Geri Dön

Isolation, expression and characterization of an ?-L-arabinofuranosidase enzyme from thermophilic Geobacillus sp.

Thermophilic Geobacillus türünden ?-L-arabinofuranozidaz enziminin izole edilmesi, ifadelenmesi ve karakterize edilmesi

PDF İndir

  1. Tez No: 299175
  2. Yazar: HÜSEYİN İLGÜ
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. GÜLŞAH ŞANLI MOHAMED
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 63

Özet

Bu çalısmada, termofilik bir organizma olan Thermophilic Geobacillus türünden,moleküler klonlama teknikleri kullanılarak ?-L-arabinofuranozidaz (?-L-AbFase)enziminin izolasyonu ve sonrasında biyokimyasal yöntemlerle karakterizasyonuamaçlanmıstır.Karakterizasyon çalısmaları sırasında, enzimin pNP-?-L-arabinofuranozitsubstratına karsı en yüksek verimde çalıstığı optimum pH ve sıcaklığı değerleriniarastırdık. Buna ek olarak, çesitli metal iyonlarının, bazı özel kimyasallar ve yaygınkullanımı olan organik çözgenlerin enzim aktivitesi üzerine olan etkileri çalısıldı.Çalıstığımız enzimin ana olarak L-arabinoze içeren polisakkaritlerde ?-L-arabinofuranozilgruplarını parçalamasından dolayı pancar sekerinden elde edilmis olan arabinan susbtratolarak kullanılmıstır . Enzimimiz, 50?C sıcaklıkta genis bir pH aralığında; pH 3.0-10.0, veNa-asetat tamponu içinde iken 30 ile 90?C arasında aktivite göstermis olup, pNP-?-Larabinofuranozitsubstratına karsı optimum çalısma kosulları pH 5.0 ve 70?C olaraksaptanmıs, kinetik çalısmalar sonrasında enzimin bu substrata karsı Km ve Vmax değerlerisırasıyla 14.75 mM ve 1.6 Abs/dak/ml olarak, seker pancarından elde edilmis arabinanakarsı ise sırasıyla 1.35 mM ve 3.9 AAbs/dak/ml olarak hesaplanmıstır.

Özet (Çeviri)

In our study, we have aimed first to isolate an ?-L-arabinofuranosidase (ALAF)enzyme, 58.0 kDa, from a thermophilic organism; Thermophilic Geobacillus sp. by usingmolecular cloning techniques, then to characterize this enzyme via biochemical methods.Throughout the characterization studies, we have investigated the optimumconditions for the highest enzyme activity by means of pH and temperature by using pNP-?-L-arabinofuranoside as substrate. Also, effect of various metal ions, some specificchemicals and common organic solvents on enzyme activity was studied. Due to the factthat ?-L-arabinofuranosidases mainly hydrolyze ?-L-arabinofuranosyl residues of Larabinosecontaining polysaccharides, enzyme activity towards sugar beet arabinan wasalso studied. Our enzyme exhibited activity in a broad pH range between pH 3.0-10.0 at50?C and between 30-90?C in Na-acetate buffer pH 5.0. Optimum activity towards pNP-?-L-arabinofuranoside was obtained at pH 5.0 and at 70?C. Kinetic studies showed that ourenzyme has a Km value as 0.19 mM and Vmax as 18.6 AAbs/min/ml towards pNP-?-Larabinofuranosideand Km value as 0.1 mM and Vmax as 8.1 AAbs/min/ml towards sugarbeet arabinan.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    315552

    Anoxybacillus kestanbolensis ac26 sarı l-arabinoz izomeraz geninin klonlanması, ekspresyonu ve karakterizasyonu

    Cloning, expression and characteisation of l-arabinoseisomerase from anoxybacillus kestanbolensis ac26 sari

    NAZAN DALKIRAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SABRİYE ÇANAKÇI

  2. Tez No

    315382

    Cloning of The Laccase cDNAs from Pycnoporus sanguineus MUCL 38531, Expression in Pichia pastoris and Characterization of Recombinant Laccases

    Pycnoporus sanguineus?tan Lakkaz cDNA?larının Klonlanması, Pichia pastoris?te Ekspresyonu ve Rekombinant Lakkazların Karakterizasyonu

    GÜNSELİ KURT GÜR

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    İleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYTEN YAZGAN KARATAŞ

  3. Tez No

    394619

    Isolation and characterization of a novel tyrosinase enzyme from native bacterial straine, production of the enzyme by cloning, characterization of the recombinant enzyme and analysis of its biotechnological applications such as production of l-dopa and melanin

    Doğal bakteri suşlarından tirozinaz enzim izolasyonu, karakterizasyonu, üretici genin klonlanması, rekombinant enzimin karakterizasyonu ve l-dopa ve melanin üretimi gibi biyoteknolojide kullanılabilirliği

    EBRAHİM VALİPOUR

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyolojiÇukurova Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BURHAN ARIKAN

  4. Tez No

    507059

    Leishmania infantum aşı adayı LACK ve KMP-11 genlerinin moleküler karakterizasyonu, füzyon proteinin ekspresyonu ve antijenik yapısı

    Molecular characterization of leishmania infantum LACK and KMP-11 vaccine candidate genes, expression and antigenic structure of fusion protein

    SERKAN KARACA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    ParazitolojiErciyes Üniversitesi

    Tıbbi Parazitoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALPARSLAN YILDIRIM

  5. Tez No

    603527

    Recombinant production and characterization of serine protease enzyme from Virgibacillus sp. AGTR strain

    Virgibacillus sp. AGTR suşundan izole edilen serin proteaz enziminin rekombinant üretimi ve karakterizasyonu

    BEGÜM ÖZDEN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER

Geri Dön