Epoksi grubu içeren polimerler kullanılarak ß- galaktosidaz enziminin immobilizasyonu
Immobilization of ß- galactosidase by using epoxy polymers
- Tez No: 291146
- Danışmanlar: DOÇ. DR. YEKTA GÖKSUNGUR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: ß- galaktosidaz, epoksi, immobilizasyon, cevap yüzey yöntemi, ß- galactosidase, epoxy, immobilization, respunce surface method
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 88
Özet
Bu tezde, epoksi grubu içeren farklı polimerler kullanılarak Kluyveromyces fragilis kökenli ticari ß- galaktosidaz enziminin immobilizasyonu araştırılmıştır. Ticari ß- galaktosidaz enzimi Lactozym, Sepabeads EC-HFA, Sepabeads EC-EP, Dilbeads ve Immobeads epoksi polimerleri üzerine immobilize edilmiş ve immobilizasyon etkinliğinin en yüksek olduğu Sepabeads EC-HFA polimeri çalışmanın geri kalan kısmında kullanılmıştır.Sepabeads EC-HFA polimeri kullanılarak yapılan immobilizasyon işleminde immobilizasyon etkinliğine, immobilizasyon süresi (24 ? 72 saat), immobilizasyon materyali miktarı ( 0.1 ? 2.5 g), tampon konsantrasyonu (0.025 ? 0.4 M) ve pH'nın (5 ? 8 ) etkileri incelenmiştir. En yüksek immobilizasyon etkinliği (%97), 24 saat, 0.6 g immobilizasyon materyali miktarı, 0.1 M tampon konsantrasyonu ve pH 6.5'da elde edilmiştir.İmmobilizasyon etkinliği üzerine etkili olan ve immobilizasyon işleminin optimizasyonunda kullanılmak üzere seçilen parametreler, immobilizasyon materyali miktarı, pH ve tampon konsantrasyonu olarak belirlenmiştir. Bu parametrelerin immobilizasyon işlemine olan etkilerini ve birbirileri arasındaki interaksiyon etkilerini incelemek için Cevap Yüzey Yöntemi kullanılmıştır.İmmobilizasyon işlemi üzerine immobilizasyon materyali miktarının negatif, pH ve tampon konsantrasyonunun ise pozitif doğrusal etkiye sahip olduğu görülmüştür. Belirlenen parametrelerin optimum seviyelerinde (0.87 g immobilizasyon materyali, pH 6.61, 0.13 M tampon konsantrasyonu, 24 saat) maksimum immobilizasyon etkinliği (%100) elde edilmiştir. Model denklemi ile hesaplanan immobilizasyon etkinliği ise % 99.8 olarak belirlenmiştir.İmmobilizasyon işleminin enzimin optimum pH ve sıcaklık noktalarını değiştirmediği belirlenmiştir. pH ve sıcaklık stabiliteleri incelendiğinde immobilize enzimin stabilitesinin serbest enzime kıyasla daha iyi olduğu sonucuna varılmıştır. Serbest enzimin kinetik sabitleri Km 1.273 mM ve Vmax 909.09 µmol/dk/mg protein, immobilize enzimin kinetik sabitleri Km 3.023 mM ve Vmax 57.47 µmol/dk/mg protein olarak hesaplanmıştır. Optimize edilen immobilize enzimin tekrar kullanılabilirliği incelenmiş, ve 10 kez önemli bir aktivite kaybı gözlenmeden tekrar kullanılmıştır.
Özet (Çeviri)
In this thesis, the immobilization of commercial ß- galactosidase of Kluyveromyces lactis on different epoxy polymers was investigated. Commercial ß- galactosidase Lactozym, immobilised on Sepabeads EC-HFA, Sepabeads EC-EP, Dilbeads and Immobeads epoxy polymers. The highest immobilisation efficiency was obtained with Sepabeads EC-HFA and this polymer was used in the rest of this study.The effects of, immobilization time (24-72 h), amount of support material (0.1 ? 2.5 g), buffer concentration (0.025 ? 0.4 M) and pH (5 ? 8) parameters on immobilization efficiency were investigated, during the immobilization process of ß- galactosidase on Sepabeads EC-HFA. The highest immobilization efficiency (%97) was obtained at 24 hour, 0.6 g support material, 0.1 M buffer concentration, pH 6.5.The effects of parameters (amount of support material, pH, buffer concentration) on immobilization process and the interactions between each parameter was investigated with Responce Surface Methodology.Amount of support material had a negative linear effect, pH and buffer concentration had a positive linear effect on the immobilization process. The maximum immobilization efficiency of % 100 was obtained at the optimum levels of immobilization parameters (0.87 gsupport material, pH 6.61, 0.13 M buffer concentration, 24 hour). The immobilization efficiency calculated by the model equation was % 99.8.It is found that optimum pH and temperature levels of immobilised enzyme did not change. pH and temperature stability of enzymes were examined and improved pH and temperature stability were found for immobilised enzyme. Kinetic constants of free and immobilised were found as, Km 1.273 mM, Vmax 909.09 µmol/dk/mg protein; Km 3.023 mM and Vmaz 57.47 µmol/dk/mg protein, respectively. Reusability of the optimised and immobilised enzyme was investigated, and immobilised enzyme used for 10 times without a necessary activity loss.
Benzer Tezler
- Amine reactive polymeric materials for patterned bioimmobilization and orthogonal functionalization
Desenli biyoimmobilizasyon ve ortogonal fonksiyonlandırma için amin reaktif polimerik malzemeler
NİSA DEMİRBİLEK
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyoteknolojiGebze Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ TUĞÇE NİHAL GEVREK CİVAN
- Synthesis and characterization of phosphine oxide and sulfone containing polyurethanes
Fosfin oksit ve sülfon içeren poliüretanların sentezi ve karakterizasyonu
BETÜL TÜREL
Doktora
İngilizce
2013
Polimer Bilim ve Teknolojisiİstanbul Teknik ÜniversitesiPolimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM ERSİN SERHATLI
- Polimerik ve oligomerik yapılı oksidasyon katalizörlerinin hazırlanması ve etkilerinin ölçülmesi
Preparation of the polymeric and oligomeric type oxidation catalyst and measurement of catalysis impact
NURCAN ŞİRİN
- Hydroxyl containing main-chain polymeric benzoxazines and their modifications
Hidroksil grubu içeren ana zincir polimerik benzoksazinler ve modifikasyonları
BETÜL HANBEYOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2013
Kimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YUSUF YAĞCI
- Novel polymeric materials via reactive polymers
Reaktif polimerlerden yeni polimerik malzemeler
NERGİZ CENGİZ
Doktora
İngilizce
2014
KimyaBoğaziçi ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AMİTAV SANYAL
DOÇ. DR. RANA SANYAL
