Geri Dön

Pseudomanas aeruginosa ses-938-1 elastase : Isolation microbiological and biochemical characterizations

Pseudomanas aeruginosa ses 938-1 elastaz : izolasyonu mikrobiyolojik ve biyokimyasal karekterizasyonu

  1. Tez No: 35757
  2. Yazar: M.EZGİ ERGİN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. SEMRA KOCABIYIK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Bilim ve Teknoloji, Biyokimya, Science and Technology, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 1994
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 121

Özet

oz PSEUDOMONAS AERUGINOSA SES - 938 - 1 ELASTAZ İZOLASYONU, MİKROBİYOLOJİK VE BİYOKİMYASAL KARAKTERİZASYONU ERGİN, Ezgi Yüksek Lisans Tezi, Biyoteknoloji Anabilim Dalı Tez Yöneticisi : Doç.Dr. Semra Kocabıyık Nisan, 1994,104 sayfa Elastaz P. aeruginosa tarafından üretilen birçok hücre dışı hastalık yapıcı faktörler arasında patojeniteden en çok sorumlu tutulanıdır. Pseudomonas elastazının ayrıca, bir dipeptit tatlandırıcı olan aspartamın sentezinde de etkin olabileceği bulunmuştur. Çok çeşitli kaynaklardan izole edilen P. aeruginosa suşlarının çoğu elastaz aktivitesine sahiptirler. Bu çalışmada, elastaz üretimi ile enzimin bazı biyokimyasal özellikleri incelenmiştir. Deneylerde, 28 P. aeruginosa susu arasında en yüksek elastaz aktivitesine sahip olan P. aeruginosa SES - 938 - 1 susu kullanılmıştır. Enzim çalışmalarında kullanılan elastaz preparasyonu, filtre edilmiş kültür süpernatantının, amonyum sülfat çöktürmesinden sonra bir“Centricon”ultrafiltrasyon aparatı kullanılarak tuzlardan arındırılması ve konsantre edilmesi sureti ile hazırlanmıştır. Aktiviteler, 36°C sıcaklıkta 100 mM TrisHCI, 10 mM CaCİ2 pH 7.5 tampon çözeltisinde ve substrat olarak N- succinyl-L-(ala)3-p-nitroanilid ' in varlığında ve 410 nm ' de absorbans okunarak ölçülmüştür.Elastaz aktivitesi 0.067 - 0.540 mM ' lık substrat konsantrasyonunda Michaelis - Menten Kinetiğine uymakta olup, görünür Km değeri 0.379 mM olarak bulunmuştur. Yüksek substrat konsantrasyonlarında ( > 0.500 mM ) inhibasyon görülmüştür. Optimum aktivite, 36°C sıcaklıkta ve pH 7.5 iken gözlenmiştir. Elastaz aktivitesi, EDTA ve EGTA gibi metal bağlayıcı ajanlar ve yüksek konsantrasyonlarda bazı metaller ( Mn2+, Ni2+, Zn2+ ) tarafından inhibe edilmiştir. Enzim, 36°C sıcaklıkta 90 dakika süre ile inkübe edildiğinde total aktivitesinin %90 ' ına sahip iken, 56°C sıcaklıkta 15 dakika inkübasyondan sonra hiçbir aktivite görülmemiştir. Elde edilen bu sonuçlara göre, P. aeruginosa SES - 938 - 1 elastazı bir nötral metalo - proteazdır. Anahtar Kelimeler : Elastaz, Pseudomonas aeruginosa, nötral metalo - proteaz, antibiyotik dirençliliği. Bilim Dalı Sayısal Kodu : 401. 01. 04. vı

Özet (Çeviri)

