Geri Dön

A privileged hunter: Role of NLRP7 in immune privilege

Ayrıcalıklı bir avcı: NLRP7'nin immün ayrıcalıktaki rolü

  1. Tez No: 325509
  2. Yazar: DUYGU DEMİRÖZ
  3. Danışmanlar: DOÇ. NESRİN ÖZÖREN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Moleküler Tıp, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 106

Özet

NOD-Benzeri-Alıcılar (NLR) üyeleri apoptoz ve enflamasyonu regüle eden sitoplazmik alıcılar ailesidir. NLRP7, PYRIN bölgesi içeren bir NLR üyesidir ve fonksiyonları henüz bilinmemektedir. NLRP7'nin testiküler seminomada onkogenik bir rol üstlendiği ve bazı kanser türlerinde fazlaca ifade edildiği yayınlanmış birkaç ma-kalede gösterilmiştir. İlginçtir ki, NLRP7 beyin, testis ve plasenta gibi immün ayrıcalıklı dokular ile bazı başka dokularda ifade edilmektedir. Bunun yanında, NLRP7 mutasyon-larının kadınlarda ölü doğum ve düşüklerle sonuçlanan tekrarlayan hidatidiform mollere sebep olduğu bir çok farklı çalışmada gösterilmiştir. Ayrıca, NLRP7'nin IL-1ß seviye-lerini azalttığı ise bir makalede gösterilmiştir. Bu sebeple grubumuzca NLRP7'nin im-mün-baskılayıcı bir rolü olabileceği düşünülmüştür. Bu projenin amacı, NLRP7'nin im-mün ayrıcalıktaki ve enflamasyondaki olası rollerini belirlemektir. İlk olarak NLRP7 cDNA'sı konfokal hücresel lokalizasyon analizi ve immune-çöktürmeyle partner analizi için birçok vektöre klonlanmıştır (FLAG-, HA-, MYC-NLRP7 ve RFP-NLRP7, EGFP-NLRP7). Böylece NLRP7'nin HEK293FT hücrelerinde aşırı ifade edildiği koşullarda immün-çöktürme yöntemiyle etkileşim partnerleri ve lüsiferaz testiyle NF-?B yolağına olan etkileri belirlenmiştir. Bunlara ek olarak NLRP7'nin immün ayrıcalıktaki rolünü araştırmak için ölüm alıcıları ve HLA molekülleri ifadeleri, NLRP7'nin seviyelerinin stabil olarak düşürüldüğü HEC-1-A hücre hatlarında, gerçek zamanlı-PZR ve akış sitometrisi ile ölçülmüştür. RFP veya EGFP-NLRP7'nin hücresel lokalizasyonunun kon-fokal analizi sonucuna NLRP7'nin mitokondri ile minör ko-lokalizasyonu gözlemlenirken Kaspaz-1 ve/veya ASC'la çok net bir ko-lokalizasyon görülmüştür. Sonuçta, grubumuzca NLRP7'nin ASC ve Kaspaz-1'e bağlanarak bir inflamazom oluşturduğu ve IL-1ß'yı olgunlaştırdığı ve ayrıca IL-1ß'nın ekspresyonunu da regüle ettiği bulunmuştur. Ayrıca NLRP7 ifadesinin düşürülmesi sonucu TRAIL-R3, TNF-R2 ve TWEAK ve de ayrıca HLA A, B, C seviyeleri düşerken, Fas ifadesi artmıştır.

Özet (Çeviri)

NOD-like receptors (NLRs) are a family of cytoplasmic receptors with members regulating apoptosis and inflammation. NLRP7 is a novel PYRIN domain containing NLR family member and its functions are still under investigation. NLRP7 is known to possess an oncogenic role in testicular seminomas and found to be overexpressed in cer-tain cancers. Interestingly, in addition to some other tissues, NLRP7 is expressed in brain, testis and placenta which are immune privilege sites in the body. Furthermore, mutations in NLRP7 can cause recurrent hydatidiform moles leading to stillbirths and abortions. One study suggested that NLRP7 down-regulates IL-1ß and hence it is thought that NLRP7 may have an immuno-suppressive function. The aim of this project is to clarify the possible role of NLRP7 in immune privilege and also in inflammation. As a first step to the project, NLRP7 cDNA was cloned into several tagged (FLAG-, HA-, pcDNA3-MYC, RFP and EGFP) mammalian expression vectors for confocal anal-ysis for cellular localization and for detection of its interaction partners by co-immunoprecipitation. The effect of NLRP7 overexpression on NF-?B signaling regula-tion was measured by performing luciferase assay in HEK293FT cells. In order to eluci-date, in order to elucidate the possible role of NLRP7 in immune privilege, shifts in death receptor and HLA expressions were measured using real-time PCR and FACS analysis, respectively, in stable NLRP7 knock-down HEC-1-A cell line. Confocal analy-sis of RFP or EGFP fused NLRP7 reveals that NLRP7 is a cytosolic protein with minor co-localization to mitochondria. Furthermore, confocal co-localization studies show clear overlap between NLRP7 and caspase-1 and/or ASC. We also found that NLRP7 forms an inflammasome that activates IL-1ß through binding to ASC and Caspase-1. NLRP7 appears likely to regulate IL-1ß expression. Finally, NLRP7 down-regulation decreases the expression of TRAIL-R3, TNF-R2 and TWEAK and also HLA A, B, C and increases Fas expression.

Benzer Tezler

  1. Oils, fats, and the rise of margarine in Turkey: A historical perspective

    Yağ ve Türkiye'de margarinin yükselişi: Tarihsel bir değerlendirme

    FEVZİCAN ABACIOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Sosyolojiİstanbul Bilgi Üniversitesi

    Kültürel İncelemeler Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÖZGE SAMANCI

  2. Buca'da nüfusun sosyo-ekonomik özellikleri ve eğitim üzerindeki etkileri

    Socio-economic features of population in Buca and its effects on education

    MERYEM KÖRHASAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Eğitim ve ÖğretimDokuz Eylül Üniversitesi

    Ortaöğretim Sosyal Alanlar Eğitimi Ana Bilim Dalı

    Y.DOÇ.DR. NEVZAT GÜMÜŞ

  3. Lübnan Ermenileri(1914-1939)

    Armenians of Lebanon 1914-1939

    HALİL ÖZŞAVLİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    TarihHacettepe Üniversitesi

    Tarih Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET SEYİTDANLIOĞLU

  4. Orta Anadolu erken neolitik topluluklarında insan ve bitki ilişkisi: Aşıklı Höyük'te bitki tüketimi ve tarım

    People and plant interaction in central anatolian early neolithic communities: Plant consumption and agriculture at Aşikli Höyük

    MÜGE ERGUN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Arkeolojiİstanbul Üniversitesi

    Arkeoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MİHRİBAN ÖZBAŞARAN

  5. İlköğretim müzik derslerinde blok flüt eğitiminin yeri

    Başlık çevirisi yok

    SALİME AKBABA TAKMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Eğitim ve Öğretimİstanbul Teknik Üniversitesi

    YRD. DOÇ. DR. NURLU EROL