Geri Dön

Tümör nekroz faktör alfa ve trombosit nitrik oksit sentetaz izoenzimleri arasındaki ilişki: in vivo ve in vitro çalışma

The relationship between tumor necrosis factor-alpha and nitric oxide isoenzymes in platelets: in vivo and in vitro study

PDF İndir

  1. Tez No: 293579
  2. Yazar: ÖZGE ÇEVİK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. AZİZE ŞENER
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 174

Özet

İnflamasyon, çeşitli patolojik durumlarda trombotik ve hemostatik bozukluklara katkıda bulunan bir faktör olarak kabul edilmektedir. Bu çalışmada inflamatuar bir sitokin olan ve hücre regülasyonu, farklılaşması ve apoptotik süreçte önemli rol oynayan tümör nekroz faktör alfanın (TNF-?) trombosit NOS izoenzimleri ile arasındaki ilişki incelenmiş ve bu ilişkinin apoptoza etkisi araştırılmıştır. Çalışmada öncelikle trombositlerdeki TNF-? reseptörlerinin (TNF-R1 ve TNF-R2) düzeyi belirlenmiştir. Daha sonra çalışmanın in vitro bölümünde TNF-?'nın (100pg/ml) eNOS, iNOS, kaspaz-3 ve kaspaz-9 düzeylerine etkisi, enzim ve gen ekpresyonu düzeylerindeki değişiklikler flow sitometri, qRT-PCR ve Western Blot yöntemleri kullanılarak ölçülmüştür. Ayrıca TNF-?'nın trombositlerde P-selektin ekspresyonuna, cGMP, Ca+2, sitokrom-c ve tiyoredoksin redüktaz düzeylerine etkisi de belirlenmiştir. In vitro çalışmalarda TNF-? reseptör inhibitörü olarak WP9QY (1µM), iNOS inhibitörü olarak 1400W (50µM) ve uyarıcı ajan olarak ADP (5µM) kullanılmıştır. TNF-? düzeyleri yüksek iskemik inme hastalarında aynı parametreler ölçülerek sağlıklı kontrollerle karşılaştırılmıştır. In vivo ve in vitro trombosit protein ekpresyonlarındaki değişimler ESI-Q-TOF-LC/MS/MS ile analiz edilmiştir. Çalışmamızda trombositlerde TNF-R1 ve TNF-R2'lerinin varlığı gösterildi ve TNF-R1 düzeyinin daha fazla olduğu bulundu. In vivo bölümde inme hastalarında sağlıklı kişiler ile karşılaştırıldığında trombositlerde aktivasyon düzeylerinin anlamlı derecede arttığı görüldü. In vitro bölümde ADP varlığında TNF-?'nın trombositlerde eNOS salınımını azalttığı ve iNOS salınımını arttırdığı bulundu. TNF-?'nın apoptoz belirteçlerinde artışına neden olduğu protein ve gen düzeyinde gözlendi. Apoptoz göstergelerindeki artışın iNOS ile ilişkili olabileceği gözlendi. Proteomik analizlerde ile yüksek güvenilirlikte tanımlanan proteinlerin ekpresyonlarında değişim olduğu tespit edildi. Sonuç olarak TNF-? trombositler üzerindeki reseptörlerine bağlanmakta, bazı sinyal yolaklarını kullanarak iNOS aktivitesi üzerinde etki göstermekte ve trombosit apoptozunu artırmaktadır. Bu çalışma inflamasyona bağlı olarak bazı hastalıklarda gelişebilen trombositopeniye ışık tutabilir.

