Geri Dön

Süperovulasyon uygulamasının DNA metiltransferaz genlerinin ekspresyonu üzerine etkisinin araştırılması

Investigating the effect of superovulation on the DNA methyltransferase genes expression in mouse oocytes and early embryos

PDF İndir

  1. Tez No: 424654
  2. Yazar: FATMA UYSAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GÖKHAN AKKOYUNLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 75

Özet

Memeli oosit ve erken dönem embriyo gelişiminde, epigenetik mekanizmalardan birisi olan DNA metilasyonu kritik bir öneme sahiptir. DNA metilasyonu, genomdaki CpG ya da CpG olmayan adacıklardaki sitozin nükleotidlerinin 5. karbon atomuna metil grubu takılmasıyla gerçekleştirilir. De novo(yeni baştan) ve sürdürme metilasyon mekanizmalarında, DNA metiltransferaz (DNMT) enzimleri rol oynar. Yapılan çalışmalarda, oosit ve erken dönem embriyo gelişiminde DNMT enzimlerinden olan DNMT1, DNMT3A ve DNMT3B'nin önemli görevleri olduğu belirlenmiştir. Bu çalışmada, IVF uygulamaları ve deneysel araştırmalarda sıklıkla kullanılan süperovulasyonun DNMT1, DNMT3A ve DNMT3B proteinlerinin ekspresyonal düzeyleri ve hücre içi yerleşimleri üzerine etkisinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Bu çalışmada Balb/C ırkı 6 haftalık dişi farelerden kontrol, normal doz [5 IU gebe kısrak serum gonadotrophini (PMSG)ve 5 IU insan korionik gonadotrophini (hCG)] ve yüksek doz (7.5 IU PMSG ve 7.5 IU hCG) olmak üzere 3 grup oluşturuldu. Belirlenen zaman çizelgesinde toplanan oosit [germinal vezikül (GV) ve metafaz II (MII)] ve erken dönem embriyolarda (1-hücreli ve 2-hücreli) DNMT1, DNMT3A ve DNMT3B'nin ekspresyonal düzeyleri ve hücre içi yerleşimleri immünofloresan tekniği ile belirlendi. Elde edilen boyanmalar, ImageJ yazılımı ile analiz edilerek göreli ekspresyonlar belirlenip; One Way Anova istatistiksel testi ile analiz edildi. Çalışmamızın sonuçlarına göre; DNMT1 ekspresyonu, analiz edilen oosit ve erken dönem embriyolarda nükleer bölgede zayıf, sitoplazmada daha yoğun gözlenirken membrana yakın bölgelerde ise yoğun şiddette olduğu her üç grupta da belirlenmiştir. DNMT3A ve DNMT3B ekspresyonu, nükleer bölgede yoğun iken, sitoplazmik bölgede ise normal şiddette yerleşim göstermiştir. Ayrıca, DNMT1, DNMT3A ve DNMT3B protein ekspresyonları normal ve yüksek doz gruplarından elde edilen GV ve MII oosit, 1-hücreli ve 2- hücreli embriyolarda kontrol grubuyla karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar gözlenmiştir (P

Özet (Çeviri)

DNA methylation is one of the epigenetic mechanisms which plays critical role at mammalian oocyte and preimplantation embryo development. DNA methylation materializes by adding a methyl group to the fifth carbon atom of the cytosine residues within cytosine-phosphate-guanine (CpG) and non-CpG dinucleotide sites. DNA methyltransferase (DNMT) enzymes play roles at de novo and maintenance methylation processes. In studies, DNMT1, DNMT3A and DNMT3B which are DNMT enzymes were identified to have important assignments in oocyte and preimplantation embryo development. In this study propose that superovulation which is used frequently in IVF applications and experimental researches that identification expression of protein levels and in subcellular localization of DNMT1, DNMT3A and DNMT3B. In this study, three groups were formed which included control, normal dose [5 IU pregnant mare's serum gonadotropin (PMSG) and 5 IU human chorionic gonadotropin (hCG)] and high dose (7.5 IU PMSG and 7.5 IU hCG) from 4-5 weeks female mice (BALB/C). Protein expression level and cellular localization of DNMT1, DNMT3A and DNMT3B were defined by immunofluorescence technique at oocyte [germinal vesicle (GV), metaphase II (MII)] and preimplantation embryos (1-cell and 2-cell) which were picked up in predetermined set of time chart. The images obtained were analyzed by ImageJ software and One Way Anova statistical test so that relative expressions were identified. According to the results of our study, DNMT1 we identified weak expression pattern in nuclear region, more intensive in cytoplasmic region and the most intensive expression pattern in near the membrane regions at analyzed oocytes and preimplantation embryos for three groups. DNMT3A and DNMT3B expressions have shown intensive localizations in nuclear regions and normal expression in cytoplasmic regions. Additionally, DNMT1, DNMT3A and DNMT3B protein expressions were observed significantly different in normal and high dose groups compared with control groups at GV and MII oocytes, 1-cell and 2-cell embryos (P

Benzer Tezler

  1. Tez No

    905040

    Süperovule edilen ratlarda melatoninin ovaryumdaki bazı genlerin ekspresyon seviyeleri üzerine etkisi

    Effect of melatonin on the expression of some genes in the ovary of superovulated rats

    SEVDA DALKIRAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    GenetikHatay Mustafa Kemal Üniversitesi

    Moleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AKIN YAKAN

  2. Tez No

    816325

    Assaf ırkı koyunlarda süperovulasyon öncesi eksojen melatonin uygulamasının embriyo verimi üzerine etkisi

    The effect of exogenous melatonin application before superovulation on embryo yield in assaf ewes

    ÖMER FARUK YEŞİLKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Veteriner HekimliğiSelçuk Üniversitesi

    Veteriner Doğum ve Jinekoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSEYİN ERDEM

  3. Tez No

    891182

    Holştayn ırkı ineklerde aynı süperovulasyon protokolü üzerinde uygulanan iki farklı foliküler dalga senkronizasyon yönteminin embriyo verimi ve kalitesi üzerine etkisinin araştırılması

    The effect of two different follicular wave synchronization methods applied on the same superovulation protocol on embryo yield and quality in Holstein breed cows

    HASAN MUTLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiHatay Mustafa Kemal Üniversitesi

    Doğum,Jinekoloji ve Suni Tohumlama (Veterinerlik) Anabilim Dalı

    PROF. DR. CENGİZ YILDIZ

  4. Tez No

    452592

    Kök hücre uygulamasının kök hücre uygulamasının sıçan modelinde in vitro fertilizasyon üzerine etkileri

    Application of stem cells in vitro fertilization effects on A rat model

    ALİ CAN GÜMÜRDÜ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Histoloji ve EmbriyolojiCelal Bayar Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET İBRAHİM TUĞLU

  5. Tez No

    115034

    Fiziksel bir stres modeli olarak elektroşok uygulamasının farede östral döngü, yumurta verimi ve progesteron düzeyi üzerine etkileri

    Evaluation of the effects of physical stress applied by electric foot schock on the estrous cycle, oocyte retrieval and progesterone level in the mice

    İLKNUR KOZANOĞLU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    FizyolojiÇukurova Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. GÜLAY LOĞOĞLU

Geri Dön