Purification and characterization of 6-phosphogluconate dehydrogenase from quail (Coturnix coturnix Japonica) liver
6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin japon bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) karaciğerırinden saflaştırması ve karakciğerizasyonou
- Tez No: 453685
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Bingöl Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tez çalışmasında 14,6 EÜ/mg.protein spesifik aktivitesine sahip 6-fosfoglukonat dehidrojenaz (6PGD) enzimi bıldırcın karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve 2', 5'-ADP Sefaroz 4B afinite kromatografisi yöntemleri kullanılarak %89 verimle 112 kat saflaştırıldı. Enzim aktivitesi 340 nm'de spektrofotometrik olarak ölçüldü. Enzimin saflığı SDS-PAGE yöntemiyle kontrol edildi. Saflaştırılan enzimin ait alt birimlerinin molekül kütlesi SDS-PAGE yöntemiyle 44 KDa olarak hesaplandı ve protein tayini Bradford yöntemiyle gerçekleştirildi. Ayrıca enzim için optimum pH (8.0), optimum sıcaklık (60°C), optimum iyonik şiddet (600 mM Tris/HCl), stabil pH (8.0) gibi karakterizasyon çalışmaları yapıldı. İlaveten enzim substratları olan 6-PGA ve NADP+ için KM ve Vmax değerleri sırasıyla 58 ve 0,0015 mM; 0,0078 ve 0,057 EÜ/ml olarak belirlendi.
Özet (Çeviri)
In this study, 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PGD) enzyme was purified from the quail liver by using ammonium sulphate precipitation, and 2', 5'-ADP Sepharose 4B affinity chromatography methods, with specific activities 14.6 EU/ml, 89% yield and 112 purification fold. Enzyme activity was measured spectrophotometrically at 340 nm. SDS-PAGE checked the purity of the enzyme. The molecular weight of purified enzyme by the SDS-PAGE method was calculated to be 44 KDa. Protein determination was performed by the Bradford method. For the enzyme optimal pH (8.0), stable pH (8.0), optimum ionic strength (600 mM in Tris-HCl) optimal temperature (60°C) were determined. In addition KM and Vmax values for 6-phosphogluconate (6-PGA) and NADP+ were calculated as 0.058 and 0.0015 mM; 0.0078 and 0.057 EU/ml respectively
Benzer Tezler
- Purification and characterization of 6-phosphogluconate dehydrogenase from japanese quail (Coturnix coturnix Japonica) erythrocytes
6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin japon bıldırcın (coturnix coturnix japonica) eritrositlerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
HARDI RAFAT BAQI BAQI
- Sıçan ince barsağından 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin incelenmesi
Purification and characterization of 6-phosphogluconate dehydrogenase from the rat small intestine
DENİZ CEYHAN
- Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) eritrositlerinden 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflastırılması, karakterizasyonu ve bazı metallerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of 6-phosphogluconate dehydrogenase (E.C. 1.1.1.44) enzyme from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) erytrocyte and investigation of the effects of some metals on enzyme activity
AYŞEGÜL TARANCI
- Gökkuşağı alabalık solungacından 6- fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigatiuons on purification and characterization of 6 - phosphogluconate dehydrogenase from rainbow trout gills and inhibition effects of some metal ions on the enzyme activity
ARZU ÖZTÜRK KESEBİR
- Kompost solucanından 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı toprak kirleticilerin etkilerinin incelenmesi
Purification, characterization of the 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PGD) enzyme from the compost solution and the investigation of the effects of some soil polluters
UĞUR TOPSAKAL
