Fipronilin nöroblastom SH-SY5Y hücre hattında sitotoksik etkisinin araştırılması
Investigation of the cytotoxic effect of fipronil on neuroblastoma SH-SY5Y cell line
- Tez No: 444641
- Danışmanlar: PROF. DR. GÜLDENİZ SELMANOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 106
Özet
Ülkemizde ağırlıklı olarak tahıl, mısır ve ayçiçeği ilaçlamasında kullanılan bir insektisit olan fipronilin sinir hücrelerinin sayısında ve morfolojisinde değişime neden olduğu bilinmektedir, ancak etki mekanizması aydınlatılmamıştır. Sinir hücrelerinde ortaya çıkan hasar çeşitli fizyolojik bozukluklara neden olabildiği gibi, nörodejeneratif hastalıklarla da ilişkili olabilmektedir. Bu çalışmada insan sinir hücresi hattı olan SH-SY5Y nöroblastom hücre hattında fipronile maruziyet sonucunda oluşabilecek nörotoksik etkiler araştırılmıştır. Bu tez çalışmasında SH-SY5Y hücreleri 24 ve 48 saat süresince 125, 250 ve 500 µM dozlarında fipronile maruz bırakılmıştır. Uygulama sonrasında fipronilin nörotoksisitesi MTT (3-(4 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2 5 difenil tetrazolium bromid) testi, laktat dehidrogenaz (LDH) testi, tripan mavisi boyama ve nötral kırmızısı alım testleri ile incelenmiştir. Diğer yandan çalışmada insan SH-SY5Y nöroblastom hücre hattının fipronile maruziyeti sonucu meydana gelebilecek nörodejeneratif değişiklikler, nöronal hücre iskeleti yapısına katılan nörofilamentlerin immünofloresan boyamalarıyla gösterilmiştir. Ayrıca akridin oranj – propidiyum iyodit boyama ve DAPI (4 ', 6-diamidino-2-fenilindol) yöntemleri ile hücre ölüm tipi ya da tipleri belirlenmiştir. Aynı zamanda, nörofilament alt birimlerinin fosforilasyon dereceleri immünositokimyasal yöntemle belirlenerek fipronilin akson canlılığına etkisi araştırılmıştır. Yapılan sitotoksisite testi sonuçlarına göre, fipronil doza ve inkübasyon süresine bağlı olarak SH-SY5Y hücrelerinde sitotoksisitede artışa sebep olmuştur. İmmünfloresan boyama sonuçlarına göre fipronilin artan dozlarına ve inkübasyon süresine bağlı olarak nörofilament miktarında azalma olduğu gösterilmiştir. Hücre ölüm tipini belirlemek için yapılan boyamalara göre ise fipronilin apoptotik hücre ölümüne neden olduğu ortaya konulmuştur.
Özet (Çeviri)
In our country, fipronil, an insecticide that is used to spraying mainly cereals, maize and sunflower causes changes in the number and morphology of nerve cells, but its mechanism has not been elucidated. As the damage occurred in nerve cells may cause various physiological disorders, it may be associated with neurodegenerative diseases. In this study, it was investigated that the cytotoxic effects that may occur as a result of exposure to fipronil in SH-SY5Y neuroblastoma cell line which is the human neural cell line. In this thesis, SH-SY5Y exposed to 125, 250 and 500 µM fipronil doses and incubated 24 and 48 hours. Neurotoxic effect of fipronil was examined by MTT (3-(4 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2 5 difenil tetrazolium bromid) test, lactate dehydrogenase (LDH) test, Trypan blue dye exclusion test and Neutral red uptake assay. Also, in this study, neurodegenerative changes that may occur as a result of human SH-SY5Y neuroblastoma cell line exposure to fipronil was examined by, changes may occur in neurofilament participating in the neuronal cytoskeleton structure will be indicated by immunofluorescence staining method. Acridine orange - propidium iodide and DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) staining methods was determined by the type of cell death. At the same time, was investigated the degree of phosphorylation of neurofilament subunits fipronil determining the effect of the axonal viability. According to the cytotoxicity test results, revealed that fipronil significantly increase cytotoxicity in a concentration and time dependent manner in SH-SY5Y. Besides, according to the immunofluorescence staining results, revealed that fipronil significantly decrease neurofilament content in a concentration and time dependent manner. According to the staining to determine the type of cell death it has been demonstrated fipronil caused apoptotic cell death.
Benzer Tezler
- Fipronil kalıntısı tayini için ultra-duyarlı ve etiketsiz elipsometrik aptasensör geliştirilmesi
Development of ultra-sensitive and label-free ellipsometric aptasensor for fipronil residues
ARZU ÇAĞLAYAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
KimyaKütahya Dumlupınar ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAFER ÜSTÜNDAĞ
- Farelerde fipronil ile indüklenen oksidatif stres, yangı ve apoptozise karşı malvidinin koruyucu etkisi
Protective effect of malvidin against fipronil-induced oxidative stress, inflammation and apoptosis in mice
SİMGE GARLI
Doktora
İngilizce
2024
Veteriner HekimliğiBurdur Mehmet Akif Ersoy ÜniversitesiFarmakoloji ve Toksikoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATMA KOCASARI
- Fipronil ve siflutrin pestisitlerinin zebra balıklarında (Danio rerio,Hamilton, 1822) sanger ve yeni nesil dizi analizi ile DNA metilasyon mekanizmasının araştırılması
İnvestigation of the DNA methylation mechanism of fipronil and cyfluthrin pesticides in zebrafish (Danio rerio, Hamilton, 1822) by sanger and next generation sequence analysis
GÜLSÜM KOÇAK
Doktora
Türkçe
2024
Su ÜrünleriGazi ÜniversitesiÇevre Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYLİN SEPİCİ DİNÇEL
PROF. DR. AYSEL ÇAĞLAN GÜNAL
- Yumurtaya verilen organik insektisit fipronil'in tavukların embriyonik ve kuluçka sonu erken dönem gelişimi üzerindeki zararlı etkilerinin belirlenmesi
Determination of deleterious effects of organic insecticide fipronil given in ovo on the development of chickens at embriyonic and early post-hatch periods
HALUK ÖZPARLAK
- Farklı dalga boyuna sahip ışınların Türkistan hamam böceği (Blatta lateralıs) erginleri üzerine etkisinin araştırılması
Investigation on the effects of different wavelengths of the light on the Turkestan cockroach (Blatta lateralis) adults
ABDULLAH BURHAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
ZiraatBursa Uludağ ÜniversitesiBitki Koruma Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NİMET SEMA GENÇER