Dual role of human tooth germ derived mesenchymal stem cells on cancer cells
İnsan diş germ kök hücrelerinin kanser hücreleri üzerideki çift yönlü rolü
- Tez No: 387821
- Danışmanlar: PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Bölümü
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 66
Özet
Tümör mikro çevresinin önemli bileşenleri olan mezenkimal kök hücreler tümor gelişimi ve büyümesini pek çok şekilde kontrol edebilir. Mezenkimal kök hücreler (MKH), tümor tropizma potansiyelleri sebebiyle hedefli kanser gen tedavisi araçları olarak kullanılmışlardır. Çalışmada insan diş jermlerinden elde edilen mezenkimal kök hücrelerin antikanser ilaçlar olan doksorubisin ve paklitaksel ile muamele edilmiş MKH ve SH-SY5Y hücreleri üzerine olan etkilerini araştırdık. Ayrıca bu çalışmada apoptoz tetikleyiciler olan TRAIL ve Dkk-1 üretmek için genetik olarak modifiye edilmiş mezenkimal kök hücrelerin in vitro etkilerini inceledik.Çalışmanın ilk kısmında %70 yoğunluğa ulaşan insan diş jerm kök hücrelerinden besiyeri toplandı. Elde edilen bu besiyerinin doksorubisin ve paklitaksel ile muamele edilmiş MCF-7 ve SH-SY5Y hücreleri üzerindeki etkisi MTS deneyi ve kaspaz3 ile p53 gibi apoptotik markörlerin gerçek zamanlı PZR ile analiz edilmesi ile belirlendi.Çalışmanın ikinci kısmında TRAIL ve Dkk-1 genleri tek başına veya kombine edilerek pkh67 (yeşil floresans boya) ile boyanan mezenkimal kök hücrelere transfekte edildi. GFP ile transfekte edilmiş bir grup kontrol olarak kullanıldı. Genetik olarak modifiye edilmiş mezenkimal kök hücreler SH-SY5Y hücreleri ile 24 saat boyunca birlikte kültüre edildi. SH-SY5Y hücrelerinin canlılığı flow sitometri kullanılarak belirlendi. Bcl-2, Bax, Stat3 (hücre çoğalma genleri), FADD, caspase3 (apoptotik genler) genlerinin anlatım düzeyi gerçek zamanlı PZR ile belirlendi.Sonuçlar insan diş jerm kök hücrelerinden elde edilen besiyerinin doksorubisin ve paklitaksel ile muamele edilmiş MCF-7 ve SH-SY5Y hücrelerinin canlılığını % 30 oranında artırdığını ve ayrıca doksorubisin ve paklitakselin neden olduğu apoptozu azalttığını göstermiştir. Diğer yandan TRAIL ve Dkk-1 üretmek üzere genetik olarak modifiye edilmiş mezenkimal kök hücreler apoptozu indükleyerek ve hücre çoğalmasını inhibe ederek kanser hücrelerinin canlılığını azalttı. Bulgularımız mezenkimal kök hücrelerin, antikanser ilaçların kanser hücreleri üzerindeki etkisini azaltarak tümor hücrelerinin büyümesinde rolü olduğunu göstermiştir. Başka bir deyişle TRAIL ve Dkk-1 ekspresyonu yapabilen genetik olarak değiştirilmiş insan diş jermleri kaynaklı mezenkimal kök hücreler bazı kanser türlerinin tedavisi için potansiyel bir gen ve hücre terapisi yaklaşımı olabilir.
Özet (Çeviri)
Mesencyhmal stem cells (MSCs), important components of the tumor microenvironment, could modulate tumor growth and development in many ways. MSCs have been used as targeted-delivery vehicles for cancer gene therapy because of their potential of tumor tropism. In this study, we investigated the effects of Human Tooth Germ (HTG) derived MSCs on MCF-7 (Human breast cancer cell line) and SH-SY5Y (Human metastatic neuroblastoma cell line) cells treated with doxorubicin and paclitaxel, anticancer drugs. We also investigated the in vitro effect of genetically modified MSCs secreting apoptosis inducers (Tumor necrosis factors related apoptosis inducing ligand (TRAIL), Dickkopf-related protein-1(Dkk-1)) on SH-SY5Y cells.In the first part, conditioned medium (CM) of hTGSCs was collected when the cells reached to 70% confluency. Effects of this CM on MCF-7 and SH-SY5Y treated doxorubicin and paclitaxel were measured by MTS (cell viability assay) assay and real time PCR analysis of apoptotic markers caspase3 and p53.In the second part, TRAIL and Dkk-1 genes tagged with pkh67 (Green Fluorescent Cell Linker Kit) were transferred into MSCs by electroporation either alone or in combination. A GFP gene transfected group was used as a control. Genetically modified MSCs were co-cultured with SH-SY5Y cells for 24 hours. Thereafter the cell survival of SH-SY5Y cells was determined by using flow cytometry. The expression of Bcl-2, Bax, Stat3 (proliferation genes), FADD, caspase3 (apoptotic genes) in SH-SY5Y cells were assessed by real time PCR.The results showed CM of hTGSCs increased the survival of MCF-7 and SH-SY5Y cells treated with doxorubicin and paclitaxel by 30% and also CM reduced doxorubicin and paclitaxel induced apoptosis. On the other side, genetically modified MSCs secreting TRAIL and Dkk-1 reduced the cell survival of cancer cells by inducing apoptosis and inhibiting the proliferation. Our findings demonstrated that MSCs play roles in growth of tumor cells by decreasing the effect of anti-cancer drugs on cancer cells. On the other hand genetically modified HTG derived MSCs expressing Trail and Dkk-1 might be a potential gene and cell therapy approach to treat certain types of cancer.
Benzer Tezler
- Rethinking the historical basis for the protection of human rights: The role of universal norms, state power, and social struggles
İnsan haklarının korunmasının tarihsel temelini yeniden düşünmek: Evrensel normların, devlet gücünün ve sosyal mücadelelerin rolü
BİLGE ECE ZEYREK
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Uluslararası İlişkilerOrta Doğu Teknik ÜniversitesiUluslararası İlişkiler Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. PINAR BEDİRHANOĞLU TOKER
- İklim değişikliğine mekansal uyumda toprak ekosistem servislerinin rolü: Nilüfer çayı havzası
The role of soil ecosystem services in spatial adaptation to climate change: Nilüfer stream basin
MERVE YILMAZ MUTLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Şehircilik ve Bölge Planlamaİstanbul Teknik ÜniversitesiŞehir ve Bölge Planlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AZİME TEZER
- The role of IRE1 in metaflammation and atherosclerosis
IRE1'ın metaflamasyon ve aterosklerozdaki rolü
ÖZLEM TUFANLI
Doktora
İngilizce
2017
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. EBRU ERBAY
- Akciğer kanserinde metabolik (MEH) polimorfizmin ilaç rezistansındaki rolü
The role of metabolic (MEH) polymorphism in drug resistance in lung cancer
EMRE SOYDAŞ
Doktora
Türkçe
2021
Eczacılık ve FarmakolojiAnkara ÜniversitesiFarmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TÜLAY ÇOBAN
PROF. DR. MÜMTAZ İŞCAN
- IFNγ sinyal yolağının braf inbitörlerine yanıttaki rolünün A375 ve SK-MEL-1 insan melanom hücrelerinde araştırılması
Investigation of the role of İFNγ signaling pathway in response to braf inhibitors in A375 and SK-MEL-1 human melanom cells
FERDİ OĞUZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyolojiManisa Celal Bayar ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HARİKA ATMACA İLHAN