etkisi incelendi. PDF1 lipazının moleküler ağırlığı 28 kDa olarak tespit edildi. Elde edilen veriler ışığında, enzimin biyokimyasal özellikleri, enzimin önemli bir endüstriyel enzim olabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Lipases (triacylglycerol acylhydrolases; EC.3.1.1.3) catalyze the hydrolysis of triglycerides at the oil-water interface. Microbial lipases have currently received considerable attention with regard to biotechnological applications for detergents, transesterification and chiral compound synthesis. In particular, lipases from thermophiles are expected to play a significant role in industrial processes, since they are thermostable and resistant to chemical denaturation.This work describes the cloning, isolation, and characterization of lipase from Anoxybacillus sp. PDF1. A 740 nt lipase gene coding for lipase from Anoxybacillus sp. PDF1 sequenced and cloned into pET28a+ vector. Vector encoding this gene was transformed into E.coli BL21, expressed and purified. The purified lipase showed optimal activity at 60°C in pH 8. It was determined that the enzyme had a lower Km (0,348 mM) for paranitrophenylbutyrate than most of the lipases. Metal ion effects to lipase were observed with cloride salts of Mg+2, Li, Ca+2, K, Zn+2, ve Co+metal ions. The molecular mass of the lipase was determined to be 24 kDa on SDS-PAGE. In the light of all data it has been suggested that the enzyme?s biocatalytic properties proved to be one of the important industrial enzymes.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    299952

    Anoxybacillus sp. SO-B1 bakterisi ile modifiye edilmiş amberlit XAD-16 reçinesi kullanılarak Th(IV) ve Ce(III) iyonlarının katı faz ekstraksiyonu, zenginleştirilmesş ve ICP-OES ile tayini

    Solid phase extraction, enrichment and determination by ICP-OES of Th(IV) and Ce(III) ions using amberlite XAD-16 resing modified by Anoxybacilus sp. SO-B1 bacterium

    İSMAİL YENER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    KimyaDicle Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. RECEP ZİYADANOĞULLARI

  2. Tez No

    299993

    Anoxybacillus sp.SO-B1 bakterisi ile modifiye edilmiş amberlit XAD-16 reçinesi kullanılarak Pb(II)'nin biyosorpsiyonu, önderiştirilmesi ve AAS ile tayini

    Biosorption, preconsanration of Pb(II) using amberlite XAD-16 resin modified by Anoxybacillus sp.SO-B1 bacteria and its determination by AAS

    RUKEN ONAT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    KimyaDicle Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BERRİN ZİYADANOĞULLARI

  3. Tez No

    762281

    Anoxybacillus sp. HBB229'un lipaz üretimi üzerine kültür koşullarının etkisi

    The effect of culture conditions on lipase production byAnoxybacillus sp. HBB229

    GONCAGÜL ÖZGER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiAydın Adnan Menderes Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KUBİLAY METİN

  4. Tez No

    275398

    Termofilik Anoxybacillus sp. AH1'de ?-amilaz enzimi üzerine çalışmalar

    The studies of ?-amylase from thermophilic Anoxybacillus sp. AH1

    ÖMER ACER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyolojiDicle Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KEMAL GÜVEN

  5. Tez No

    485164

    Yeni türler oldukları öngörülen amilaz üreticisi termofilik Anoxybacillus izolatlarının fenotipik, kemotaksonomik ve moleküler taksonomik yaklaşımlar kullanılarak teşhisi

    Identification of thermophilic amylase producing Anoxybacillus isolates proposed as novel bacterial species by using phenotypic, chemotaxonomic and molecular taxonomic approaches

    EMİNE DEREBAY YILDIZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ARZU ÇÖLERİ CİHAN

Geri Dön