Purification and characterizatin of glucose 6-phosphate dehydrogenase from japanese quail erythrocytes
Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enziminin japon bıldırcın (Coturnix coturnix Japonica) eritrositlerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
- Tez No: 453686
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Bingöl Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Yüksek lisans tezi olarak sunulan bu çalışmada karbohidrat metabolizmasının önemli bir enzimi olan glukoz 6-fosfat dehidrogenaz (G6PD; EC 1.1.1.49) enzimi bıldırcın eritrosit dokularından 60,40 EU/mg spesifik aktiviteyle ve %77,17 verimle 2',5'-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi kullanılarak saflaştırıldı. Bıldırcın eritrosit G6PD enzimi için saflaştırma katsayısı 4137 olarak bulundu. Enzim için yapılan karakterizasyon çalışmalarında; stabil pH Tris-HCl tamponu pH 7,5, optimum pH Tris-HCl tamponu pH 8,0, optimum sıcaklık 65 oC, optimum iyonik şiddet 1 M Tris-HCl tamponu olarak bulundu. Enzimin saflığını kontrol etmek ve alt birim molekül kütlelerini tespit etmek amacıyla SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant gözlendi. Bıldırcın eritrosit G6PD enziminin alt birim molekül kütlesi yaklaşık 78,8 kDa olarak hesaplandı. Son olarak enzimin KM ve Vmax değerleri sırasıyla NADP+ koenzimi için 0,001 mM ve 0,124 EU/mL, G6P substratı için 0,012 mM ve 0,05 EU/mL olarak bulundu.
Özet (Çeviri)
In this master's thesis study, glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD; EC 1.1.1.49) which is an importance enzyme for the carbohydrate metabolism, was purified from quail's erythrocyte and characterized. The purification was performed by preparation of hemolysate and 2', 5'-ADP Sepharose-4B affinity chromatography. G6PD from quail's erythrocyte was obtained with a yield of 77.17% having a specific activity of 60.40 EU/mg. protein. The overall purification fold was around 4137. The characterization studies were showed: the stable pH value of enzyme to be 7.5 in Tris-HCl buffer, optimum pH value to be 8.0 in Tris-HCl buffer. The optimum temperature was found at 65oC and the optimum ionic strength at 1 M Tris-HCl. Molecular weight of G6PD enzyme from quail's erythrocyte was determined as 78.8 kDa by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Finally, the KM and Vmax values for substrate (G6P) and coenzyme (NADP+) of the G6PD enzyme were calculated. KM and Vmax values for the NADP+ coenzyme found as 0.001 mM and 0.124 EU/mL respectively, and the KM and Vmax values for G6P substrate found as 0.012 mM and 0.05 EU/mL respectively.
Benzer Tezler
- Purification of bacteriorhodopsin from halobacterium halobium and reconstitution studies in liposomes
Başlık çevirisi yok
M.BAKER ZABUT
- Bira ve alkol üretiminde kullanılan bazı enzimlerin mikrobiyal yolla eldesi
Başlık çevirisi yok
HÜSEYİN ÜSTÜNES
- Tavuk karaciğer gama-glutamil transferazının saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin araştırılması
The Purification of the chicken liver a gamma-glutamyl transferase and the research of some kinetic properties
FİLİZ TARCAN
- Zonguldak (Kokaksu) bölgesi boksitlerinden alümina üretim parametrelerinin saptanması ve ekonomik değerlendirilmesi
The Determination of the parameters of alümina production from the bauxite of Zonguldak (Kokaksu region) and the economic evaluation
F.GÜNEŞ KOZA