ABSTRACT PSEUDOMONAS AERUGINOSA SES - 938 - 1 ELASTASE : ISOLATION, MICROBIOLOGICAL AND BIOCHEMICAL CHARACTERIZATIONS ERGİN,Ezgi M. S. in Biotechnology Supervisor : Assoc. Prof.Dr. Semra Kocabıyık April, 1994, 104 pages Among the numerous extracellular virulance factors produced by Pseudomonas aeruginosa, elastase is the one most often associated with pathogenesis. Pseudomonas elastase was also found to be efficient in synthesis of dipeptide sweetener, aspartame. Elastase activity is displayed by the majority of P. aeruginosa isolates from various sources. In this study, we have investigated characteristics of elastase production and some biochemical properties of the enzyme. In the experiments, Pseudomonas aeruginosa SES- 938-1 was employed which was shown to have the highest elastase activity of 28 P. aeruginosa strains examined. Crude elastase was prepared from filtered culture supernatant via salting out by ammonium sulphate, then desalting and concentrating the enzyme sample using a centricon microconcentrator. Activities were measured in 100 mM TrisHCI, 10 mM CaCİ2 ( pH 7.5 ) buffer at 36°C, using N-succinyl-L-(ala)3-p-nitroanilide as the substrate. The absorbancy was 111measured at 410 nm. The elastase activity followed Michaelis - Menten kinetics over the substrate range 0.067 - 0.540 mM with apparent KmaPP value of 0.379 mM. Inhibition was observed at higher concentrations ( > 0.500 mM ) of the substrate. Optimum activity was observed at 36°C and at pH 7.5. Elastase activity was inhibited by metal chelating agents ( EDTA and EGTA ) and at higher concentrations of Mn, Ni and Zn. Although the enzyme has retianed 90% of the total activity at 36°C after 90 min, no activity was detected at 56°C after 15 min. The results obtained suggest that P. aeruginosa SES-938-1 elastase is a neutral metallo-proteinase. Key Words : Elastase, Pseudomonas aeruginosa, metallo - neutal proteinase, antibiotic resistance. Science Code : 401.01. 04. IV

Benzer Tezler

  1. Tez No

    649322

    Reducing antibiotic resistance in biofilms via acoustic sound waves

    Akustik ses dalgası yöntemiyle biyofilmlerde antibiyotik direncinin düşürülmesi

    MÜŞERREF KILIÇ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. METİN TURAN

  2. Tez No

    867949

    Litik pseudomonas aerugınosa faj izolasyonu ve litik etki potansiyelinin araştırılması

    Investigation of phague isolation and the potential for lytic effects of lytic pseudomonas aeruginosa

    OMID ESHAGI JOGANLO

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiHarran Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OKTAY KESKİN

  3. Tez No

    703584

    Klinik Pseudomonas aeruginosa'nın virülans faktörlerinin ve antibiyotik direnç örneklerinin tespiti

    Detection of virulence factors and antibiotic resistance patterns of clinical Pseudomonas aeruginosa

    YUSRA KADHIM ALI ALSAADI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Moleküler TıpÇankırı Karatekin Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MELDA DÖLARSLAN

    DR. ÖĞR. ÜYESİ SUHAD SAAD MAHMOOD

  4. Tez No

    408842

    Klinik örneklerden izole edilen Pseudomonas aeruginosa suşlarında Beta laktamaz yapımının fenotipik yöntemlerle araştırılması

    Beta - lactamase production in Pseudomonas aeruginosa strains isolated from clinical specimens to investigate the phenotypic methods

    ALİ PİRİNÇÇİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    MikrobiyolojiFırat Üniversitesi

    Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZÜLAL AŞCI TORAMAN

  5. Tez No

    142364

    Cerrahpaşa Tıp Fakültesi'nde pseudomanas aeruginosa bakteriyemili hastaların klinik, mikrobiyolojik ve moleküler epidemiyolojik yönden izlemi

    Clinical, microbiologic and molecular epidemiologic features of patients with pseudomonas aeruginosa bacteriemia in Cerrahpaşa Medical Faculty

    MESUT YILMAZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Mikrobiyolojiİstanbul Üniversitesi

    Klinik Mikrobiyoloji ve Enfeksiyon Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. RECEP ÖZTÜRK

Geri Dön