Geri Dön

İnsan karbonik anhidraz-ı izoenziminin alternatif bir metot ile immobilizasyonu

Immobilization of human carboni̇c anhydrase-i isoenzyme with an alternative method

PDF İndir

  1. Tez No: 432802
  2. Yazar: İSMAİL KÖSEOĞLU
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. NAHİT GENÇER
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2016
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Balıkesir Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 114

Özet

Karbonik anhidraz (CA) (E.C. 4.2.1.1) enzimi, tüm canlılarda CO_2'in hidratlanarak HCO_3^- ve H^+'ya dönüşümünü terisinir olarak katalizleyen oldukça önemli bir enzimdir. Bu çalışmada, karbonik anhidraz enzimi izoenzimlerinden olan insan CA-I izoenzimi, Sepharore-4B-L-tirozin-sülfonamid yapısına sahip afinite jeli ile saflaştırılmıştır ve SDS-PAGE ile saflık derecesi kontrol edilmiştir. Saflaştırılan CA-I izoenziminin -aminoheksil agaroz jeli üzerine gluteraldehit ile immobilizasyonu gerçekleştirilmiştir. İmmobilizasyon işleminden sonra serbest ve immobilize CA-I enzimi için çeşitli tayinler yapılmıştır. Serbest ve immobilize CA-I izoenziminin sırasıyla optimum pH'leri 10 ve 9.5 olarak bulunmuştur, aktivitelerini ise sırasıyla 768; 1096 saat korumuşlardır, optimum sıcaklıkları 35; 25 oC bulunmuştur, termal stabiliteleri 35; 50 oC'lerde koruduğu görülmüştür. CA-I'in klasik inhibitörlerinden sülfonamid, asetazolamid, brinzolamid, dorzolamid ve topiramat ilaçları ile inhibisyon çalışmaları gerçekleştirildi. Serbest ve immobilize CA-I izoenzimi için sırasıyla IC50 değerleri, sülfonamid için 19.083; 8.1059 M, asetazolamid için 0.7922; 0.6655 M, brinzolamid için 8.383; 9.539M, dorzolamid için 11.592; 16.618M, topiramat için 10.661; 16.575M olarak bulunmuştur. Brinzolamid, dorzolamid ve topiramat serbest enzimi, sülfonamid ve asetazolamid ise immobilize enzimi daha çok inhibe etmiştir.

Özet (Çeviri)

Carbonic anhydrase (CA) (E.C. 4.2.1.1), which reversibly catalyses the transformation of CO2 in all living things to HCO_3^- and H^+ by hidration, is a substantially significant enzyme. In this study, human CA-I, which is one of the isoenzymes of CA, was purified by an affinity gel in the structure of Sephorore-4B-L-tyrosine-sulfonamide, and the purity degree is checked with SDS-PAGE. The immobilization of the purified CA-I isoenzyme is performed on -aminohexyl agarose gel with glutaraldehyde. After the immobilization procedure, various analysis are made on free and immobilized CA-I enzymes. It is observed that for free and immobilized CA-I isoenzymes, optimum pH degrees are 10 and 9,5; active periods are 768h and 1096h; optimum temperatures are 35 oC and 25 oC; and thermal stabilities are 35 and 50 oC respectively. Classic CA inhibitors, sulfonamide, acetazolamide, brinzolamide, dorzolamide and topiramate preparations, medicines are utilized in the study. The inhibition effects of these preparations on free and immobilized CA-I isoenzymes are investigated. For free and immobilized CA-I isoenzymes, the IC50 values for effective inhibition are 19.083M and 8.1059M for sulfonamide; 0.7922M and 0.6655M for acetazolamide; 8.383M and 9.539M for brinzolamide; 11.592M and 16.618M for dorzolamide; 10.661M and 16.575M for topiramate respectively. It is found that while brinzolamide, dorzolamide and topiramate inhibited the free enzyme more, sulfonamide and acetazolamide inhibited the immobilized enzyme more effectively.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    178030

    İnsan karbonik anhidraz I (HCA I)geninin klonlanması, E.coli'de ekspresyonu ve Phe91Asn yönlendirilmiş mutageneziyle elde edilen mutant enzimin inhibitörlere karşı ilgisinin araştırılması

    Cloning and expression of human carbonic anhydrase I(HCA I)gene in E.coli and investigation of affinity of the mutant enzyme to the inhibitors which is obtained site directed mutagenesis of Phe91Asn

    MELTEM AYDIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    BiyolojiBalıkesir Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. FERAY KÖÇKAR

    PROF.DR. OKTAY ARSLAN

  2. Tez No

    123511

    Eritrositlerden karbonik anhidraz izoenzimlerinin saflaştırılması için yeni bir afinite jelinin sentezi ve uygulanması

    Application and synthesis of a new affinity gel for the purification of carbonic anhydrase isoenzymes from the erythrocytes

    ÖZEN ÖZENSOY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    KimyaBalıkesir Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. OKTAY ARSLAN

  3. Tez No

    45369

    Bazı pestisit ve bitki büyüme regülatörlerinin sığır ve insan eritrosit karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine etkilerinin araştırılması

    Başlık çevirisi yok

    İSMAİL ÇELİK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    BiyolojiYüzüncü Yıl Üniversitesi

    PROF.DR. HAYATİ ÇAMAŞ

  4. Tez No

    432244

    Karbonik anhidraz izoenzimlerinin saflaştırılması için yeni bir afinite jelinin sentezlenmesi

    A new afftinity gel synthesis for purification of carbonic anhydrase isoenzymes

    GAMZE ÖKEMLER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaBalıkesir Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. SEMRA IŞIK

  5. Tez No

    496319

    Yeni sekonder sülfonamidlerin sentezi ve in vitro karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine inhibisyon aktivitelerinin incelenmesi

    Synthesis of novel secondary sulfonamides and their in vitro carbonic anhydrase isozymes inhibition effects

    TANER GÖKÇEN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Biyokimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TURAN ÖZTÜRK

    DOÇ. DR. AHMET C. GÖREN

Geri Dön