Özet (Çeviri)

Inflammation is considered to be a contributing factor in various pathological conditions, thrombotic and hemostatic disorders. In this study, tumor necrosis factor alpha (TNF-?), which is an inflammatory cytokine, and plays an important role in the process of cell regulation, differentiation, and apoptosis, is examined in terms of its relationship between platelet NOS isoenzymes, and investigated on the basis of its effects on apoptosis. The study primarily determines the level of TNF-? receptors (TNF-R1 ve TNF-R2) in platelets. Then, it measures the effects on the eNOS, iNOS, caspase-3, caspase-9 levels of TNF-? (100pg/ml), and the changes in the levels of protein and gene-expression in vitro study by applying flow cytometry, qRT-PCR and Western blotting methods. In addition, the effect of platelet P-selectin expression, cGMP, Ca +2, cytochrome-c and thioredoxin reductase levels of the TNF-? are determined. In vitro studies, as a TNF-? receptor inhibitor WP9QY (1?M), iNOS inhibitor 1400W (50?M) and stimulating agent ADP (5?M) are used. High levels of TNF-? in ischemic stroke patients are compared with healthier controls by measuring the same parameters. In vivo and in vitro changes in platelet protein expression are analyzed by ESI-Q-TOF-LC/MS/MS. In our study, TNF-R1 and TNF-R2 are shown in platelets and TNF-? have been found to be more. In vivo platelet activation levels in stroke patients are significantly increased compared to healthy individuals. In vitro, TNF-? reduces the release of eNOS and increases the release of iNOS in the presence of ADP in platelets. It is observed that TNF-? causes increasing markers of apoptosis both gene and protein level. Apoptosis indices are associated with the increase of iNOS. Proteomic analysis shows that changes in protein expression identified with high reliability. As a result, TNF-? binding to their receptors on platelets, using some of the signal pathways for the effect on the activity of iNOS increases platelet apoptosis. This study could shed light on some of the illnesses that can develop thrombocytopenia due to inflammation.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    267515

    Kemik iliği nakli yapılan pediatrik hastalarda nakil öncesi ve nakil sonrası serum Hepsidin, İnterlökin-6 ve Tümör Nekroz Faktör-Alfa düzeylerinin enfeksiyonla ilişkisinin belirlenmesi

    Definition of relationship between infection and, pre- and post-transplantation levels of serum Hepcidin, IL-6 and TNF-Alpha levels of pediatric patients subject to bone marrow transplantation

    MERAL AKBIYIK DİNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyokimyaMarmara Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. BAHAR GÖKER

  2. Tez No

    910433

    Deneysel egzersiz yaptırılan ratlarda apilarnilin kas hasarı ve egzersiz performansı üzerine etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of apilarnil on muscle damage and exercise performance in rats undergoing experimental exercise

    FATİH ÇAKAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Fizyoterapi ve RehabilitasyonBingöl Üniversitesi

    Arı ve Arı Ürünleri Anabilim Dalı

    DOÇ. DR. HALİL ŞİMŞEK

  3. Tez No

    838977

    Penil kavernöz kan, periferik venöz kan, peyronie plağı ve normal tunika albugenia dokularındaki antioksidan seviyelerinin karşılaştırılması ve peyronie plağı oluşumuna etkisinin araştırılması

    Comparison of antioxidant levels in penille cavernous blood, peripheral venous blood, peyronie plaque and normal tunica albugenia tissues and investigation of the effect on peyronie plaque formation

    SAİT AYGÜN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    ÜrolojiAnkara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi

    Üroloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMRAH OKULU

  4. Tez No

    773441

    Ankilozan spondilit hastalarının takibinde sistemik immün inflamasyon indeksinin kullanılabilirliği

    Availability of systemic immune inflammation index in the follow-up of patients with ankylosing spondylitis

    ABDURRAHMAN AYKUT

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    NefrolojiMersin Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KENAN TURGUTALP

  5. Tez No

    452966

    Romatoid artritli hastalarda serum omentin düzeyi ile hastalık aktivitesi arasındaki ilişki

    The relationship between serum omentin level and disease activity in rheumatoid arthtiritis patients

    SELÇUK YUSUF ŞENER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    RomatolojiKocaeli Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE ÇEFLE

Geri Dön