Çay (Camellia sinensis L.) bitkisinden grelin-benzeri immünoreaktif maddelerim izolasyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu
Isolation, purification and characterization of ghrelin-like immunoreactive substances from tea (Camellia sinensis L.)
- Tez No: 410794
- Danışmanlar: DOÇ. DR. MUSTAFA CALAPOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Grelin, çay (Camellia sinensis L.), grelin-benzeri immünoreaktive maddeler, trisin-SDS-PAGE, western blot, Ghrelin, ghrelin-like immunoreactive, tea (Camellia sinensis L.), tricine-SDS-PAGE, western blotting
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 125
Özet
Grelin, büyüme hormonu (GH) salgılatıcı hormon reseptörü 1a (GHRH-R1a)'nın endojen bir ligandı olarak insan ve sıçan midesinden izole edilmiş 28 amino asitlik bir peptidtir. Grelin başlıca mide oksintik mukozanın X/A benzeri hücrelerinde üretilmektedir. Fakat grelin aynı zamanda düşük miktarlarda hipotalamust, hipofiz, troid, pankreas, böbrek, karaciğer, kalp, akciğer, plasenta, tükrük bezleri, ince barsak, meme ve testislerde de üretilmektedir. Grelin memeliler, balıklar, kurbağalar, kuşlar, sürüngenler ve bazı bitkilerde tesbit edilmiştir ve grelin sekansı evolüsyon boyunca iyi korunmuştur. Bu çalışmada amaç, çay (Camellia sinensis L.) bitkisinin taze dokularında grelin-benzeri immünoreaktif maddeleri tesbit etmektir. Çay bitkisinin taze dokularından total protein izolasyonu, çeşitli ekstraksiyon yöntemler kullanılarak (TCA/aseton presipitasyonu, TCA/aseton presipitasyonu/fenol ekstraksiyonu, PBS ekstraksiyonu, QB ekstraksiyonu) ekstrakte edildi. Çay bitkisi ekstraklarında grelin bezleri immünoreaktif maddeler direk ELISA yöntemi ile belirlendi. Çay bitkisinden TCA/aseton presipitasyonu, TCA/aseton presipitasyonu/fenol ekstraksiyonu, PBS ekstraksiyonu, QB ekstraksiyonu ve SDS tamponu ekstraksiyonu yöntemleri ile elde edilen ekstraklarda grelin immünorekativitesi, sırasıyla 0,067 ± 0,021 µg/mL, 0,05 ± 0,020 µg/mL, 0,037 ± 0,017 µg/mL, 0,192 ± 0,039 µg/mL ve 0,048 ± 0,019 µg/mL olarak bulundu. Çay bitkisi ekstraklarında insan grelin-benzeri immünoreaktif maddeler ayrıca trisin-SDS-PAGE ve immünoblot teknikleri ile de karakterize edildi. Sonuç olarak çay bitkisinin taze vejetatif dokularında trisin-SDS-PAGE ve western blot ile 12 kDa'lık moleküler kütleye sahip tek bir grelin-benzeri protein bandı gözlendi. Çalışma verilerine göre, grelinin hem hayvanlar alemi ve hem de bitkiler aleminde evrensel bir peptid olabileceğini göstermektedir. Sonuç olarak bitkiler de farklı düzeylerde bulunan grelin-benzeri immünoreaktif maddeler, insan kilo denetimine katkı sağlayabilir.
Özet (Çeviri)
As an endogenous ligand for the GH releasing hormone receptor (GHS-R1a). Ghrelin is a 28 amino-acid peptide isolated from human, rat stomach. Ghrelin is mainly produced by the X/A-cells in the oxyntic mucosa of the stomach, but small amounts are also produced in the hypothalamus, the pituitary, the thyroid, the pancreas, the kidney, the liver, the heart, the lung, the placenta, the salivary glands, the small intestine, the breast and the testes.Ghrelin has been identified in mammals, fish, amphibians, birds, reptiles and some plants and ghrelin sequence has been well preserved during the evolutionary process. The aim in this study is to determine ghrelin-like immunoreactive substances in fresh vegetative tissue of tea plant (Camellia sinensis L.). Total protein was extracted from the plant samples by using different extraction methods (TCA/acetone precipitation, trichloroacetic acid (TCA)/acetone precipitation followed by SDS and phenol extraction, PBS, QB extraction methods). Ghrelin-like immunoreactive substances in the tea plant extracts were investigated with ELISA method. The ghrelin immunoreactivity of tea extracs obtained by TCA/acetone precipitation, trichloroacetic acid (TCA)/acetone precipitation followed by SDS and phenol extraction, PBS, QB extraction methods were found to be 0,067 ± 0,021 µg/mL, 0,05 ± 0,020 µg/mL, 0,037 ± 0,017 µg/mL, 0,192 ± 0,039 µg/mL and 0,048 ± 0,019 µg/mL, respectively. From the tea plant samples human-ghrelin-like immunorective substances were isolated and characterized using tricine-SDS-PAGE and immunoblotting techniques. As a result, in fresh vegetative tissues of tea a single ghrelin-like protein band with a molecular mass of 12 kDa was observed using tricine-SDS-PAGE and western blotting. Results show ghrelin can be a universal peptide both in the animal and the plant world. As a result ghrelin-like immunorective substances found in plants in various amounts, may contribute weight control in humans.
Benzer Tezler
- Çay (Camellia sinensis L.) bitkisinden obestatin-benzeri immünoreaktif maddelerin izolasyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu
Isolation, purification and characterize of obestatin-like immunoreactive substances from tea (Camellia sinensis L.)
İFTİHAR TEMİZYÜREK
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
KimyaSüleyman Demirel ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA CALAPOĞLU
- Anadolu kaynaklı camellia sinensis (L.)O.kuntze bitkisi üzerinde farmakognozik araştırmalar
Pharmagonosic researches on camellia sinensis (L.)O.kuntze growing in anatolia
CAN AĞCA ASLI
Doktora
Türkçe
2007
Eczacılık ve FarmakolojiAnkara ÜniversitesiFarmakognozi Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ENGİN ŞARER
- Çay (Camellia sinensis L.)'da organik gübrelerin verim, kalite ve antioksidan aktivite üzerine etkileri
The effects of organic fertilizers on yield, quality and antioxidant activity in tea (Camellia sinensis L.)
AYSEL ÖZCAN AYKUTLU
- Çay (Camellia sinensis (L.) Kuntze) bitkisinde gölgelendirmenin bitkilerin bazı agronomik ve morfolojik özellikleri üzerindeki etkisinin belirlenmesi
Determination of the effects of shading on some agronomical and morphological traits of tea plants (Camellia sinensis (L.) Kuntze)
DUYGU METE
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
ZiraatRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiTarla Bitkileri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YUSUF ŞAVŞATLI
- Çay (Camellia sinensis [L.] O. Kuntze) bitkisinde geçici daldırma sistemine dayalı biyoreaktörler aracılığıyla sentetik tohumların üretilmesi
Production of synthetic seeds in tea (Camellia sinensis [L.] O. Kuntze) via bioreactors based on a temporary immersion system
BEGÜM GÜLER