İnsan karbonik anhidraz IX izoenziminin klonlanması, üretilmesi, antitümör ilaçların ve bazı kimyasalların enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Generation, cloning of human carbonic anhydrase IX isoenzyme and investigation of some chemicals and drugs anti-tumour effects on the enzyme activity
- Tez No: 322524
- Danışmanlar: PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU, YRD. DOÇ. DR. MURAT ŞENTÜRK
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Genetik, Biochemistry, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 159
Özet
Bu çalışmada CA IX izoenzimi, insan pankreas dokusundan rekombinant DNA teknolojisi kullanılarak Escherichia coli (BL21DE3) hücresinde üretildi. hCA IX izoenzimi Nikel- nitrilotriasetik asit afinite kromatografisi kullanılarak 290378 EUxmg-1 spesifik aktiviteyle; %85,96 verimle; 20,4 saflaştırma katsayısıyla saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflığını kontrol etmek ve molekül kütlesini tespit etmek amacıyla SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant elde edildi. hCA IX izoenziminin molekül kütlesi 50,47 kDa olarak belirlendi. Ayrıca saflaştırılan hCA IX izoenziminin karakterizasyonu yapılarak enzimin optimum iyonik şiddet, optimum pH, optimum sıcaklık, stabil pH, Km, Vmax ve kcat değerleri belirlendi. 25 adet antitümör ilacın ve 6 adet ağır metalin enzim aktivitesi üzerine etkisi esteraz aktivitesi metodu kullanılarak in vitro şartlarda araştırıldı. İnhibitör etkisi gösteren ilaç ve metallerin IC50 değerleri hesaplandı. Enzimi inhibe eden antitümör ilaçlar için ayrı ayrı Lineweaver-Burk grafikleri çizilerek Ki değerleri ile inhibisyon tipleri belirlendi.
Özet (Çeviri)
In this study, CA IX isoenzyme was produced from human pancreatic tissue by using recombinant DNA technology in Escherichia coli (BL21DE3) cell. hCA IX was purified with 290378 EU x mg-1 of specific activity, 85.96% of purification yield and 20.4 of purification folds by using Nickel-nitrilotriacetic acid affinity chromatography. To check the purity and determine the molecular mass of the purified enzyme SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was performed and a single band was observed. Molecular mass of hCA IX isoenzyme was determined as 50.47 kDa. In addition, for characterization of purified hCA IX isoenzyme optimum ionic strength, optimum pH, optimum temperature, stable pH, Km, Vmax and kcat values were determined. Effects of 6 heavy metals and 25 antitumor drugs on the enzyme activity were investigated in vitro conditions using esterase activity. IC50 values of drugs and metals showing the inhibitory effect were calculated. Inhibition types and Ki values for antitumor drugs, which inhibit the enzyme were determined by plotting separately Lineweaver-Burk plots.
Benzer Tezler
- Bazı proton transfer tuzları ve bakır komplekslerinin antitümör etkilerinin karbonik anhidraz IX ve XII izoenzimleri üzerinde incelenmesi
Investigation of antitumor effects of some proton transfer salts and copper complexes in terms of carbonic anhydrase IX and XII isoenzymes
EKREM TUNCA
- Yeni sekonder sülfonamidlerin sentezi ve in vitro karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine inhibisyon aktivitelerinin incelenmesi
Synthesis of novel secondary sulfonamides and their in vitro carbonic anhydrase isozymes inhibition effects
TANER GÖKÇEN
Doktora
Türkçe
2017
Biyokimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TURAN ÖZTÜRK
DOÇ. DR. AHMET C. GÖREN
- Bazı yeni sülfonamit türevlerinin sentezi, biyolojik aktivitelerinin incelenmesi ve kantitatif yapı–etki ilişkilerinin (QSAR) değerlendirilmesi
Synthesis of some new sulfonamide derivatives, investigation of biological activities and evaluation of quantitative structure–activity relationships (QSAR)
MUSTAFA DURGUN
- Studies on novel 4-thiazoline-containing benzenesulfonamide derivatives targeting the tumour-associated human carbonic anhydrase IX and XII enzymes for cancer therapy
Tümör-ilişkili insan karbonik anhidraz IX ve XII enzimlerini hedef alan antikanser etki gösterebilecek benzensülfonamid artığı taşıyan yeni 4-tiyazolin türevleri üzerinde çalışmalar
MUHAMMED TRAWALLY
Doktora
İngilizce
2023
Eczacılık ve Farmakolojiİstanbul ÜniversitesiFarmasötik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZLEN GÜZEL AKDEMİR
PROF. DR. ATİLLA AKDEMİR
- İnsan karbonik anhidraz hCA IX ve XII enzim inhibisyonu gösterebilecek 3-fenil-5-sülfamoil-1H-indol artığı taşıyan yeni moleküller üzerine çalışmalar
Investigation of novel 3-phenyl-5-sulfamoyl-1H-indole groups carrying novel compouds as potential inhibitors of human carbonic anhydrase hCA IX and XII
KÜBRA DEMİR YAZICI
Doktora
Türkçe
2023
Eczacılık ve Farmakolojiİstanbul ÜniversitesiFarmasötik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZLEN GÜZEL AKDEMİR
PROF. DR. ATİLLA AKDEMİR