Geri Dön

Generation of novel random mutagenesis lipase libraries via directed evolution

Yönlendirilmis¸ evrim metodu ile yeni, rastgele mutasyona uğratılmış lipaz kütüphanelerinin oluşturulması

  1. Tez No: 389518
  2. Yazar: BATUHAN ORBAY YENİLMEZ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. OSMAN UĞUR SEZERMAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Biyoteknoloji, Bioengineering, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2013
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Sabancı Üniversitesi
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Lipazlar (triasilgliserol asilhidrolaz EC 3.1.1.3), biyoteknolojik uygulamalarda etkili rol oynayan biyokatalizörlerdir. Mekanizmaları, seçicilikleri ve yapıları bilindiği için, protein mühendisliği ve yönlendirilmiş evrim metodlarına uygun adaylardır. DNA karma metodu, yönlendirilmiş evrim ve rastgele mutajenez tekniklerinin bir arada kullanılabilmesi, istenilen özelliklere sahip mutant lipaz kütüphanelerinin oluşturulabilmesine imkan tanımıştır. Bu durum, lipazlarin aynı zamanda biyosensör, ilaç, tarım endüstrilerinde kullanılmasına olanak sağlamıştır. Lipazların ticari kullanımına karşı artan talep sonucu yeni ve hedefe özgün lipazların tanımlanması ve izole edilmesi kritik önem taşımaktadır. Bu tez, yönlendirilmiş evrim tekniğiyle mutant lipaz kütüphanelerinin oluşturulmasını hedef almakla beraber, aday biyokatalizörlerin analizini yapmayı amaçlamaktadır. Bunun için, fungal ve mezofilik bir lipaz olan Aspergillus niger lipazı (ANL) ile bakteriyel ve termofilik bir lipaz olan Bacillus thermocatenulatus lipazı (BTL) DNA karma metodu ile karıştırılmıştır. Rastgele mutajene olacak olan enzimlerin, termostabilite, pH stabilite ve substrat seçiciliğinde artı göstermesi ve endüstriyel ve biyokteknolojik uygulamalarda önemli bir lipaz olması öngörülmektedir. Elde edilen klonlarda, substrat seçiciliği değişikliği görülmemekle beraber, enzimlerin genel aktivitelerinde belirli değişiklikler saptanmış, ve bu özellikler yapısal boyutta tartışılmıştır.

Özet (Çeviri)

Lipases (triacylglycerol acylhydrolases, EC 3.1.1.3) function as significant biocatalysts in biotechnological applications. The fact that their mechanism, selectivity and structure is well known make lipases a suitable candidate for studies of protein engineering and directed evolution. Using the merits of DNA shuffling method, directed evolution and random mutagenesis,libraries of mutant lipases are constructed with improved features and functionality of pre-existing ones, which in turn encourages the use of industrial lipases in applications such as biosensors, pharmaceuticals, agrochemicals, bioremediation, etc. With increasing demand on lipase production for commercial use, it has thus become crucial to identify and isolate novel and target-specific lipases, as well as optimizing existing ones for acquisition of desired functionality. The aim of this study is to generate mutant lipase libraries using directed evolution and to screen for a candidate biocatalyst. There are two lipases of interest, the mesophilic Aspergillus niger lipase (ANL) and the thermophilic Bacillus thermocatenulatus lipase (BTL), which were shuffled in order to obtain a mutant library that would have the desired features such as increased thermostability, pH stability and a broader range of substrate specificity.

Benzer Tezler

  1. Realization of transmitter and receiver clock generation units and channel switching unit in a modified analog radio relay

    Değiştirilen bir analog radyodaki verici ve alıcı saat üretimi birimleri ve kanal anahtarlama biriminin gerçekleştirilmesi

    AYHAN BÜYÜKSEMERCİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1987

    Elektrik ve Elektronik MühendisliğiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Elektrik-Elektronik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MURAT AŞKAR

  2. New algorithms and techniques for microprocessor-controlled PWM induction drives

    Başlık çevirisi yok

    OSMAN KÜKRER

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1987

    Elektrik ve Elektronik MühendisliğiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Elektrik-Elektronik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. H. BÜLENT ERTAN

  3. Barajların hacim-verim ilişkisi üzerine bir araştırma

    Başlık çevirisi yok

    MEHMET KILIÇARSLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1987

    İnşaat MühendisliğiÇukurova Üniversitesi

    İnşaat Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. TEFARUK HAKTANIR

  4. Buğday mutant populasyonlarında çeşitli tarımsal özellikler arasındaki ilişkiler

    Başlık çevirisi yok

    M. İLHAN ÇAĞIRGAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    ZiraatEge Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. METİN B. YILDIRIM

  5. Akaryakıtla çalışan endüstriyel tav fırınlarında yanma, sıcaklık ve basıncın optimum kontrolu

    Optimum control of combustion temperature and pressure in industrial tempering furnaces working with fuel-oil

    MEHMET EROĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1987

    Makine MühendisliğiGazi Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. YÜCEL ERCAN