Nevşehir patatesinden (Solanum Tuberosum L.)polifenol oksidaz enziminin afinite kromatografisi ile saflaştırılarak kinetik ve elektroforetik özelliklerinin incelenmesi
Purification of polyphenol oxidase from Nevşehir potato (Solanum Tuberosum L.) by affinity chromatography and investigation of its kinetic and electrophoretic properties
- Tez No: 324764
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. MAHMUT ERZENGİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Aksaray Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 85
Özet
Bu çalışmada ekonomik öneme sahip olan Nevşehir patatesinden (Solanum Tuberosum L.) PPO enzimi amonyum sülfat çöktürmesi ve diyaliz işlemlerini takiben uygulanan afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılarak karakterize edilmiştir. Kullanılan afinite jeli Sepharose-4B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit kimyasal yapısına sahiptir. Nevşehir patatesinden PPO enzimi % 15.16 verim ve 52.25 saflaştırma derecesi ile elde edilmiştir. Farklı substratlar için optimum pH ve sıcaklık taraması yapılmıştır. Saflaştırılan enzim L-tirozin ve p-kresol substratlarına karşı hiçbir aktivite göstermezken, katekol, gallik asit ve pirogallol substratlarına karşı oldukça yüksek bir akivite göstermiştir. Bu sonuçlar Nevşehir patatesi PPO enzminin monofenolaz (kresolaz) aktivitesinde yoksun olduğunu ve sadece difenolaz (katekolaz) aktivitesine sahip olduğunu göstermektedir. Optimum pH ve sıcaklık çalışmalarında en yüksek aktiviteyi pH 7 ve 20 0C ' de katekol substratı ile elde edilmiştir. Katekol substratı için KM ve Vmaxdeğerleri sırasıyla, 5 mM ve 5000 U/mLdak olarak bulunmuştur. Altı farklı inhibitör için IC50 ve Ki değerleri tespit edilmiştir. Askorbik asitin enzim üzerinde en güçlü inhibitör etkisi gösterdiği gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
In this work, polyphenol oxidase (PPO) enzyme, which has an economic value, was purified from Nevşehir potato (Solanum Tuberosum L.)with affinity chromatography following the ammonium sulphate precipitation and dialysis and then it was characterized. Utilized affinity gel has chemicallySepharose-4B-L-tirozin-p-aminobenzoic acid nature. PPO enzyme was obtained from Nevşehir potato with 15.16 % efficiency and 52.25 purification degree. Optimum pH and temperature studies were carried out for different substrates. Purified enzyme showed no activity against L-tyrosine and p-cresol, whereas it exhibited the maximum PPO activity against catechol, gallic acid, pyrogallol substrates. These results indicate that PPO enzyme in Nevşehir potato lacks in monophenolase (cresolase)activity and has only diphenolase (catecholase) activity. In optimum pH and temperature studies, catechol showed the maximum activity at pH 7.0 and 20 0C. KM and Vmax values for catechol substrate were determined as 5 mM and 5000 U/mLmin, respectively. IC50 and Ki values for six different inhibitors were determined. It was observed that ascorbic acid has the highest inhibition effect on the enzyme.
Benzer Tezler
- Mustafapaşa su yapıları
Mustafapaşa water structures
AKGÜL ÖZKAYA BÜYÜKPATIR
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Sanat TarihiErciyes ÜniversitesiSanat Tarihi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KERİM TÜRKMEN
- Nevşehir'de Geç Dönem dini ve sosyal yapılar: Tanzimat'tan 1839 - Cumhuriyet'e 1923
Late Period religious and social structures in Nevşehir: From Tanzimat Reform 1839 to the Republic 1923
SERAP ERÇİN KOÇER
- Türkiye Globularia l. cinsinde yer alan Globularia alypum O. Schwarz , Globularia orientalis L. ve Globularia trichosantha fisch & mey. ssp. trichosantha taksonlarının karyotip analizi
The karyotype analysis of some Globularia l. (Globulariaceae) species Globularia alypum O. Schwarz , Globularia orientalis L. and Globularia trichosantha ssp. fisch & mey. trichosantha distributed in Turkey
MUSTAFA UĞUR AVŞAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyolojiNevşehir Hacı Bektaş Veli ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GENÇAY AKGÜL
- Nevşehir ili tehlikeli atık potansiyelinin araştırılması
Investigation of hazardous waste potential of Nevsehir
FERAY YÜMÜN
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Çevre MühendisliğiNevşehir Hacı Bektaş Veli ÜniversitesiÇevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. SEVAL ARAS
- 1-(2-piridilazo)-2-naftol(PAN) ile doyurulmuş manyetik karbon nanotüp üzerinde Pb(II) ve Cu(II) iyonlarının zenginleştirilmesi ve alevli AAS ile tayinleri
Preconcentration of Pb(II) and Cu(II) ions on magnetic carbon nanotubes impregnated with 1-(2-pyridylazo)-2-naphthol(PAN) and determination with flame AAS
DİLEK KAMAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
KimyaNevşehir Hacı Bektaş Veli ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ASLIHAN KARATEPE
PROF. DR. MUSTAFA SOYLAK