Geri Dön

Nevşehir patatesinden (Solanum Tuberosum L.)polifenol oksidaz enziminin afinite kromatografisi ile saflaştırılarak kinetik ve elektroforetik özelliklerinin incelenmesi

Purification of polyphenol oxidase from Nevşehir potato (Solanum Tuberosum L.) by affinity chromatography and investigation of its kinetic and electrophoretic properties

  1. Tez No: 324764
  2. Yazar: KABİL ÖZCAN TOZAK
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. MAHMUT ERZENGİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2013
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Aksaray Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 85

Özet

Bu çalışmada ekonomik öneme sahip olan Nevşehir patatesinden (Solanum Tuberosum L.) PPO enzimi amonyum sülfat çöktürmesi ve diyaliz işlemlerini takiben uygulanan afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılarak karakterize edilmiştir. Kullanılan afinite jeli Sepharose-4B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit kimyasal yapısına sahiptir. Nevşehir patatesinden PPO enzimi % 15.16 verim ve 52.25 saflaştırma derecesi ile elde edilmiştir. Farklı substratlar için optimum pH ve sıcaklık taraması yapılmıştır. Saflaştırılan enzim L-tirozin ve p-kresol substratlarına karşı hiçbir aktivite göstermezken, katekol, gallik asit ve pirogallol substratlarına karşı oldukça yüksek bir akivite göstermiştir. Bu sonuçlar Nevşehir patatesi PPO enzminin monofenolaz (kresolaz) aktivitesinde yoksun olduğunu ve sadece difenolaz (katekolaz) aktivitesine sahip olduğunu göstermektedir. Optimum pH ve sıcaklık çalışmalarında en yüksek aktiviteyi pH 7 ve 20 0C ' de katekol substratı ile elde edilmiştir. Katekol substratı için KM ve Vmaxdeğerleri sırasıyla, 5 mM ve 5000 U/mLdak olarak bulunmuştur. Altı farklı inhibitör için IC50 ve Ki değerleri tespit edilmiştir. Askorbik asitin enzim üzerinde en güçlü inhibitör etkisi gösterdiği gözlenmiştir.

Özet (Çeviri)

In this work, polyphenol oxidase (PPO) enzyme, which has an economic value, was purified from Nevşehir potato (Solanum Tuberosum L.)with affinity chromatography following the ammonium sulphate precipitation and dialysis and then it was characterized. Utilized affinity gel has chemicallySepharose-4B-L-tirozin-p-aminobenzoic acid nature. PPO enzyme was obtained from Nevşehir potato with 15.16 % efficiency and 52.25 purification degree. Optimum pH and temperature studies were carried out for different substrates. Purified enzyme showed no activity against L-tyrosine and p-cresol, whereas it exhibited the maximum PPO activity against catechol, gallic acid, pyrogallol substrates. These results indicate that PPO enzyme in Nevşehir potato lacks in monophenolase (cresolase)activity and has only diphenolase (catecholase) activity. In optimum pH and temperature studies, catechol showed the maximum activity at pH 7.0 and 20 0C. KM and Vmax values for catechol substrate were determined as 5 mM and 5000 U/mLmin, respectively. IC50 and Ki values for six different inhibitors were determined. It was observed that ascorbic acid has the highest inhibition effect on the enzyme.

Benzer Tezler

  1. Mustafapaşa su yapıları

    Mustafapaşa water structures

    AKGÜL ÖZKAYA BÜYÜKPATIR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Sanat TarihiErciyes Üniversitesi

    Sanat Tarihi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KERİM TÜRKMEN

  2. Nevşehir'de Geç Dönem dini ve sosyal yapılar: Tanzimat'tan 1839 - Cumhuriyet'e 1923

    Late Period religious and social structures in Nevşehir: From Tanzimat Reform 1839 to the Republic 1923

    SERAP ERÇİN KOÇER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Sanat TarihiErciyes Üniversitesi

    Sanat Tarihi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. CELİL ARSLAN

  3. Türkiye Globularia l. cinsinde yer alan Globularia alypum O. Schwarz , Globularia orientalis L. ve Globularia trichosantha fisch & mey. ssp. trichosantha taksonlarının karyotip analizi

    The karyotype analysis of some Globularia l. (Globulariaceae) species Globularia alypum O. Schwarz , Globularia orientalis L. and Globularia trichosantha ssp. fisch & mey. trichosantha distributed in Turkey

    MUSTAFA UĞUR AVŞAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyolojiNevşehir Hacı Bektaş Veli Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GENÇAY AKGÜL

  4. Nevşehir ili tehlikeli atık potansiyelinin araştırılması

    Investigation of hazardous waste potential of Nevsehir

    FERAY YÜMÜN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Çevre MühendisliğiNevşehir Hacı Bektaş Veli Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. SEVAL ARAS

  5. 1-(2-piridilazo)-2-naftol(PAN) ile doyurulmuş manyetik karbon nanotüp üzerinde Pb(II) ve Cu(II) iyonlarının zenginleştirilmesi ve alevli AAS ile tayinleri

    Preconcentration of Pb(II) and Cu(II) ions on magnetic carbon nanotubes impregnated with 1-(2-pyridylazo)-2-naphthol(PAN) and determination with flame AAS

    DİLEK KAMAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    KimyaNevşehir Hacı Bektaş Veli Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ASLIHAN KARATEPE

    PROF. DR. MUSTAFA SOYLAK