Aspergillus niger HBF 39'dan lipaz üretimi, saflaştırılması ve karakterizasyonu
Production, prufication and characterization of lipase from Aspergillus niger HBF 39
- Tez No: 426797
- Danışmanlar: DOÇ. DR. KUBİLAY METİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biyoloji, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Adnan Menderes Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 116
Özet
Aspergillus niger HBF 39 suşundan ekstrasellüler olarak üretilen lipaz DEAE Sefaroz CL- 6B, Butyl Sefaroz 4 Fast Flow ve Q Sefaroz Fast Flow işlemleri uygulanarak %35 verimle 11 kat saflaştırılarak elde edilmiştir. SDS- PAGE de tek bant elde edilmiştir. Molekül ağırlığı 67.5 kDa olarak hesaplanmıştır. Maksimum enzim aktivitesi pH 6.0 ve 30ºC ölçülmüştür. Enzimin geniş sıcaklık ve pH aralığında stabil olduğu saptanmıştır. Enzimin substratı olan pNPL (pNP- laurat) için Km değeri 49 μM ve Vmax değeri 139 U/mL olarak hesaplanmıştır. Lipaz aktivitesi, Ba2+, Li+, Na+ ve K+ katyonları tarafından aktive olurken Fe3+, Pb2+, Hg2+ katyonları tarafından inhibe olmuştur. NBS, DTT, DNTB, PMSF, CMC ve β-merkaptoetanol tarafından inhibe olması bu enzimin aktif merkezinde triptofan, sistein, serin ve karboksil grubu olan amino asitlerin kataliz işleminden sorumlu olduğu sonucuna varılmıştır. Lipaz enziminin geniş bir substrat spesifikliğine sahip olduğu belirlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Extracellular lipase produced by Aspergillus niger HBF 39 was purified 11 fold with a recovery of %35 referred to lipase activity in the crude extract using, DEAE Sepharose CL- 6B, Butyl Sepharose 4 Fast Flow, Q Sepharose Fast Flow of the purified enzyme gave a single stained band at a molecular mass of approximatly 67.5 kDa. The temperature and pH for maximum activity of the enzyme were 300C and 6.0 respectly. Km and Vmax values for pNPL of the lipase enzyme were calculated to be 49 μM and 139 U/mL, respectively. The lipase activity was stimulated by Ba2+, Li+, Na+ and K+ cations but inhibited by Fe3+, Pb2+ and Hg2+ cations. The enzyme activity was inhibited in the presence of NBS, DTT, DNTB, PMSF, CMC ve β-mercaptoethanol. These results shows that tryptophan, serine, cysteine, and carboxyl grup residues play an important role in the catalytic process. The lipase exhibited broad substrate specificity.
Benzer Tezler
- Aspergillus niger a-amilaz enziminin pichia pastoris'te rekombinant üretimi
Recombinant production of aspergillus niger a-amylase enyzme in pichia pastoris
FATMANUR MAVİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiAkdeniz ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYSUN ÖZÇELİK
- Aspergillus Niger LC3 izolatından antibakteriyel polipeptit izolasyonu
Isolation of antibacterial polypeptide from Aspergillus Niger LC3 isolate
AYŞE ÜSTÜN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiErzurum Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SERKAN ÖRTÜCÜ
- Aspergillus niger kullanarak alfa-amilaz enzimi üretimi üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
FAYSAL TATAR
Yüksek Lisans
Türkçe
1997
Gıda MühendisliğiUludağ ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OĞUZ KILIÇ
- Selülaz-dekstran sülfat konjugatlarının incelenmesi
Investigation of cellulase dextran sulphate conjugates
YILDIZ ÖZTÜRK
Yüksek Lisans
Türkçe
2005
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF.DR. HURİYE KUZU
- Selülaz-dekstran konjugatlarının incelenmesi
Investigation of cellulase-dextran conjugates
LÜTFİ KARAGÖZ