Geri Dön

Çay (Camellia sinensis L.) bitkisinden grelin-benzeri immünoreaktif maddelerim izolasyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu

Isolation, purification and characterization of ghrelin-like immunoreactive substances from tea (Camellia sinensis L.)

PDF İndir

  1. Tez No: 410794
  2. Yazar: EMİNE ÇİÇEK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. MUSTAFA CALAPOĞLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Grelin, çay (Camellia sinensis L.), grelin-benzeri immünoreaktive maddeler, trisin-SDS-PAGE, western blot, Ghrelin, ghrelin-like immunoreactive, tea (Camellia sinensis L.), tricine-SDS-PAGE, western blotting
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 125

Özet

Grelin, büyüme hormonu (GH) salgılatıcı hormon reseptörü 1a (GHRH-R1a)'nın endojen bir ligandı olarak insan ve sıçan midesinden izole edilmiş 28 amino asitlik bir peptidtir. Grelin başlıca mide oksintik mukozanın X/A benzeri hücrelerinde üretilmektedir. Fakat grelin aynı zamanda düşük miktarlarda hipotalamust, hipofiz, troid, pankreas, böbrek, karaciğer, kalp, akciğer, plasenta, tükrük bezleri, ince barsak, meme ve testislerde de üretilmektedir. Grelin memeliler, balıklar, kurbağalar, kuşlar, sürüngenler ve bazı bitkilerde tesbit edilmiştir ve grelin sekansı evolüsyon boyunca iyi korunmuştur. Bu çalışmada amaç, çay (Camellia sinensis L.) bitkisinin taze dokularında grelin-benzeri immünoreaktif maddeleri tesbit etmektir. Çay bitkisinin taze dokularından total protein izolasyonu, çeşitli ekstraksiyon yöntemler kullanılarak (TCA/aseton presipitasyonu, TCA/aseton presipitasyonu/fenol ekstraksiyonu, PBS ekstraksiyonu, QB ekstraksiyonu) ekstrakte edildi. Çay bitkisi ekstraklarında grelin bezleri immünoreaktif maddeler direk ELISA yöntemi ile belirlendi. Çay bitkisinden TCA/aseton presipitasyonu, TCA/aseton presipitasyonu/fenol ekstraksiyonu, PBS ekstraksiyonu, QB ekstraksiyonu ve SDS tamponu ekstraksiyonu yöntemleri ile elde edilen ekstraklarda grelin immünorekativitesi, sırasıyla 0,067 ± 0,021 µg/mL, 0,05 ± 0,020 µg/mL, 0,037 ± 0,017 µg/mL, 0,192 ± 0,039 µg/mL ve 0,048 ± 0,019 µg/mL olarak bulundu. Çay bitkisi ekstraklarında insan grelin-benzeri immünoreaktif maddeler ayrıca trisin-SDS-PAGE ve immünoblot teknikleri ile de karakterize edildi. Sonuç olarak çay bitkisinin taze vejetatif dokularında trisin-SDS-PAGE ve western blot ile 12 kDa'lık moleküler kütleye sahip tek bir grelin-benzeri protein bandı gözlendi. Çalışma verilerine göre, grelinin hem hayvanlar alemi ve hem de bitkiler aleminde evrensel bir peptid olabileceğini göstermektedir. Sonuç olarak bitkiler de farklı düzeylerde bulunan grelin-benzeri immünoreaktif maddeler, insan kilo denetimine katkı sağlayabilir.

Özet (Çeviri)

As an endogenous ligand for the GH releasing hormone receptor (GHS-R1a). Ghrelin is a 28 amino-acid peptide isolated from human, rat stomach. Ghrelin is mainly produced by the X/A-cells in the oxyntic mucosa of the stomach, but small amounts are also produced in the hypothalamus, the pituitary, the thyroid, the pancreas, the kidney, the liver, the heart, the lung, the placenta, the salivary glands, the small intestine, the breast and the testes.Ghrelin has been identified in mammals, fish, amphibians, birds, reptiles and some plants and ghrelin sequence has been well preserved during the evolutionary process. The aim in this study is to determine ghrelin-like immunoreactive substances in fresh vegetative tissue of tea plant (Camellia sinensis L.). Total protein was extracted from the plant samples by using different extraction methods (TCA/acetone precipitation, trichloroacetic acid (TCA)/acetone precipitation followed by SDS and phenol extraction, PBS, QB extraction methods). Ghrelin-like immunoreactive substances in the tea plant extracts were investigated with ELISA method. The ghrelin immunoreactivity of tea extracs obtained by TCA/acetone precipitation, trichloroacetic acid (TCA)/acetone precipitation followed by SDS and phenol extraction, PBS, QB extraction methods were found to be 0,067 ± 0,021 µg/mL, 0,05 ± 0,020 µg/mL, 0,037 ± 0,017 µg/mL, 0,192 ± 0,039 µg/mL and 0,048 ± 0,019 µg/mL, respectively. From the tea plant samples human-ghrelin-like immunorective substances were isolated and characterized using tricine-SDS-PAGE and immunoblotting techniques. As a result, in fresh vegetative tissues of tea a single ghrelin-like protein band with a molecular mass of 12 kDa was observed using tricine-SDS-PAGE and western blotting. Results show ghrelin can be a universal peptide both in the animal and the plant world. As a result ghrelin-like immunorective substances found in plants in various amounts, may contribute weight control in humans.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    442731

    Çay (Camellia sinensis L.) bitkisinden obestatin-benzeri immünoreaktif maddelerin izolasyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Isolation, purification and characterize of obestatin-like immunoreactive substances from tea (Camellia sinensis L.)

    İFTİHAR TEMİZYÜREK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    KimyaSüleyman Demirel Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MUSTAFA CALAPOĞLU

  2. Tez No

    411652

    Yaş ve kuru çayda, verim ve önemli kalite parametrelerine sarı çay akarı (Polyphagotarsonemus latus (Banks, 1904)) (Prostigmata: Tarsonemidae)'nın etkisi

    Effect of yellow tea mite (Polyphagotarsonemus latus (Banks, 1904))(Prostigmata: Tarsonemidae) on yield and important quality parameters of fresh and dried tea

    BİRSEN AŞIK ÇUHADAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    ZiraatOrdu Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SAİM ZEKİ BOSTAN

    YRD. DOÇ. DR. RANA AKYAZI

  3. Tez No

    411781

    Besinsel liflere bağlı biyoaktif maddelerin antioksidan kapasitesi ve rejenerasyon davranışının quencher metoduyla belirlenmesi

    Determination of antioxidant capacity and regeneration behaviour of bioactive materials bound to dietary fibers with quencher procedure

    ECEM EVRİM ÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Gıda MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VURAL GÖKMEN

  4. Tez No

    411860

    Metabolism of Turkish black tea phenolics by human gut microbiota

    Siyah çay fenoliklerinin insan kalın bağırsak mikroflorası ile etkileşimi

    EZGİ ÖZCAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATMA YEŞİM KADIPAŞAOĞLU

    YRD. DOÇ. DR. ÖZLEM GÜÇLÜ ÜSTÜNDAĞ

  5. Tez No

    411865

    Şanlıurfa Kadın Hastalıkları ve Doğum Hastanesine başvuran gebelerde anemi sıklığı ve ilişkili faktörler

    The prevalence of anemia and related factors in pregnant women admitted to Şanlıurfa Maternity Hospital

    FERAY KABALCIOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    HemşirelikHarran Üniversitesi

    Hemşirelik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FÜGEN ÖZCANARSLAN

Geri Dön