P maddesi ve kalsitonin gen-ilişkili peptid'in çeşitli analitik yöntemlerle ölçülmesi
Determination of substance P and calcitonin gene-related peptide by various analytical method
- Tez No: 448968
- Danışmanlar: PROF. DR. DİLEK AK, DOÇ. DR. EROL ŞENER
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Kimya, Pharmacy and Pharmacology, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Anadolu Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 93
Özet
Bu çalışmada sıçan beyin, beyin sapı dokusunda P maddesi ve Kalsitonin gen-ilişkili peptid'in Sıvı Kromatografisi-Tandem Kütle Spektrometrisi ve Enzim Bağlı İmmunosorbent Analiz yöntemiyle analizi gerçekleştirilmiştir. C8 kolon (150x2.1 mm, 3.5 µm) ve %0.2 formik asit içeren su-asetonitril gradiyent hareketli faz sisteminde ayrılan P maddesi ve Kalsitonin gen-ilişkili peptid için kütle spektrometri optimizasyon parametreleri belirlenmiş, ardından yöntemin validasyonu gösterilmiştir. P maddesi ve Kalsitonin gen-ilişkili peptid için pozitif polaritede elde edilen kütle spektrumu ve sırasıyla m/z 674.3→[600+254.4] ve 952.2→1214.0 iyon geçişleri kullanılmıştır. Doğrusal aralık P maddesi için 5.85-438.52 ng/mL, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için 0.21-155.28 ng/mL'dir. Yöntemin tayin sınırları P maddesi için 5.85 ng/mL, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için 0.21 ng/mL'dir. Yöntemin doğruluğu P maddesi için %98'den büyük, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için %87'den büyük geri kazanım ile, tekrar edilebilirliği ise gün içi ve günler arası P maddesi için %15'den küçük, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için %11 bağıl standart sapma ile gösterilmiştir. Bu yöntem sıçan beyin ve beyin sapı dokularına uygulanmıştır. Yöntemin beyin dokusundaki doğruluğu P maddesi için %97'den büyük geri kazanım ile, kesinliği ise %7'den küçük bağıl standart sapma ile gösterilmiştir. Beyin sapı dokusundaki doğruluğu P maddesi için %98'den büyük, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için %95'den büyük geri kazanım ile, kesinliği ise Substance P için %7'den küçük, Kalsitonin gen-ilişkili peptid için %13'den küçük bağıl standart sapma ile gösterilmiştir. Doku numunelerinin (n=6) analizine göre, beyin sapı dokusundaki P maddesi ve Kalsitonin gen-ilişkili peptid bazal endojen derişimler sırasıyla 415.10±124.80 ng/g, 132.07±196.77 ng/g olarak, beyin dokusundaki P maddesi derişimi ise 57.95±38.01 ng/g olarak hesaplanmıştır. Beyin dokusunda Kalsitonin gen-ilişkili peptid düzeyi yöntemin tayin sınırının altında kaldığı için hesaplanamamıştır. Enzim Bağlı İmmunosorbent Analiz yöntemiyle, P maddesi ve Kalsitonin gen-ilişkili peptid için kit prosedürleri kullanılarak beyin ve beyin sapı dokusundaki derişimleri incelenmiştir. P maddesi düzeyi beyin ve beyin sapında belirlenememiştir. Kalsitonin gen-ilişkili peptid düzeyi ise beyin sapında 2351.24±292.49 ng/g, beyinde 1567.96±55.47 ng/g olarak belirlenmiştir.
Özet (Çeviri)
In this study, Substance P and Calcitonin Gene-Related Peptide analysis in rat brains and brain stem tissues were determined by using Liquid Chromotography-Tandem Mass Spectrometry and Enzyme Linked-Immunosorbent Analysis methods. Firstly mass spectrometry parameters for Substance P and CGRP were optimized after acheving separation with C8 column (150x2.1 mm, 3.5 µm) and mobile phase containing 0.2% formic acid in water-acetonitrile then the method have been validated. Mass spectrum was obtained in positive polarity for Substance P and CGRP, and ion transitions were used at m/z 674.3→[600+254.4] and 952.2→1214.0, respectively. Linearity range was 5.85-438.52 ng/mL for Substance P and 0.21-155.28 ng/mL for CGRP. The limit of quantification was 5.85 ng/mL for Substance P and 0.21 ng/mL for CGRP. Accuracy was shown with recoveries higher than 98% for Substance P, higher than 87% for CGRP. The method precision was shown by intra-day and inter-day precision lower than 15% RSD for Substance P and 11 % RSD for CGRP. This method was applied to rat brain and brain stem tissues. Accuracy in brain tissue was shown with recoveries higher than 97% and precision was shown lower than 7%RSD for Substance P. Accuracy in brain stem tissue was shown with recoveries higher than 98% for Substance P, higher than 95% for CGRP and precision was shown lower than 7% RSD for Substance P and 13%RSD for CGRP. According to tissue samples analysis (n=6), Substance P and CGRP basal endogene concentrations in brain stem tissue were calculated as 415.10±124.80 ng/g and 132.07±196.77 ng/g respectively, while Substance P concentration in brain was calculated as 57.95±38.01 ng/g. CGRP concentration in brain tissue could not be calculated because of lower levels than limit of quantification of proposed method. Substance P and CGRP concentration were determined in brain and brain stem tissues by using Enzyme Linked-Immunosorbent Analysis kit procedure. Substance P concentration wasn't calculated in brain and brain stem tissues. CGRP concentration was calculated as 2351.24±292.49 ng/g in brain stem, 1567.96±55.47 ng/g in brain.
Benzer Tezler
- Lomber disk hernisi olan hastalarda ağrı şiddeti ile nöroinflamatuar marker ilişkisinin tespit edilmesi
Investigation of the relationship between pain intensity and neuroinflammatory neuropeptides in patients with lumbar disc herniation
CANER ÇİÇEK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
NöroşirürjiBolu Abant İzzet Baysal ÜniversitesiBeyin ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YAŞAR DAĞISTAN
- Nandrolon ve testosteron uygulamasının tavşanlarda kalsiyum, kalsitonin ve parathormon düzeylerine etkileri
The effects of nandrolone and testosterone application on calcium and parathormone levels in rabbits
GÖKMEN KILINÇARSLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Veteriner HekimliğiSelçuk ÜniversitesiFizyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAFER DURGUN
- Konserve sosis üretiminde ısıl işlem parametreleri ile depolama süresince bazı kalite özelliklerinin belirlenmesi
Determinition of thermal process parameters and some quality characteristics of canned sausages during their storage
SELEN AKÇAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Gıda MühendisliğiSüleyman Demirel ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HAKAN KULEAŞAN
- A Quality management model in maritime education complying with STCW 95 convention and ruternational safety management code
Uluslararası Emniyet Yönetim Kuralı ve STCW 95 konvansiyonuna uygun denizcilik eğitiminde Kalite Yönetim Modeli
İSMAİL DEHA ER
- Sağlık çalışanlarının kalite yönetimine ilişkin görüşlerinin belirlenerek tutum ölçeğinin geliştirilmesi
Determining the views of healthcare professionals on quality management and developing attitude scale
SEYHAN ÇERÇİ
Doktora
Türkçe
2022
Hemşirelikİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaHemşirelikte Yönetim Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÜLKÜ BAYKAL
