Microscopic analysis of aneuploidy induced by the mutation of the CCDC124 gene
CCDC124 gen mutasyon sonucunda oluşan anöplyıdının mikroskopik analizi
- Tez No: 418638
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET BATU ERMAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biyomühendislik, Biology, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Sabancı Üniversitesi
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 93
Özet
Hücre siklusunun sitokinez aşamasında çift kıvrımlı bölge içeren,“coiled coil domain containing”protein 124 (Ccdc124) sentromer bölgesinden midbody bölgesine taşınmaktadır. Midbody bölgesinde mitoz sonrası oluşan iki yavru hücrenin birbirinden ayrılması için hücreler arası köprünün koparılmasına sitokinetik kesilme (abscission) adı verilmektedir. HEK293T hücrelerinde CRISPR/Cas9 genom mühendisliği sonrasında Ccdc124 geninin mutasyonu sitokinez bozukluğuna ve anöplyidik çok çekirdekli (“MN”) hücrelerin oluşmasına neden olmaktadır. Bu çalışmada bu MN hücreler akım sitometre, konfokal mikroskopik görüntüleme sistemleri ve kantitatif görüntü analizi ile çalışılmıştır. MN hücreleri mitotik ve kromozomal bağlanma bozuklukları, çoklu sentrozomlar ve mikro-çekirdekler içermektedir. Bu bozuklukların kanser hücrelerinde de sıklıkla görünmesi, Ccdc124 proteinini kanser ile ilişkilendirmektedir. MN hücrelerinin 53BP1 proteini içeren fokus sayılarında artış gözlemlememiz, Ccdc124 mutant hücrelerde DNA hasar yolaklarının ve p53 yolaklarının aktive olduğunu belirtmektedir. MN hücreleri buna bağımlı olarak p53 protein miktarını arttırmış ve p53 sinyalleri sonucunda ihtiyarlamış hücre tipine bürünmüşlerdir. Bu çalışma, Ccdc124 gen mutasyonu ile sitokinez bozuklukları ve p53 bağımlı hücre ihtiyarlaması arasında bir bağ kurmuştur.
Özet (Çeviri)
The Coiled-coil domain containing protein 124 (Ccdc124) is a centrosomal protein that relocates to the midbody region at the cytokinesis stage of the cell cycle. Cytokinetic abscission is the cellular process that leads to physical separation of two postmitotic sister cells by severing the intercellular bridge. Mutation of the Ccdc124 gene by CRISPR/Cas9 genome editing in HEK293T cells leads to the failure of cytokinesis and formation of aneuploid (multinucleated-MN) aberrant cells. In this study, the MN cells were analyzed using flow cytometry and confocal imaging followed by quantitative image analysis. MN cells had mitotic and chromosome attachment aberrations, multiple centrosomes and micronuclei. These aberrations are known to occur in tumour cells, a finding that links Ccdc124 to cancer. MN cells also upregulated the p53 protein, which induced senescence. Furthermore, MN cells had increased numbers of 53BP1 foci which indicates that the mutation of Ccdc124 induces the DNA damage response and activates the p53 pathway. This study documents a relationship between Ccdc124 mutation-associated cytokinesis failure and p53-dependent senescence.
Benzer Tezler
- Mısırda (Zea mays L.) farklı 2,4-D dozlarının kallus oluşumu ve kromozomal yapıya etkisi
The effect of different 2,4-d doses on callus induction and chromosomal structure in maize (Zea sp.)
BURÇAK ÇABUK
Doktora
Türkçe
2010
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiTemel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. A. MURAT ÖZGEN
- Türkiye'de kıyısal ve karasal tuzlu göllerde yayılım gösteren Artemia populasyonlarının ekolojik, sitogenetik, moleküler, morfomometrik yöntemler kullanılarak araştırılması ve biyotopların hidrobiyolojik yönden incelenmesi
Hydrobiology of biotopes and ecological, cytogenetical, molecular and morphometrical analaysis of Artemia populations in coastal and inland saline ecosystems in Turkey
ARMİN ESKANDARİ
- Kalın barsak kanserlerinde p53 onkoproteini ve DNA analizi
P53 oncoprotein and DNA analysis in colorectal cancers
BERİL KOPARAL BALKAN
- Embriyo morfolojik seçim kriterlerinin preimplantasyon genetik tanı sonuçlarıyla karşılaştırılması ve 5. gün embriyolarındaki blastomer fragmantasyonunun incelenmesi
To compare with the results of preimpaltation genetic diagnosis and embryo morphological selection criteria and investigation of blastomer fragmentation on day 5 embryos
ŞADİYE GÜLÇİN KUNAÇAF
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
Tıbbi Biyolojiİstanbul Bilim ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ŞULE BEYHAN ÖZDAŞ