Geri Dön

Characterization of connexin 26 mutations causing hereditary skin disorders

Kalıtsal deri hastalıklarına sebep olan konneksin 26 mutasyonlarının karakterizasyonu

  1. Tez No: 342927
  2. Yazar: VEYSEL BAY
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. GÜLİSTAN MEŞE ÖZÇİVİCİ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Genetik, Biology, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2013
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 51

Özet

Konneksinler komşu hücreler arası iletişim kanalları olan oluklu bağlantıların yapı taşlarıdır. İnsan vücudunda 21 çeşit konneksin bulunmaktadır ve bunlar insane fizyolojisi için önemlidir. Bu yüzden bu genlerin eksikliğinde veya mutasyonlu durumlarda hastalıklar ortaya çıkabilir. Örneğin, Cx26 genindeki mutasyonların genellikle kalıtsal duyu kaybına neden olduğu belirlenmiştir. Ama bazı Cx26 mutasyonları deri hastalıklarına da yol açmaktadır. Bunlardan biri ırsi ve nadir bir deri hastalığı olan Keratit-İktiyozis-Sağırlık (KID) sendromudur. Bu çalışmada, amacımız KID sendromuyla ilgili olan mutasyonların etkilerini iletişim eksiği olan iki çeşit hücre hattı; fare nöroblastoma (N2A), insan servikal karsinoma (HeLa), ve insan keratinosit hücreleri (HaCaT) kullanarak araştırmaktır. Bunun için KID sendromunda yeni tespit edilen Cx26 geni üzerindeki A88V, D50A, D50Y, ve I30N mutasyonları kullanıldı. N2A hücrelerindeki çalışmalarda mutasyonlu durumlarda Cx26 mRNA miktarlarının normale gore daha fazla; buna karşın mutant protein miktarlarının normale göre daha az olduğu gözlemlendi. HeLa hücrelerinde yapılan immunohistokimyasal çalışmalarda, mutant proteinlerin genellikle sitoplazmada lokalize olduğu gözlendi. Floresan boyalarla yapılan boya alım deneylerinde, boya alımının mutasyonlu yarımkanalların normal kanallardan istatistiksel olarak yüksek oldukları gözlemlendi. HaCaT hücreleriyle yapılan deneylerde mutasyonlu Cx26 proteinlerinin suprabasal epidermal hücrelerin markörlerinden biri olan Keratin 10 geninin ifade miktarını değiştirmediği gözlemlendi. Sonuç olarak, A88V, D50A, D50Y ve I30N mutasyonlarının KID sendromunda görülen analiz edilmiş diğer mutasyonlar gibi artan yarımkanal aktivitesine yol açtığı belirlendi. Bu da yarımkanal aktivitesindeki artışın KID sendromuna yol açan mutasyon mekanizmalarından biri olduğunu gösterdi.

Özet (Çeviri)

Connexins (Cx) are building blocks of gap junctions that provide intercellular communication between adjacent cells. There exist 21 types of connexins in human body which are important for human physiology. Hence, in any case of deficiency or mutation, disorders can occur. For instance, most of the characterized Cx26 mutations are related to deafness; while there are few mutations associated with different skin disorders. One of them is a rare congenital skin disorder; Keratitis-Ichthyosis-Deafness (KID) syndrome. In this study, we aimed to investigate the effects of Cx26 mutations associated with KID syndrome in two gap junctional communication-deficient cell lines; mouse neuroblastoma (N2A) and human cervix carcinoma (HeLa), and also in human keratinocytes (HaCaT). For this purpose, newly identified KID syndrome mutations, A88V, D50A, D50Y, and I30N were characterized. Studies on N2A cells demonstrated that Cx26 mRNA levels of mutants were higher than Cx26 WT, whereas their protein expression were very low compared to Cx26 WT. Moreover, in HeLa cells, mutant proteins were observed to be localized mainly in the cytoplasm. Furthermore, the uptake of fluorescent dyes into the cells through the mutant hemichannels was statistically higher than Cx26 WT hemichannels. For HaCaT cells, mutant proteins did not have any effect on Keratin 10 expression, a marker for suprabasal layers of epidermis. In conclusion, all four mutations caused increased hemichannel activity similar to other analyzed KID syndrome mutations, which provides a further support for the presence of increased hemichannel activity as a mechanism for mutations leading to KID syndrome.

Benzer Tezler

  1. Generation and characterization of three dimensional organotypic KID syndrome skin model

    Üç boyutlu organotipik KID sendromu deri modeli oluşturulması ve karakterizasyonu

    ÖZGÜR ÖZTÜRK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Biyolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. GÜLİSTAN MEŞE ÖZÇİVİCİ

  2. Application of human mesenchymal stem cells to 3D silk fibroin scaffolds for cardiac tissue engineering

    İnsan mezenkimal kök hücrelerinin 3B ipek fibroin yapı iskelelerine uygulanarak kardiyak doku mühendisliğinde kullanılması

    GİZEM MERVE ŞAHİN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Biyomühendislikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATMA NEŞE KÖK

    DR. YÜKSEL ÇETİN

  3. Vankomisin içeren Poli(D,L-laktik-ko-glikolik asit) implantların karakterizasyonu ve in vitro-in vivo salım davranışlarının incelenmesi

    Characterization of vancomycin containing poly(d,l-lactide-co-glycolide) implants and investigation of their in vitro-in vivo release behaviour

    YILDIZ ÖZALP

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NURTEN ÖZDEMİR

  4. Characterization of arylamine N-acetyltransferase in tissues from human breast cancer

    İnsan kanserli meme dokusunda arilamin N-asetiltransferaz enziminin karakterizasyonu

    YAŞASIN SENEM GEYLAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1999

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. TÜLİN GÜRAY

  5. Characterization of Aspergillus oryzae transformed with a plasmid carrying alfa-amylase gene

    (Alfa)-amilaz geni taşıyan bir plazmid ile transforme edilmiş aspergillus aryzae'nin karakterizasyonu

    GÖKHAN TOLUN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1999

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. UFUK GÜNDÜZ