Analysis of lysosomal neu4 sialidase associated proteins by using mass spectrometry (MS/MS)
Lizozomal neu4 sialidazın etkileşime girdiği proteinlerin kütle spektrometrisi (MS/MS) ile analizi
- Tez No: 325715
- Danışmanlar: DOÇ. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 51
Özet
Sialidazlar glikoproteinlerden, oligosakkaritlerden, ve glikolipitlerden sialik asit gruplarını uzaklaştıran glikohidrolazlardır. Memelilerde 4 adet sialidaz karakterize edilmiştir. Bunlar Neu1 (lizozomal), Neu2 (sitoplazmik), Neu3 (hücre membranı), Neu4 (mitokondriyel/lizozomal) sialidazdır. Sialidazlar birçok metabolik yolakta ve hücresel işleyişlerde rol almaktadır. Sialidazlar başka proteinlerle ilişki kurabilir ya da multiprotein kompleksleri oluşturarak beraber çalışabilir. Örnek olarak, Neu1 hücrede betagalaktosidaz ve katepsin A enzimi ile beraber lizozomda aktiftir. Diğer Neu2, Neu3 ve Neu4 sialidaz enzimlerinin proteinlerle ilişkileri tam olarak tanımlanamamıştır.Çalışmamızda lizozomal Neu4 enziminin ve yanında Neu1 enziminin ilişkili olduğu proteinleri kütle spektrometrisi ile belirleme ve sialidazların yeni rollerini bulmak amaçlandı. Proteinimizin cDNA'sı kalmodulin bağlanma bölgesi ve streptavidin bağlanma bölgesi ile işaretlendi. Anlatım vektörü memeli hücrelerine transfeksiyon yapıldıktan sonra sıralı afinite saflaştırması ile proteinler saflaştırıldı. Sonuç olarak çalışmamızda sialidaz Neu4 ve Neu1 ile ilişkili olan proteinleri, MS/MS vebiyoinformatik analizleri kullanarak tanımladık
Özet (Çeviri)
Sialidases are glycohydrolytic enzymes which remove sialic acid residues from glycoproteins, oligosaccharides and glycolipids. There are 4 different sialidases known in mammalians. These are Neu1 (lysosomal), Neu2 (cytoplasmic), Neu3 (cell membrane) and Neu4 (lysosomal/mitochondrial) sialidase. Sialidases are involved in many metabolic and cellular processes interactioning with another proteins or work together in multiprotein complexes. For example, Neu1 is only active with betagalactosidase and cathepsin A enzyme in lysosome. Interactions of sialidases Neu2,Neu3 and Neu4 enzyme with other proteins remain unknown In our study, we aimed to identify proteins which have interaction with sialidase Neu4 as well as Neu1 by using mass spectrometry analysis to find new possible roles of sialidases. Our bait protein's cDNA was tagged with calmodulin binding protein as well as streptavidin binding protein. After transfection and expression of vectors tomammalian cells, proteins were purified using tandem affinity purification (TAP). We identified some associated proteins with sialidase Neu1 and Neu4 by using MS/MS analysis and bioinformatics.
Benzer Tezler
- Identification of cytosolic sialidase neu2 associated proteins by mass spectrometric analysis
Kütle spektrometresi analizi ile sitozolik sialidaz neu2 ile ilişkili proteinlerin tanımlanması
SEÇİL AKYILDIZ DEMİR
Yüksek Lisans
İngilizce
2013
Moleküler Tıpİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- Molecular analysis of mammalian NEU4 sialidase gene promoter
Memeli NEU4 sialidaz gen promotörünün moleküler analizi
MURAT DELMAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
Biyolojiİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TALAT YALÇIN
DOÇ. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- Brain lipid profiling of triply mouse model with the deficiencies of sialidase Neu1, Neu4 and ß-Hexosaminidase a enzymes
Sialidaz Neu1 ve Neu4 ile ß-Hekzosaminidaz a enzim eksikliği olan fare modelinde beyin lipid profilinin çikarilmasi
ZEHRA KEVSER PEKMEZCİ
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- Immunohistochemical, biochemical and imaging-mass spectrometric analysis of brain tissues of mice with combined deficiencies of β-hexosaminidase A, sialidase NEU4 and GM2-AP
Β-hekzosaminidaz A, sialidaz NEU4 ve GM2-AP birleşik eksikliği bulunan fare beyin dokularının immünohistokimyasal, biyokimyasal ve görüntülü-kütle spektrometrik analizi
ZEHRA KEVSER TİMUR
Doktora
İngilizce
2017
Biyokimyaİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- İdrarda total glikozaminoglikan semi-kantitatif ölçümü için hızlı test yöntemi geliştirilmesi
Development of rapid test method for semi-quantitative measurement of total glycosaminoglycan in urine
ÖZNUR ÇOPUR
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyokimyaEge ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ESER YILDIRIM SÖZMEN