Geri Dön

Cloning and overexpression of Lactobacillus acidophilus bile salt hydrolase a gene (bshA) in Escherichia coli

Lactobacillus acidophilus'un safra tuzu hidrolaz geninin (bshA) Escherichia coli'ye aktarılması ve aşırı üretimi

PDF İndir

  1. Tez No: 374633
  2. Yazar: ATHEER AHMEED MAJEED
  3. Danışmanlar: PROF. DR. EMİN ÖZKÖSE
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Genetik, Biyomühendislik, Biotechnology, Genetics, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Probiyotik, Lactobacillus acidophilus Ar, E. coli, Safra tuzu hidrolaz enzimi, bshA geni, Probiotic Lactobacillus acidophilus Ar, E. coli MC1022, Bile salt hydrolase, bshA genes
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik ve Bilimleri Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Safra tuzu hidrolaz enzimini (EC 3.5.1.24) kodlayan Safra tuzu hidrolaz geni (bshA), kolesterol düşürücü etkisi olan Lactobacillus acidophilus Ar suşu bu çalışmada kullanılmıştır. Yaklaşık olarak 800 bç. uzunluğundaki DNA parçası Lb. acidophilus Ar suşundan PZR tekniği ile çıkarılmıştır. DNA'nın işlenmesi ve klonlanması için her iki uca kesme enzimi (PstI/SacI) kodu eklenmiştir. Elde edilen DNA parçası E. coli MC1022 ekspresyon vektörü pJET1.2\blunt end ve Mekik vektör pMG36e ye yerleştirilmiştir. Elde edilen yeni recombinant plasmitlere sırasıyla pJET/bsha ve pMG36e/ bshA adı verilmiştir. Her iki recombinant molekül daha sonara kimyasal metotla E. coli MC1022 ye aktarılmıştır. Elde edilen rekombinantlar daha sonar enzim üretimi ve gen dizi analizleri için kullanılmıştır. Elde edilen sonuçlara gore gen transferi yapılan, pJET/bsha içeren E. coli MC102, bakterilerinin, pMG36e/ bshA içeren E. coli MC102, bakterilerinden ve bu geni taşımayan E. coli MC102, bakterilerinden daha fazla Safra tuzu hidrolaz enzimi ürettikleri gözlemlenmiştir. Ayrıca pMG36e/bshA içeren E. coli MC102, bakterilerinin bu geni taşımayan E. coli MC102, bakterilerinden daha fazla Safra tuzu hidrolaz enzimi ürettikleri gözlemlenmiştir. Rekombinant plasmitlerin taşıyıcı bakterilerde bir kaç generasyon kaldıkları da gözlemlenmiştir.

Özet (Çeviri)

The bile salt hydrolase gene (bshA), encoding bile salt hydrolase enzyme (EC 3.5.1.24) from probiotic isolate Lactobacillus acidophilus Ar strain which is responsible for assimilation cholesterol were studied in the present work. About 801 bp in length DNA fragment of Lb. acidophilus Ar strain was amplified by PCR techniques. Two restriction sites (PstI/SacI) were added to each end of that fragment for manipulation of DNA during cloning. Amplified fragment inserted into pJET1.2\blunt end vector and pMG36e vector respectively. pJET1.2\blunt end vector is overexpression plasmid for E. coli MC1022, and pMG36e vector is a shuttle vector which is able to replicate in both E. coli and lactic acid bacteria. The resulted constructs were named as pJET/bshA and pMG36e/bshA respectively. Both recombinants were transferred to E. coli MC1022 by chemical transformation. Obtained recombinants analyzed for expression and sequences. The results were confirmed that production of bile salt hydrolase from recombinant E. coli MC1022 pJET/bshA found to be higher while compared with E. coli MC1022 wild type and recombinant E. coli MC1022 pMG36e/bshA strain. However production of bile salt hydrolase from recombinant E. coli MC1022 pMG36e/bshA found to be higher while compared with E. coli MC1022 wild type. The recombinant plasmid also found to be stable in host organism after a few generations.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    456363

    Molecular cloning, characterization and comparison of bile salt hydrolase enzyme from Lactobacillus gasseri

    Lactobacillus gasseri safra tuzu hidrolaz emzimlerinin klonlanması, karakterizasyon ve karşılastırması

    NDEYE MAREME BA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    BiyolojiAbant İzzet Baysal Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET ÖZTÜRK

    YRD. DOÇ. DR. YAKUP ERMURAT

  2. Tez No

    545959

    Fusobacterium nucleatum laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan genin izolasyonu, klonlanması ve analizi

    Isolation, cloning and analysis of the gene encoding lactate dehydrogenase enzyme from Fusobacterium nucleatum

    EMRAH SARIYER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. DİLEK BALIK

  3. Tez No

    320700

    Molecular cloning, overexpression and biochemical characterization of bacterial amylase for biotechnological processes

    Biyoteknolojik uygulamalarda kullanılmak üzere bakteriyel amilazın klonlanması, ifadelenmesi ve biyokimyasal karakterizasyonu

    TÜLİN BURHANOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2012

    Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. GÜLŞAH ŞANLI

    YRD. DOÇ. DR. H. ÇAĞLAR KARAKAYA

  4. Tez No

    251059

    Molecular cloning, overexpression and characterization of thermostable esterase and lipase from Thermophilic bacillus sp.

    Termal kararlı esteraz ve lipaz enzimlerinin Termofilik bacillus sp.'den moleküler klonlanması, ifadelenmesi ve karakterizasyonu

    HASAN CİHAD TEKEDAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. ALPER ARSLANOĞLU

    YRD. DOÇ. GÜLŞAH ŞANLI

  5. Tez No

    318047

    Streptococcus thermophilus bakterisinde asetaldehit kodlayan glyA geninin klonlanması ve E. coli'de overekspresyonu

    Cloning of Streptococcus thermophilus acetaldehyde encoded glyA gene and overexpression in E. coli

    İLKİN KAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    GenetikKahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İSMAİL AKYOL

Geri Dön