Geri Dön

Yapısında birden fazla fonksiyonu barındıran hetero nano-enzim yapılar ve elısa uygulamaları

Hetero nano-enzyme structures having multiple functions and their elisa applications

PDF İndir

  1. Tez No: 386852
  2. Yazar: ENDER KÖSE
  3. Danışmanlar: PROF. DR. RIDVAN SAY
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Kimya, Biochemistry, Biotechnology, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Anadolu Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 62

Özet

Bu çalışmada rutenyum tabanlı amino asit monomerleriyle fotosensitif çapraz bağlama (ANADOLUCA) yöntemi kullanılarak, yapısında birden fazla enzim barındıran nano yapılar sentezlenmiş ve sentezlenen bu nano-enzimlerin ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) uygulamalarında kullanımları incelenmiştir. Bu amaçla ilk olarak horseradish peroksidaz (HRP) ve alkalen fosfataz (ALP) enzimleri, bis (2-2'-bipiridil) (MATyr)2 rutenyum (II) fotosensitif monomeri ile çapraz bağlı nano yapılar mikro emülsiyon polimerizasyon yöntemi ile gün ışığında, azot atmosferinde ve oda sıcaklığında sentezlenmiş ve bu nano yapılar geçirgenlik elektron mikroskobu (TEM), atomik kuvvet mikroskobu (AFM), zetametre ile boyut ve potansiyel analizi ile karakterize edilmiştir. Çalışmanın ikinci aşamasında, HRP ve ALP'nin çapraz bağlandığı hetero nano-enzim ile kinetik çalışmalar yapılmıştır. Kinetik çalışmalar sonucunda hetero nano-enzimin tetrametilbenzidin substratına karşı optimum pH' ı 5, Km= 26 mM ,Vmak=1,24 x 10-2 U ve p-nitrofenilfosfat substratına karşı optimum pH' ı 10, Km=0,516 mM ,Vmak= 1,70 x 10-4 U olarak bulunmuştur. Yüksek sıcaklıklarda serbest enzimler denatüre olurken sentezlenen hetero nano-enzim yapı aktivitesini kaybetmemiştir. Tekrarlanabilirlik çalışmaları, metil alkol ile yıkanan nano yapının aktivitesinde on beşinci tekrarda bile önemli bir düşüş olmadığını göstermiştir. Çalışmanın son aşamasında nano enzim yapısı antikor ile konjuge edilerek ELISA uygulamaları gerçekleştirilmiştir.

Özet (Çeviri)

In this study, nanoparticles having multiple functions were synthesized using ruthenium based photosensitive amino acid monomers by cross-linking technique (ANADOLUCA) and the use of synthesized nanoparticles in ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) applications was investigated. For this purpose, firstly, cross-linked nano structures were prepared by microemulsion polymerization technique at room temperature under daylight and nitrogen atmosphere using horseradish peroxidase (HRP), alkaline phosphatase (ALP) enzymes and bis (2-2'-bipyridyl) (MATyr)2 rutenium (II) photosensitive monomers. Then, these structures were characterized by transmission electron microscopy (TEM), atomic force microscopy (AFM), zeta potential measurements. In the second part of the study, kinetic studies of the nanoenzymes were carried out. The obtained results showed that hetero nano-enzyme exhibited maximum activity towards tetramethylbenzidine (TMB) and paranitrophenyl phosphate (p-NPP) as substrates at pH 5 and pH 10, respectively. The kinetic parameters Km and Vmax values were 26 mM and 1,24 x 10-2 U for TMB and 0,516 mM, 1,70 x 10-4 U for p-NPP. The free enzymes denaturate at high temperatures. However, hetero nano-enzyme structure has not loss its activity. The reusability studies showed that there is no significant loss of activity of the nanostructure washed with ethanol even after 15 cycle. In the final step of the study, nano enzyme structure was conjugated with antibody and ELISA applications were carried out.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    728930

    Experimental and numerical investigation of flapping airfoils interacting in various arrangements

    Çırpan kanat profillerinin çeşitli yerleşimler için etkileşimlerinin deneysel ve sayısal olarak incelenmesi

    SALİHA BANU YILMAZ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2021

    Havacılık Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Uçak ve Uzay Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET FEVZİ ÜNAL

    PROF. DR. MEHMET ŞAHİN

  2. Tez No

    874223

    Multi-scale recursive context aggregation network for semantic segmentation

    Anlamsal bölümleme için çok ölçekli özyinelemeli bağlam birleştirme ağı

    ABDULLAH YALÇIN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİstanbul Teknik Üniversitesi

    Bilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET KESKİNÖZ

  3. Tez No

    68867

    A Configuration of systematic approaches for drinking water distribution problem in metropolitan areas

    Başlık çevirisi yok

    SELİM KAHVECİOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1997

    Mühendislik Bilimleriİstanbul Teknik Üniversitesi

    İnşaat Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SELİME SEZGİN

  4. Tez No

    293768

    Deposition and characterization of single and multilayered boron carbide and boron carbonitride thin films by different sputtering configurations

    Tek ve çok katmanlı bor karbür ve bor karbonitrür ince filmlerinin farklı sıçratma teknikleriyle biriktirilmesi ve karakterizasyonu

    TOLGA TAVŞANOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    Metalurji Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Metalurji ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. MİCHEL JEANDİN

    PROF. DR. OKAN ADDEMİR

  5. Tez No

    507459

    Thermo-elastic analysis and multi objective optimal design of functionally graded flywheel for energy storage systems

    Enerji depolama sistemleri için fonksiyonel derecelendirilmiş volan termoelastik analizi ve çok parametreli optimizasyonu

    ALPER UYAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Uçak Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Uçak ve Uzay Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM OZKOL

Geri Dön