Transgenik embryo üretimi için koç spermatozoonlarının farklı yöntemlerle transfekte edilmesi
Transfection of ram spermatozoa using different techniques for generating transgenic embryos
- Tez No: 347610
- Danışmanlar: PROF. DR. SERHAT PABUCCUOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Genetik, Veteriner Hekimliği, Biotechnology, Genetics, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 93
Özet
Transgenik çiftlik hayvanlarının üretim amaçları kısaca genetik kodların yorumlanması, fizyolojik sistemlerin genetik kontrol çalışmaları, insan hastalık modellerinin oluşturulması, ksenotransplantasyon çalışmaları, hayvanlardan rekombinant proteinlerin eldesi, hayvan üretim özelliklerinin iyileştirilmesi, yeni hayvansal ürünlerin eldesi ve hastalıklara karşı dirençli hayvanların üretilmesi olarak sayılmaktadır. Çalışmanın amacı, koyunlarda spermatozoa aracılığı ile transgenik hayvan üretimi için tercih edilen yöntemlerden en uygununu belirlemek ve bu yöntemle transgenik embriyo elde etmektir. Bu amaçla çalışmada elektroporasyon, soğutma, Triton X-100 ile membran hasarı, LipofectaminTM kullanımı ve bu yöntemlerin dışında koç spermatozoası ile transgenik hayvan üretiminde kullanımına literatür taramalarında rastlanılmamış olan bazı maddeler transfeksiyon amacıyla kullanılmış ve belirli bir ölçüde transfeksiyon sağlanmıştır. Turbofect?, LDH ve Poli-ß-aminoesterler gibi taşıt maddeler ile yapılan ön denemelere göre bazı modifikasyonlar yapılıp DNA yüklenmiş spermatozoa kullanılarak ICSI yöntemi ile oositlerin fertilizasyonu gerçekleştirilmiştir. Embriyolardaki transgenik kontroller, marker gen olan GFP geni kullanılmasından dolayı floresan ataçmanlı invert mikroskopta yeşil ışıma gösterme durumlarına göre gerçekleştirilmiştir. Çalışmada elde edilen embriyoların transgeniklik ve transgenik etkinlik açısından gruplar arasında bulunan farklar incelendiğinde 2 numaralı elektroporasyon grubunun diğer gruplardan istatistiksel açıdan önemli (p0,05) rağmen bölünen embriyolar üzerinden yüzde orana bakıldığında daha yüksek bulunduğu, transgenik etkinlik açısından 8. grup hariç diğer gruplardan anlamlı bir fark (p
Özet (Çeviri)
The purposes of generating transgenic farm animals are interpreting genetic codes, genetical control of physiological systems, forming human disease models, xenotransplantation, producing recombinant proteins from animals, bettering animal generating properties, getting new animal products and generating resistent animals to diseases. The aim of the study is to determine the most suitable technique for generating transgenic animal with spermatozoa and acquiring transgenic embryos with this technique in sheeps. Transfection is attempted with electroporation, cooling, membrane defect with Triton X-100, lipofectamine usage, the substances that are not reported in literatures for generating transgenic animals with ram spermatozoa. A particular degree of transfection is managed when transport materials like Turbofect?, LDH ve Poli-ß-aminoesters are used. According to preattempts some modification is made and using DNA loaded spermatozoa oocyte fertilization is carried out with ICSI technique. The controls of transgenic embryos are achieved according to the green luminescence status under fluorescent attached invert microscobe because of using the GFP marker gene. When the differences between the groups are examined with respect to being transgenic and transgenic efficiency of the embryos, electroporation group 2 is statistically quite better (p0,05), but the percent of the dividing embryos are more than the other groups.
Benzer Tezler
- Development of salt resistant transgenic plants by using TaNHX1 and TaSTR genes
TaNHX1 ve TaSTR genleri kullanarak tuza dirençli bitkilerin geliştirilmesi
MUSA KAVAS
Doktora
İngilizce
2011
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Bölümü
PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM
PROF. DR. MERAL YÜCEL
- Transgenik tavşan embriyosu üretiminde ıcsı, intrasitoplazmik enjeksiyon ve pronüklear enjeksiyon yöntemlerinin karşılaştırılması
Comparing icsi, intracytoplasmic injection and pronuclear injection methods for production of transgenic rabbit embryos
AYŞE CAN
Doktora
Türkçe
2016
Biyoteknolojiİstanbul ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEMA BİRLER
- GNA ve CRY1AC genlerinin böceklere dayanıklılık için pamuk bitkisine aktarılması
Transformation of cotton with GNA and CRY1AC genes for insect-resistance
SABER DELPASAND KHABBAZI
Doktora
Türkçe
2017
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiTarla Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK BAŞALMA
- Türkiye'de bazı önemli çeltik çeşitlerinde herbisitlere karşı dirençlilik gen aktarımı çalışmaları
Genetic transformation studies with herbicide resistant genes on some important Turkish rice cultivars
MAHSA POURALI KAHRIZ
Doktora
Türkçe
2016
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiTarla Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KHALID M.KHAWAR BHATTI
- Fertilizasyon sonrası farklı zamanlarda yapılan gen enjeksiyonlarının transgenik koyun embriyosu üretimine etkisi
Effect of gene injection at different timing after fertilization on transgenic sheep embryo production
NUR ERSOY
Doktora
Türkçe
2022
Biyoteknolojiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MİTHAT EVECEN